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23--分解纖維素的細(xì)菌的分離-wenkub

2022-09-01 18:13:25 本頁面
 

【正文】 右的土壤中。 二、實(shí) 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) 請你根據(jù)實(shí)驗(yàn)流程圖和提供的三個(gè)資料以及 “ 操作提示 ” ,在思考有關(guān)問題的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)出一個(gè)詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案。 纖維二糖 C1酶、 Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纖維素 ①取二支 20mL的試管 實(shí)驗(yàn):纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn) ②各加入一張濾紙條 ③各加入 ,物質(zhì)量為 的醋酸-醋酸鈉緩沖液 11ml和 10ml 甲 乙 ④在乙試管中加入 1mL纖維素酶 ⑤兩支試管固定在錐形瓶中,放在 140r/min的搖床上振蕩 1h ⑥ 結(jié)果:乙試管的濾紙條消失 討論 :乙試管的濾紙條為什么會(huì)消失?甲試管的作用是什么? 提示: 本實(shí)驗(yàn)的自變量是纖維素酶的有無,自變量的操縱方法是:在一支試管中添加適量( 1mL)的纖維素酶溶液,在另一支試管不添加纖維素酶,但需加入等量的緩沖液,不能加入蒸餾水,否則會(huì)影響溶液的 pH。 一、基礎(chǔ)知識(shí) 棉花 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。 實(shí)驗(yàn)分析: P27的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對照的? 剛果紅染色法 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物 ,而不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 將樣品涂布在鑒別纖 維素分解菌的培養(yǎng)基上 篩選產(chǎn)生透 明圈的菌落 ①分布環(huán)境 土壤取樣: 富含纖維素的環(huán)境中 操作步驟 由于生物適應(yīng)一定的環(huán)境,環(huán)境對生物有選擇作用,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。 選擇培養(yǎng) 增加 纖維素分解菌的 濃度 ,以 確保 能夠從樣品中 分離所需要的微生物 。7H2O KH2PO4 MgSO4 C、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對照實(shí)驗(yàn),說明選擇培養(yǎng)基的作用 稱取土樣 20 g,在 無菌條件 下加入裝有30 mL培養(yǎng)基的搖瓶中。課題 2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。 為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物? P29旁欄思考 按照課題 1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋 101~ 107倍。 方法二:在 時(shí)就加入剛果紅。 純化培養(yǎng) 四、結(jié)果分析與評價(jià) 出菌落 對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。 為了確定分離得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行 _____________實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有 ______ 發(fā)酵和 ______ 發(fā)酵。 ?(2)某同學(xué)根據(jù)需要,配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。7H2O KCl 酵母膏、水解酪素 g g 適量 葡萄糖 明顯多于
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