【正文】 氨酸，因此在280nm處有特征性吸收峰，可用蛋白質(zhì)定量測定?！　。?、蛋白質(zhì)變性：在某些物理和化學因素作用下，其特定的空間構(gòu)象被破壞，從而導致其理化性質(zhì)的改變和生物活性的喪失?！　。?、蛋白質(zhì)的沉淀：在適當條件下，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。在氧分壓較低時，與氧氣結(jié)合較難，氧解離曲線呈Ｓ狀曲線?！　∧蛩鼗螓}酸胍可破壞次級鍵　　β巰基乙醇可破壞二硫鍵　　２、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)特有性質(zhì)和功能的結(jié)構(gòu)基礎。這種蛋白質(zhì)分子中各個亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用，為四級結(jié)構(gòu)。　　２）蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)：指整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置，顯示為長距離效應。α螺旋的每個肽鍵的ＮＨ和第四個肽鍵的羧基氧形成氫鍵，氫鍵的方向與螺旋長軸基本平形?！　。?、蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)：包括二級、三級、四級結(jié)構(gòu)。半胱氨酸的巰基是該化合物的主要功能基團。二肽中游離的氨基和羧基繼續(xù)借脫水作用縮合連成多肽。在某一ＰＨ的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，成為兼性離子，呈電　?。病被岬淖贤馕招再|(zhì)　　芳香族氨基酸在280nm波長附近有最大的紫外吸收峰，由于大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這些氨基酸殘基，氨基酸殘基數(shù)與蛋白質(zhì)含量成正比，故通過對280nm波長的紫外吸光度的測量可對蛋白質(zhì)溶液進行定量分析?！　。?、茚三酮反應　　　氨基酸的氨基與茚三酮水合物反應可生成藍紫色化合物，此化合物最大吸收峰在570nm波長處。10個以內(nèi)氨基酸連接而成多肽稱為寡肽；39個氨基酸殘基組成的促腎上腺皮質(zhì)激素稱為多肽；51個氨基酸殘基組成的胰島素歸為蛋白質(zhì)。GSH的巰基具有還原性，可作為體內(nèi)重要的還原劑保護體內(nèi)蛋白質(zhì)或酶分子中巰基免被氧化，使蛋白質(zhì)或酶處于活性狀態(tài)?！　　　。保┑鞍踪|(zhì)的二級結(jié)構(gòu)：指蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu)，也就是該段肽鏈骨架原子的相對空間位置，并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象?！　ˇ抡郫B：多肽鏈充分伸展，各肽鍵平面折疊成鋸齒狀結(jié)構(gòu)，側(cè)鏈Ｒ基團交錯位于鋸齒狀結(jié)構(gòu)上下方；它們之間靠鏈間肽鍵羧基上的氧和亞氨基上的氫形成氫鍵維系構(gòu)象穩(wěn)定．　　β轉(zhuǎn)角：常發(fā)生于肽鏈進行180度回折時的轉(zhuǎn)角上，常有４個氨基酸殘基組成，第二個殘基常為脯氨酸?！　≈饕瘜W鍵：疏水鍵（最主要）、鹽鍵、二硫鍵、氫鍵、范德華力。由一條肽鏈形成的蛋白質(zhì)沒有四級結(jié)構(gòu)?！　〖〖t蛋白：只有三級結(jié)構(gòu)的單鏈蛋白質(zhì)，易與氧氣結(jié)合，氧解離曲線呈直角雙曲線。因為：第一個亞基與氧氣結(jié)合以后，促進第二及第三個亞基與氧氣的結(jié)合，當前三個亞基與氧氣結(jié)合后，又大大促進第四個亞基與氧氣結(jié)合，稱正協(xié)同效應。包括：　　，破壞水化層。主要為二硫鍵和非共價鍵的破壞，不涉及一級結(jié)構(gòu)的改變?！　。怠⒌鞍踪|(zhì)的呈色反應　?。航?jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸可發(fā)生此反應，詳見二、３　b. 雙縮脲反應：蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸酮共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色。根據(jù)支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等?！　。址Q凝膠過濾。　　八、多肽鏈中氨基酸序列分析　　　　（蛋白質(zhì)水解為個別氨基酸，測各氨基酸的量及在蛋白質(zhì)中的百分組成）　　　　　　　　　　↓　　　測定肽鏈頭、尾的氨基酸殘基　　　　　 二硝基氟苯法（DNP法）　　　頭端 　　　　　　　　　　　　　　　尾端　羧肽酶Ａ、Ｂ、Ｃ法等　　　　　 丹酰氯法 　　 ↓ 　　　水解肽鏈，分別分析　　　　胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）法：水解芳香族氨基酸的羧基側(cè)肽鍵　　　　胰蛋白酶法：水解賴氨酸、精氨酸的羧基側(cè)肽鍵　　　　溴化脯法：水解蛋氨酸羧基側(cè)的肽鍵　　　　　　　　↓　　　Edman降解法測定各肽段的氨基酸順序　　　?。ò被┒税被岬挠坞xα氨基與異硫氰酸苯酯反應形成衍生物，用層析法鑒定氨基酸種類） 　　。　?。?、堿基：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　NH2　　　　　NH2　　　　O　　CH3　O　　　　　　　　O　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　O　　　　　　O　　　　　O　　　　　　　NH2　　　　　胞嘧啶　　胸腺嘧啶　　尿嘧啶　　　　　　鳥嘌呤　　　　　　腺嘌呤　嘌呤和嘧啶環(huán)中均含有共軛雙鍵，因此對波長260nm左右的紫外光有較強吸收，這一重要的理化性質(zhì)被用于對核酸、核苷酸、核苷及堿基進行定性定量分析?！　∪NA的空間結(jié)構(gòu)與功能　　?。?、DNA的二級結(jié)構(gòu)　　DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)是核酸的二級結(jié)構(gòu)?！　　M向靠互補堿基的氫鍵維系，縱向則靠堿基平面間的疏水性堆積力維持，尤以后者為重要?！　。场⒐δ堋　　NA的基本功能就是作為生物遺傳信息復制的模板和基因轉(zhuǎn)錄的模板，它是生命遺傳繁殖的物質(zhì)基礎，也是個體生命活動的基礎。如：名　　稱功　　能核蛋白體RNA　(rRNA)核蛋白體組成成分信使RNA　(mRNA)蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運RNA　(tRNA)轉(zhuǎn)運氨基酸不均一核RNA　(HnRNA)成熟mRNA的前體小核RNA　(SnRNA)參與HnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運小核仁RNA　(SnoRNA)rRNA的加工和修飾１、信使RNA（半衰期最短）　?。保﹉nRNA為mRNA的初級產(chǎn)物，經(jīng)過剪接切除內(nèi)含子，拼接外顯子，成為成熟的mRNA并移位到細胞質(zhì)　?。玻┐蠖鄶?shù)的真核mRNA在轉(zhuǎn)錄后５′末端加上一個７甲基鳥嘌呤及三磷酸鳥苷帽子，帽子結(jié)構(gòu)在mRNA作為模板翻譯成蛋白質(zhì)的過程中具有促進核蛋白體與mRNA的結(jié)合，加速翻譯起始速度的作用，同時可以增強mRNA的穩(wěn)定性?！　。?、轉(zhuǎn)運RNA（分子量最小）　?。保﹖RNA分子中含有10％～20％稀有堿基，包括雙氫尿嘧啶，假尿嘧啶和甲基化的嘌呤等?！　。常┤壗Y(jié)構(gòu)為倒L型?！　。玻﹔RNA與核糖體蛋白共同構(gòu)成核糖體，它是蛋白質(zhì)合成機器－－核蛋白體的組成成分，參與蛋白質(zhì)的合成。監(jiān)測是否發(fā)生變性的一個最常用的指標是DNA在紫外區(qū)260nm波長處的吸光值變化。不同來源的核酸變性后，合并一起復性，只要這些核苷酸序列可以形成堿基互補配對，就會形成雜化雙鏈，這一過程為雜交。　第三章　　酶　　一、酶的組成　　單純酶：僅由氨基酸殘基構(gòu)成的酶。酶蛋白與輔助因子結(jié)合形成的復合物稱為全酶，只有全酶才有催化作用?！? 三、酶反應動力學　　酶促反應的速度取決于底物濃度、酶濃度、PH、溫度、激動劑和抑制劑等。　　，只與酶的結(jié)構(gòu)、酶所催化的底物和反應環(huán)境如溫度、PH、離子強度有關，與酶的濃度無關。升高溫度一方面可加快酶促反應速度，同時也增加酶的變性?！　。?、PH　　酶活性受其反應環(huán)境的PH影響，且不同的酶對PH有不同要求，酶活性最大的某一PH值為酶的最適PH值，但多數(shù)酶的最適PH接近中性?！　。?、抑制劑　　凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白變性的物質(zhì)統(tǒng)稱為酶的抑制劑。又可分為：　?。喝甾r(nóng)藥敵百蟲、敵敵畏等有機磷化合物能特民地與膽堿酯酶活性中心絲氨酸殘基的羥基結(jié)合，使酶失活，解磷定可解除有機磷化合物對羥基酶的抑制作用。采用透析或超濾的方法可將抑制劑除去，使酶恢復活性?！　max降低，Km值不變　?。簝H與酶和底物形成的中間產(chǎn)物結(jié)合，使中間產(chǎn)物的量下降?！　。?、變構(gòu)酶　　體內(nèi)一些代謝物可以與某些酶分子活性中心外的某一部位可逆地結(jié)合，使酶發(fā)生變構(gòu)并改變其催化活性，有變構(gòu)激活與變構(gòu)抑制?！　∥濉⑼っ浮　⊥っ甘侵复呋嗤幕瘜W反應，而酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學性質(zhì)不同的一組酶。　　如乳酸脫氫酶是四聚體酶。單個亞基無酶的催化活性?！　　　　　　　　　　　　　　〉谒恼隆　【S生素　　一、脂溶性維生素　　１、維生素A　　作用：與眼視覺有關，合成視紫紅質(zhì)的原料；維持上皮組織結(jié)構(gòu)完整；促進生長發(fā)育?！　。?、維生素E　　作用：體內(nèi)最重要的抗氧化劑，保護生物膜的結(jié)構(gòu)與功能；促進血紅素代謝；動物實驗發(fā)現(xiàn)與性器官的成熟與胚胎發(fā)育有關?！　。?、維生素B2　　又名核黃素，體內(nèi)的活性型為黃素單核苷酸（FMN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）　　FMN和FAD是體內(nèi)氧化還原酶的輔基，缺乏時可引起口角炎、唇炎、陰囊炎、眼瞼炎等癥?！　×姿徇炼呷┦前被岽x中的轉(zhuǎn)氨酶及脫羧酶的輔酶，也是δ氨基γ酮戊酸（ALA）合成酶的輔酶。　?。?、葉酸　　以四氫葉酸的形式參與一碳基團的轉(zhuǎn)移，一碳單位在體內(nèi)參加多種物質(zhì)的合成，如嘌呤、胸腺嘧啶核苷酸等。一方面不利于蛋氨酸的生成，同時也影響四氫葉酸的再生，最終影響嘌呤、嘧啶的合成，而導致核酸合成障礙，產(chǎn)生巨幼紅細胞性貧血?！　。玻┍峒っ缸儤?gòu)抑制劑：ATP 、肝內(nèi)的丙氨酸變構(gòu)激活劑：1，6雙磷酸果糖　?。常┢咸烟羌っ浮　∽儤?gòu)抑制劑：長鏈脂酰輔酶A　　注：此項無需死記硬背，理解基礎上記憶是很容易的，如知道糖酵解是產(chǎn)生能量的，那么有ATP等能量形式存在，則可抑制該反應，以利節(jié)能，上述的檸檬酸經(jīng)三羧酸循環(huán)也是可特殊，如上述的1，6雙磷酸果糖。 (1)糖原　　　　　　　1磷酸葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　　(2)葡萄糖　己糖激酶 6磷酸葡萄糖　　6磷酸果糖6磷酸果糖1激酶　　　　　　ATP　ADP　　　　　　　　　　　　　　　ATP　　　ADP　　　　　　　　　　　　磷酸二羥丙酮　　　　　　　　　　1,6二磷酸果糖　　　　　　　　　　　 　　3磷酸甘油醛 1,3二磷酸甘油酸　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　NAD+　　NADH＋H+ 3丙酮酸　丙酮酸激酶ADP　　ATP　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ADP　　ATP丙酮酸 乳酸　　　NADH＋H+　　NAD+注：紅色表示該酶為該反應的限速酶；藍色ATP表示消耗，紅色ATP和NADH等表示生成的能量或可以轉(zhuǎn)變?yōu)槟芰康奈镔|(zhì)?！　。玻┏墒旒t細胞完全依賴糖酵解供能，神經(jīng)、白細胞、骨髓等代謝極為活躍，即使不缺氧也常由糖酵解提供部分能量。肌肉除糖異生活性低外，又沒有葡萄糖6磷酸酶?！　。?、調(diào)節(jié)　?。保┍崦摎涿笍秃象w　　抑制：乙酰輔酶A、NADH、ATP　　激活：AMP、鈣離子　?。玻┊悪幟仕崦摎涿负挺镣於崦摎涿浮　ADH、ATP反饋抑制　?。?、生理意義　　１）基本生理功能是氧化供能?！　∪⒘姿嵛焯峭緩剑?、 過程　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖　　　　　　　　　　　　NADP+　　　　　　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖脫氫酶 NADPH　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖酸　　　　　　　　　　　　NADP+　　　　　　　　　　　　NADPH　　　　　　　　　　　　　5磷酸核酮糖　　　　　　　　　　　　　5磷酸核糖　　　　5磷酸木酮糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　7磷酸景天糖　　　3磷酸甘油醛　　　5磷酸木酮糖　　　　4磷酸赤蘚糖　　　6磷酸果糖　　　3磷