蛋白質(zhì)工程ppt課件-wenkub
2022-10-09 20:21:38 本頁面
【正文】 組技術(shù)、隨機引物體外重組法、交錯延伸法 易錯 PCR(errorprone PCR) ? 一種相對簡單、快速廉價的隨機突變方法 ? 通過改變 PCR反應(yīng)條件，使擴增的基因出現(xiàn)少量堿基錯配，從而導(dǎo)致目的基因的隨機突變。 ? 1999年， Stemmer等把 DNA改組延伸到族改組。 酶分子定向進化的歷史 ? Sol Spiegelman在 20世紀 60年代利用 RNA噬菌體 Q進行實驗，是第一次在分子水平上定向改造單一分子。在實驗結(jié)束，蛋白質(zhì)或 RNA突變采用生化方法鑒定。 ? 擴增， Amplification:確定的突變復(fù)制擴增，了解 DNA序列的突變。 ?物理、化學(xué)法：對蛋白質(zhì)進行變性、復(fù)性處理，修飾蛋白質(zhì)側(cè)鏈官能團，分割肽鏈，改變表面電荷分布促進蛋白質(zhì)形成一定的立體構(gòu)像等等； ?生物化學(xué)法：使用蛋白酶選擇性地分割蛋白質(zhì)，利用轉(zhuǎn)糖苷酶、酯酶、酰酶等去除或連接不同化學(xué)基團，利用轉(zhuǎn)酰胺酶使蛋白質(zhì)發(fā)生膠連等等。通過基因重組等實驗直接考察分析結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系； ? 通過分子動力學(xué)、分子熱力學(xué)等，根據(jù)能量最低、同一位置不能同時存在兩個原子等基本原則分析計算蛋白質(zhì)分子的立體結(jié)構(gòu)和生物功能。 ?技術(shù)： ?定點突變 ?定向進化。 ? 生物材料科學(xué)家正積極探索將蛋白質(zhì)工程應(yīng)用于微電子方面。 ? 蛋白質(zhì)工程將蛋白質(zhì)與酶的研究推進到嶄新的時代，為蛋白質(zhì)和酶在工業(yè)、農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥方面的應(yīng)用開拓了誘人的前景。 1987年枯草桿菌蛋白酶改造活力提高 10倍。 ?這是一個年輕的學(xué)科，目前，蛋白質(zhì)工程尚未有統(tǒng)一的定義。 ?一般認為蛋白質(zhì)工程就是通過基因重組技術(shù)改變或設(shè)計合成具有特定生物功能的蛋白質(zhì)。 ? 佩里（ Perry） 1984年溶菌酶分子改造使酶熱穩(wěn)定性提高。 ? 例如，科學(xué)家通過對胰島素的改造，已使其成為速效型藥品。使用計算機的方法設(shè)計蛋白質(zhì)是最具挑戰(zhàn)性的工作。 結(jié)構(gòu)、功能的設(shè)計和預(yù)測 ? 根據(jù)對天然蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能分析建立起來的數(shù)據(jù)庫里的數(shù)據(jù)，預(yù)測一定氨基酸序列肽鏈空間結(jié)構(gòu)和生物功能；可以根據(jù)特定的生物功能，設(shè)計蛋白質(zhì)的氨基酸序列和空間結(jié)構(gòu)。 ? ＣＡＰＤ研究的內(nèi)容也就是應(yīng)用軟件的開發(fā)，包括數(shù)據(jù)分析處理算法的研究，蛋白質(zhì)設(shè)計模擬模型的建立以及計算機程序編寫和軟件可用性的研究 Protein design ? Protein design is the design of new protein molecules from scratch, or the deliberate design of a new molecule by making calculated variations o
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