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分子生物學講座(8)-wenkub

2023-01-20 03:23:33 本頁面
 

【正文】 一套技術(shù)或手段。還有巰甲基半乳糖苷( TMG)。 乳糖 +H2O 別乳糖 葡萄糖 +半乳糖 β 半乳糖苷酶 在研究誘導作用時,并不真正用乳糖進行,因為它會被催化降解。 說明: 在沒有乳糖存在的情況下,乳糖操縱元并非完全停止,還存在著本底組成型合成( background constitutive synthesis)。 在乳糖操縱元中,調(diào)控基因 1ac I位于 P鄰近,有其自身的啟動子和終止子,轉(zhuǎn)錄方向和結(jié)構(gòu)基因群的轉(zhuǎn)錄方向一致,編碼產(chǎn)生由 347個氨基酸組成的調(diào)控蛋白 R,在環(huán)境沒有乳糖存在的情況下,R形成分子量為 152023的活性四聚體,能特異地與操縱子 o緊密結(jié)合,從而阻止結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄;當環(huán)境中有足夠的乳糖時,乳糖受 β半乳糖苷酶作用轉(zhuǎn)變?yōu)閯e乳糖,別乳糖與 R結(jié)合,使 R的空間構(gòu)像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性緊密結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。 調(diào)控基因 (regulatory gene)是編碼能與操縱子序列結(jié)合的調(diào)控蛋白的基因。在這過程中乳糖 (實際起作用的是別乳糖 )就是誘導劑。因為阻遏蛋白和操縱子的結(jié)合并不是完全牢固的。實際上用的是一些化學合成的乳糖類似物,例如異丙基硫代半乳糖苷(isopropylthiogalactoside, IPTG)。 事例 Xgal(5溴 4氯 3吲哚 β半乳糖苷 )也是一種人工化學合成的半乳糖苷,可被 β半乳糖苷酶水解產(chǎn)生蘭色化合物,因此可以用作 β半乳糖苷酶活性的指示劑。廣義的生物技術(shù)指任何利用活的生物體或其一部分生產(chǎn)產(chǎn)品或改良生物品質(zhì)的技術(shù);狹義的生物技術(shù)是專指以DNA重組技術(shù)和單克隆技術(shù)為標志發(fā)展起來的新技術(shù)。
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