農(nóng)藥分析-氣相色譜技術(shù)-wenkub
2023-01-20 03:11:48 本頁(yè)面
【正文】 ? 離子交換色譜種類 ? 多孔樹脂 細(xì)網(wǎng) （凝膠型）和粗網(wǎng)（大孔型）。 檢測(cè)器 ? 電子捕獲檢測(cè)器（ ECD）：只對(duì)于具有電負(fù)性的物質(zhì)，如含有鹵素、 S、 P、 N的物質(zhì)有響應(yīng)。 ? 濃度型： S= Ac 1F 0/c 2 m 其中： A峰面積（ cm2）， c 1為記錄器靈敏度（ mv/cm）， c 2 為記錄器走紙速度（ cm/min）， F 0為出口流動(dòng)相速度（ mL/min）， m為進(jìn)入檢測(cè)器的質(zhì)量。 ?溫度直接影響色譜柱的選擇性、分離效果和檢測(cè)器靈敏度及穩(wěn)定性。螺旋形直徑與柱內(nèi)徑之比為 15： 1— 25： 1。氣路結(jié)構(gòu) /減壓閥、凈化器、穩(wěn)壓閥、壓力表、流量計(jì)。 ? 準(zhǔn)確稱取樣品，加入一定量某種物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)，然后進(jìn)行色譜分析。 絕對(duì)校正因子與相對(duì)校正因子 ? 絕對(duì)校正因子 ? 指某組分 I通過(guò)檢測(cè)器的量與檢測(cè)器對(duì) I組分響應(yīng)信號(hào)之比： ? fiA = AI / mi； fih = mi / hI ? 相對(duì)校正因子 ? 指某組分 I與基準(zhǔn)組分 s的絕對(duì)校正因子之比。在色譜條件一定時(shí)，任何一種物質(zhì)都有確定的保留值。 ? A、 B兩組分分離的必要條件： ? 。 ? 基線寬度 Y 色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)上的切線在基線上的截距。 ? 死體積 VM = （ 流速 時(shí)間 ） ? 保留體積 VR= ? 調(diào)整保留體積 VR’= t.’RF=VRVM ? 相對(duì)保留值 α = t’ R（ 2） / t’ R （ 1） ? 組分 1對(duì)組分 2相對(duì)保留值 氣相色譜的基本概念 ? 分配系數(shù) K= Cs/Cm ? 被分離組分在固相和在流動(dòng)相的濃度之比 。 ? 色譜柱和檢測(cè)器溫度由控溫儀控制 。利用流動(dòng)相在在固定相上的溶度或吸附力比試樣強(qiáng)，以及試樣中各組分的溶度與吸附力差異而分離。 如酶與基質(zhì)、抑制劑、變構(gòu)效應(yīng)劑或輔酶；激素與細(xì)胞受體；維生素與結(jié)合蛋白；基團(tuán)與核酸；抗體與抗原；外源凝集素與紅細(xì)胞表面的抗原等都具有親和力。 ? 凝膠色譜：空間排除色譜、分子排除色譜，分子篩色譜、液體排除色譜、體積排除色譜等（ GPC），用于大分子分離。樹脂溶漲后在小球中滯留的水是穩(wěn)定的水相，小球間是流動(dòng)的水相。 ? 離子交換色譜 ：（ IC） 利用離子交換樹脂作固定相分離離子型化合物的色譜法。 ? 色譜中重要的概念是“固定相”與“流動(dòng)相”。第四章 色譜技術(shù) ? 色譜法（ Cheromatography）是 19世紀(jì)俄國(guó)植物學(xué)家茨維特（ Tsweett）創(chuàng)立的一種分離混合物的技術(shù)。 ? 本章介紹幾種常見色譜的原理，重點(diǎn)介紹氣相色譜分離分析技術(shù)。用高效液相色譜技術(shù)和離子交換樹脂柱，用含有某種特定離子的水溶液作流動(dòng)相，在降低流動(dòng)相背景信號(hào)的前提下進(jìn)行離子分離；或通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的 pH值以抑制試樣組分的電離，從而分離離子化合物（離子抑制色譜） 。離子交換樹脂在兩個(gè)水相間起半透膜作用。生化中水作流動(dòng)相成為凝膠過(guò)濾色譜；合成高聚物中用有機(jī)物作流動(dòng)相成為凝膠滲透色譜。 按照色譜的動(dòng)力學(xué)過(guò)程分類 ? 洗脫法 ： 組分在固定相和流動(dòng)性反復(fù)的進(jìn)行分配和再分配，或吸附與解吸。 氣相色譜 （ GC） ?氣相色譜是用氣體作流動(dòng)相的色譜技術(shù) 。 樣品經(jīng)檢測(cè)后信號(hào)進(jìn)入放大器放大 ， 進(jìn)入記錄儀記錄 。 ? 色譜區(qū)域?qū)挾龋航M分在色譜柱中譜帶擴(kuò)張函數(shù) 。 ? Y= 4 σ ； Y1/2 = ? 分配容量 k=vl/vg 柱內(nèi)液體所占體積 /柱內(nèi)氣體所占體積。 ? 。通過(guò)比較以知物與未知物的保留參數(shù)可以確定時(shí)什么物質(zhì)。 ? fisA = miAs / AI ms ； fish = mi hs / ms hI ? 一般文獻(xiàn)是指相對(duì)校正因子。根據(jù)被測(cè)物質(zhì)和內(nèi)標(biāo)在色譜圖上相應(yīng)峰面積（或峰高）和相對(duì)校正因子求出某組分的含量。 ? ：進(jìn)樣器、汽化室。 空心毛細(xì)管柱材質(zhì)為玻璃或石英，內(nèi)徑一般為 —，長(zhǎng)度為 30— 300m，螺旋形。 ? ：檢測(cè)器將載氣中組分轉(zhuǎn)變成易于測(cè)量的（電）信號(hào)。 氣體樣品 Sg單位為 ； 液體樣品 Sl= 60 Ac 1/c 2 m ， Sl單位為 ， 60 是時(shí)間分換算成秒的因子。 β — 放射源為負(fù)極，不銹剛為正極。前者溶漲后為多孔樹脂，孔徑大小決定于樹脂交連度。 ? 薄殼樹脂 在玻璃微珠（ ≈ 30 μm）的表面形成薄的（ ≈1μm）離子交換樹脂層。 ?試樣容量比薄殼樹脂更小，但是表面積對(duì)體積比值更高，柱效高，但是強(qiáng)度不如薄殼樹脂，有時(shí)會(huì)脫落。樹脂交換量與硅膠表面積成正比，顆粒小的柱效高，分離時(shí)間短。用離子交換樹脂要有強(qiáng)的滲透性。 離子對(duì)色譜法 ? 離子對(duì)色譜分為正相與反相。如十八烷基硅膠鍵合相或苯基硅膠鍵合相，流動(dòng)性用低濃度的離子對(duì)試劑水溶液或能溶于水的有機(jī)溶劑，如甲醇或乙醇等與水組成的混合溶劑。利用碳鏈較長(zhǎng)的磺酸鹽可以增大保留值，利用磷酸二氫根可增大親水性。 反相離子對(duì)色譜機(jī)理 ?各種機(jī)理 ? 與試劑結(jié)合后改變了疏水性，影響了在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)，從而改變了色譜行為。 ? 離子相互作用 非極性固定相的表面先吸附流動(dòng)相中部分親脂性的帶正或負(fù)電荷的離子對(duì)形成第一正、或負(fù)電層。因?yàn)楦鞣N組分的離子與過(guò)渡性表面的疏水作用和雙電層的靜電引力不同因而表現(xiàn)不同的保留值。 ?本身中性，不含可離解基團(tuán)。 固定相種類 ?葡聚糖凝膠 ? Sephadex G 蔗糖經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的有葡萄糖殘基構(gòu)成的分子量大的聚合物。 ? Sephadex G系列可以經(jīng)受高溫消毒，對(duì)水、鹽溶液、有機(jī)溶劑、堿和弱酸都穩(wěn)定。適用于水、甲醇、 DMSO作流動(dòng)相。 聚丙烯酰
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1