實驗十三流式細(xì)胞技術(shù)檢測腫瘤治療藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞凋-wenkub
2023-01-20 15:59:12 本頁面
【正文】 容物流出 , 引起炎癥 。 大連理工大學(xué) 環(huán)境與生命學(xué)院 流式細(xì)胞儀工作原理 流式細(xì)胞儀 （ Flow Cytometer） 集激光技術(shù) 、 電子物理技術(shù) 、 光電測量技術(shù) 、 電子計算機(jī)技術(shù) 、 細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù) 、 單克隆抗體技術(shù)為一體的一種新型高科技儀器 。 凋亡細(xì)胞在 G1峰前出現(xiàn)亞二倍體峰 ， 即凋亡峰 （ Ap峰 ） 。 微量加樣器 (1181。 ② 試劑 放射線菌素 D（ 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的腫瘤治療藥物 ， 如喜樹堿 、 紫杉醇 、中藥砒霜等 ） ；熒光探針：用 PBS()將 PI配成 500 181。 ? 加約 1ml PBS重懸細(xì)胞 ， 用注射器迅速注入到 4ml4℃ 的 70%的酒精中 ， 固定 8小時以上 。 ? 3個小時之內(nèi)在流式細(xì)胞儀上檢測樣品 。 大連理工大學(xué) 環(huán)境與生命學(xué)院 ? 制備流式樣品需要注意哪幾點 。 ? 可結(jié)合科研 ， 將課題組項目中研究的一些凋亡誘導(dǎo)劑作為研究對象進(jìn)行分析 。 ? 將樣品插到冰浴中 ， 停止酶的作用 。 大連理工大學(xué) 環(huán)境與生命學(xué)院 FACSCalibur, BD Bioscience 大連理工大學(xué) 環(huán)境與生命學(xué)院 ? Hela細(xì)胞的傳代培養(yǎng) ? 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡：向?qū)?shù)生長期細(xì)胞中加入放射線菌素 D（ 可結(jié)合科研采用其他誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的腫瘤治療藥物 ） 分別為 、 、 4mg/L, 作用 6小時 。l、200181。 ? 另外 ， 細(xì)胞凋亡受基因調(diào)控 ， 有賴于某些蛋白質(zhì)的合成 ， 用流式細(xì)胞儀可同時測定凋亡細(xì)胞的 FSC/SSC及 DNA/蛋白質(zhì) ， 進(jìn)行多參數(shù)分析以研究不同的凋亡誘導(dǎo)作用機(jī)制 。 凋亡早期細(xì)胞因體積減小 ， 胞漿及染色質(zhì)固縮 ， FSC變小 ， SSC增大 ， 凋亡晚期細(xì)胞 FSC、 SSC均變小
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