【正文】 氨酸，因此在280nm處有特征性吸收峰，可用蛋白質(zhì)定量測(cè)定?！　。场⒌鞍踪|(zhì)變性：在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特定的空間構(gòu)象被破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)的改變和生物活性的喪失?！　。?、蛋白質(zhì)的沉淀：在適當(dāng)條件下，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。在氧分壓較低時(shí)，與氧氣結(jié)合較難，氧解離曲線(xiàn)呈Ｓ狀曲線(xiàn)。　　尿素或鹽酸胍可破壞次級(jí)鍵　　β巰基乙醇可破壞二硫鍵　?。病⒌鞍踪|(zhì)空間結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)特有性質(zhì)和功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。這種蛋白質(zhì)分子中各個(gè)亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用，為四級(jí)結(jié)構(gòu)?！　。玻┑鞍踪|(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)：指整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置，顯示為長(zhǎng)距離效應(yīng)。α螺旋的每個(gè)肽鍵的ＮＨ和第四個(gè)肽鍵的羧基氧形成氫鍵，氫鍵的方向與螺旋長(zhǎng)軸基本平形。　?。?、蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)：包括二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)。半胱氨酸的巰基是該化合物的主要功能基團(tuán)。二肽中游離的氨基和羧基繼續(xù)借脫水作用縮合連成多肽。在某一ＰＨ的溶液中，氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等，成為兼性離子，呈電　　２、氨基酸的紫外吸收性質(zhì)　　芳香族氨基酸在280nm波長(zhǎng)附近有最大的紫外吸收峰，由于大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這些氨基酸殘基，氨基酸殘基數(shù)與蛋白質(zhì)含量成正比，故通過(guò)對(duì)280nm波長(zhǎng)的紫外吸光度的測(cè)量可對(duì)蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行定量分析?！　。?、茚三酮反應(yīng)　　　氨基酸的氨基與茚三酮水合物反應(yīng)可生成藍(lán)紫色化合物，此化合物最大吸收峰在570nm波長(zhǎng)處。10個(gè)以?xún)?nèi)氨基酸連接而成多肽稱(chēng)為寡肽；39個(gè)氨基酸殘基組成的促腎上腺皮質(zhì)激素稱(chēng)為多肽；51個(gè)氨基酸殘基組成的胰島素歸為蛋白質(zhì)。GSH的巰基具有還原性，可作為體內(nèi)重要的還原劑保護(hù)體內(nèi)蛋白質(zhì)或酶分子中巰基免被氧化，使蛋白質(zhì)或酶處于活性狀態(tài)?！　　　。保┑鞍踪|(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)：指蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu)，也就是該段肽鏈骨架原子的相對(duì)空間位置，并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象?！　ˇ抡郫B：多肽鏈充分伸展，各肽鍵平面折疊成鋸齒狀結(jié)構(gòu)，側(cè)鏈Ｒ基團(tuán)交錯(cuò)位于鋸齒狀結(jié)構(gòu)上下方；它們之間靠鏈間肽鍵羧基上的氧和亞氨基上的氫形成氫鍵維系構(gòu)象穩(wěn)定．　　β轉(zhuǎn)角：常發(fā)生于肽鏈進(jìn)行180度回折時(shí)的轉(zhuǎn)角上，常有４個(gè)氨基酸殘基組成，第二個(gè)殘基常為脯氨酸?！　≈饕瘜W(xué)鍵：疏水鍵（最主要）、鹽鍵、二硫鍵、氫鍵、范德華力。由一條肽鏈形成的蛋白質(zhì)沒(méi)有四級(jí)結(jié)構(gòu)。　　肌紅蛋白：只有三級(jí)結(jié)構(gòu)的單鏈蛋白質(zhì)，易與氧氣結(jié)合，氧解離曲線(xiàn)呈直角雙曲線(xiàn)。因?yàn)椋旱谝粋€(gè)亞基與氧氣結(jié)合以后，促進(jìn)第二及第三個(gè)亞基與氧氣的結(jié)合，當(dāng)前三個(gè)亞基與氧氣結(jié)合后，又大大促進(jìn)第四個(gè)亞基與氧氣結(jié)合，稱(chēng)正協(xié)同效應(yīng)。包括：　　，破壞水化層。主要為二硫鍵和非共價(jià)鍵的破壞，不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變?！　。?、蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)　　：經(jīng)水解后產(chǎn)生的氨基酸可發(fā)生此反應(yīng)，詳見(jiàn)二、３　b. 雙縮脲反應(yīng)：蛋白質(zhì)和多肽分子中肽鍵在稀堿溶液中與硫酸酮共熱，呈現(xiàn)紫色或紅色。根據(jù)支撐物不同，有薄膜電泳、凝膠電泳等?！　?，又稱(chēng)凝膠過(guò)濾。　　八、多肽鏈中氨基酸序列分析　　　?。ǖ鞍踪|(zhì)水解為個(gè)別氨基酸，測(cè)各氨基酸的量及在蛋白質(zhì)中的百分組成）　　　　　　　　　　↓　　　測(cè)定肽鏈頭、尾的氨基酸殘基　　　　　 二硝基氟苯法（DNP法）　　　頭端 　　　　　　　　　　　　　　　尾端　羧肽酶Ａ、Ｂ、Ｃ法等　　　　　 丹酰氯法 　　 ↓ 　　　水解肽鏈，分別分析　　　　胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）法：水解芳香族氨基酸的羧基側(cè)肽鍵　　　　胰蛋白酶法：水解賴(lài)氨酸、精氨酸的羧基側(cè)肽鍵　　　　溴化脯法：水解蛋氨酸羧基側(cè)的肽鍵　　　　　　　　↓　　　Edman降解法測(cè)定各肽段的氨基酸順序　　　?。ò被┒税被岬挠坞xα氨基與異硫氰酸苯酯反應(yīng)形成衍生物，用層析法鑒定氨基酸種類(lèi)） 　　?！　。?、堿基：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　NH2　　　　　NH2　　　　O　　CH3　O　　　　　　　　O　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　O　　　　　　O　　　　　O　　　　　　　NH2　　　　　胞嘧啶　　胸腺嘧啶　　尿嘧啶　　　　　　鳥(niǎo)嘌呤　　　　　　腺嘌呤　嘌呤和嘧啶環(huán)中均含有共軛雙鍵，因此對(duì)波長(zhǎng)260nm左右的紫外光有較強(qiáng)吸收，這一重要的理化性質(zhì)被用于對(duì)核酸、核苷酸、核苷及堿基進(jìn)行定性定量分析?！　∪?、DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能　　　１、DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)　　DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)是核酸的二級(jí)結(jié)構(gòu)?！　　M向靠互補(bǔ)堿基的氫鍵維系，縱向則靠堿基平面間的疏水性堆積力維持，尤以后者為重要?！　。?、功能　　　DNA的基本功能就是作為生物遺傳信息復(fù)制的模板和基因轉(zhuǎn)錄的模板，它是生命遺傳繁殖的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是個(gè)體生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。如：名　　稱(chēng)功　　能核蛋白體RNA　(rRNA)核蛋白體組成成分信使RNA　(mRNA)蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運(yùn)RNA　(tRNA)轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸不均一核RNA　(HnRNA)成熟mRNA的前體小核RNA　(SnRNA)參與HnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)小核仁RNA　(SnoRNA)rRNA的加工和修飾１、信使RNA（半衰期最短）　?。保﹉nRNA為mRNA的初級(jí)產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)剪接切除內(nèi)含子，拼接外顯子，成為成熟的mRNA并移位到細(xì)胞質(zhì)　?。玻┐蠖鄶?shù)的真核mRNA在轉(zhuǎn)錄后５′末端加上一個(gè)７甲基鳥(niǎo)嘌呤及三磷酸鳥(niǎo)苷帽子，帽子結(jié)構(gòu)在mRNA作為模板翻譯成蛋白質(zhì)的過(guò)程中具有促進(jìn)核蛋白體與mRNA的結(jié)合，加速翻譯起始速度的作用，同時(shí)可以增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性?！　。?、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（分子量最小）　?。保﹖RNA分子中含有10％～20％稀有堿基，包括雙氫尿嘧啶，假尿嘧啶和甲基化的嘌呤等?！　。常┤?jí)結(jié)構(gòu)為倒L型。　?。玻﹔RNA與核糖體蛋白共同構(gòu)成核糖體，它是蛋白質(zhì)合成機(jī)器－－核蛋白體的組成成分，參與蛋白質(zhì)的合成。監(jiān)測(cè)是否發(fā)生變性的一個(gè)最常用的指標(biāo)是DNA在紫外區(qū)260nm波長(zhǎng)處的吸光值變化。不同來(lái)源的核酸變性后，合并一起復(fù)性，只要這些核苷酸序列可以形成堿基互補(bǔ)配對(duì)，就會(huì)形成雜化雙鏈，這一過(guò)程為雜交。　第三章　　酶　　一、酶的組成　　單純酶：僅由氨基酸殘基構(gòu)成的酶。酶蛋白與輔助因子結(jié)合形成的復(fù)合物稱(chēng)為全酶，只有全酶才有催化作用?！? 三、酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)　　酶促反應(yīng)的速度取決于底物濃度、酶濃度、PH、溫度、激動(dòng)劑和抑制劑等。　　，只與酶的結(jié)構(gòu)、酶所催化的底物和反應(yīng)環(huán)境如溫度、PH、離子強(qiáng)度有關(guān)，與酶的濃度無(wú)關(guān)。升高溫度一方面可加快酶促反應(yīng)速度，同時(shí)也增加酶的變性?！　。?、PH　　酶活性受其反應(yīng)環(huán)境的PH影響，且不同的酶對(duì)PH有不同要求，酶活性最大的某一PH值為酶的最適PH值，但多數(shù)酶的最適PH接近中性?！　。丁⒁种苿　》材苁姑傅拇呋钚韵陆刀灰鹈傅鞍鬃冃缘奈镔|(zhì)統(tǒng)稱(chēng)為酶的抑制劑。又可分為：　?。喝甾r(nóng)藥敵百蟲(chóng)、敵敵畏等有機(jī)磷化合物能特民地與膽堿酯酶活性中心絲氨酸殘基的羥基結(jié)合，使酶失活，解磷定可解除有機(jī)磷化合物對(duì)羥基酶的抑制作用。采用透析或超濾的方法可將抑制劑除去，使酶恢復(fù)活性?！　max降低，Km值不變　　：僅與酶和底物形成的中間產(chǎn)物結(jié)合，使中間產(chǎn)物的量下降?！　。?、變構(gòu)酶　　體內(nèi)一些代謝物可以與某些酶分子活性中心外的某一部位可逆地結(jié)合，使酶發(fā)生變構(gòu)并改變其催化活性，有變構(gòu)激活與變構(gòu)抑制?！　∥濉⑼っ浮　⊥っ甘侵复呋嗤幕瘜W(xué)反應(yīng)，而酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶?！　∪缛樗崦摎涿甘撬木垠w酶。單個(gè)亞基無(wú)酶的催化活性。　　　　　　　　　　　　　　　第四章　　維生素　　一、脂溶性維生素　　１、維生素A　　作用：與眼視覺(jué)有關(guān)，合成視紫紅質(zhì)的原料；維持上皮組織結(jié)構(gòu)完整；促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育?！　。?、維生素E　　作用：體內(nèi)最重要的抗氧化劑，保護(hù)生物膜的結(jié)構(gòu)與功能；促進(jìn)血紅素代謝；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與性器官的成熟與胚胎發(fā)育有關(guān)?！　。病⒕S生素B2　　又名核黃素，體內(nèi)的活性型為黃素單核苷酸（FMN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）　　FMN和FAD是體內(nèi)氧化還原酶的輔基，缺乏時(shí)可引起口角炎、唇炎、陰囊炎、眼瞼炎等癥?！　×姿徇炼呷┦前被岽x中的轉(zhuǎn)氨酶及脫羧酶的輔酶，也是δ氨基γ酮戊酸（ALA）合成酶的輔酶?！　。贰⑷~酸　　以四氫葉酸的形式參與一碳基團(tuán)的轉(zhuǎn)移，一碳單位在體內(nèi)參加多種物質(zhì)的合成，如嘌呤、胸腺嘧啶核苷酸等。一方面不利于蛋氨酸的生成，同時(shí)也影響四氫葉酸的再生，最終影響嘌呤、嘧啶的合成，而導(dǎo)致核酸合成障礙，產(chǎn)生巨幼紅細(xì)胞性貧血?！　。玻┍峒っ缸儤?gòu)抑制劑：ATP 、肝內(nèi)的丙氨酸變構(gòu)激活劑：1，6雙磷酸果糖　　３）葡萄糖激酶　　變構(gòu)抑制劑：長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A　　注：此項(xiàng)無(wú)需死記硬背，理解基礎(chǔ)上記憶是很容易的，如知道糖酵解是產(chǎn)生能量的，那么有ATP等能量形式存在，則可抑制該反應(yīng)，以利節(jié)能，上述的檸檬酸經(jīng)三羧酸循環(huán)也是可特殊，如上述的1，6雙磷酸果糖。 (1)糖原　　　　　　　1磷酸葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　　(2)葡萄糖　己糖激酶 6磷酸葡萄糖　　6磷酸果糖6磷酸果糖1激酶　　　　　　ATP　ADP　　　　　　　　　　　　　　　ATP　　　ADP　　　　　　　　　　　　磷酸二羥丙酮　　　　　　　　　　1,6二磷酸果糖　　　　　　　　　　　 　　3磷酸甘油醛 1,3二磷酸甘油酸　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　NAD+　　NADH＋H+ 3丙酮酸　丙酮酸激酶ADP　　ATP　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ADP　　ATP丙酮酸 乳酸　　　NADH＋H+　　NAD+注：紅色表示該酶為該反應(yīng)的限速酶；藍(lán)色ATP表示消耗，紅色ATP和NADH等表示生成的能量或可以轉(zhuǎn)變?yōu)槟芰康奈镔|(zhì)?！　。玻┏墒旒t細(xì)胞完全依賴(lài)糖酵解供能，神經(jīng)、白細(xì)胞、骨髓等代謝極為活躍，即使不缺氧也常由糖酵解提供部分能量。肌肉除糖異生活性低外，又沒(méi)有葡萄糖6磷酸酶。　?。?、調(diào)節(jié)　?。保┍崦摎涿笍?fù)合體　　抑制：乙酰輔酶A、NADH、ATP　　激活：AMP、鈣離子　?。玻┊悪幟仕崦摎涿负挺镣於崦摎涿浮　ADH、ATP反饋抑制　?。?、生理意義　?。保┗旧砉δ苁茄趸┠堋！　∪⒘姿嵛焯峭緩剑?、 過(guò)程　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖　　　　　　　　　　　　NADP+　　　　　　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖脫氫酶 NADPH　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯　　　　　　　　　　　　　6磷酸葡萄糖酸　　　　　　　　　　　　NADP+　　　　　　　　　　　　NADPH　　　　　　　　　　　　　5磷酸核酮糖　　　　　　　　　　　　　5磷酸核糖　　　　5磷酸木酮糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　7磷酸景天糖　　　3磷酸甘油醛　　　5磷酸木酮糖　　　　4磷酸赤蘚糖　　　6磷酸果糖　　　3磷