生物制品的制備ppt課件-wenkub
2023-05-27 12:35:49 本頁面
【正文】 在，其分子凈電荷為零 (即正負(fù)電荷相等 )，此時(shí)蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀，所以蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)，其溶解度最小，最易形成沉淀物。 三、蛋白質(zhì)類制品的分離純化方法 （Isolation and depuration of protein production） 包括蛋白質(zhì)、多肽和酶類等藥物。 提取時(shí) ， 首先要根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì) ， ① 選擇提取試劑 。 ② 壓力法 ， 有加壓 、 減壓 、 滲透壓三種 ③ 反復(fù)凍融法 ， 設(shè)備簡(jiǎn)便 ， 活性保持好 ， 但用時(shí)較長 。 常用乙醇 、 苯酚等 。 ② 有機(jī)溶劑脫水法 。 ② 植物原料 ： 要擇時(shí)采集并就地去除不用的部分 ， 保鮮處理； ③ 微生物原料 ： 要及時(shí)將菌細(xì)胞與培養(yǎng)液分開 ， 進(jìn)行保鮮處理 。 第二章 生物制品的制備 （ Preparation） 第一節(jié) 一般生物制品的制備方法 (Preparation of general biopreparate ) 一、生物制品原料的選擇、預(yù)處理與保存方法 （ Selection、 pretreatment and preservation of raw material of biopreparate） （ 1）原料選擇 原料的選擇原則 ： ①有效成分含量高，新鮮； ②原料來源豐富，產(chǎn)地較近； ③原料中雜質(zhì)含量少； ④原料成本低等。 原料的保存方法主要有 ： ① 冷凍法 。 常用的有機(jī)溶劑是丙酮 。 該法適用于液體原料 ， 如發(fā)酵液 、 提取液等 。 ④ 超聲波振蕩破碎法 ， 該方法破碎效果較好 ， 但由于局部發(fā)熱 ， 對(duì)活性有損失 。 提取試劑主要有：水 、 緩沖溶液 、 鹽溶液 、 乙醇 、 其他有機(jī)溶劑 （ 如氯仿 、 丙酮等 ） 。分離純化方法有： (1)沉淀法 （ precipitation）： 蛋白質(zhì)、酶的初步純化往往用沉淀法。 (2) 按分子大小分離的方法 ： 有 超濾法 （ultrafiltration）和 透折法 （ dialysis）（即膜分離方法） 、凝膠層析法 （ gel chromatography）、 超速離心法 （ ultra centrifugation轉(zhuǎn)速大于 20 000r/min） 等。這種現(xiàn)象稱為分子篩效應(yīng)。 由于具有該性質(zhì) ， 利用帶電性質(zhì)進(jìn)行分離是極其有效的方法 。 親和色譜（ affinity chromatography） ? 1）基本概念（ basic concept） ?親和層析 是利用待分離物質(zhì)與其特異性配基之間 特異性的親和力 進(jìn)行分離的一類特殊的層析技術(shù)。 ?因此應(yīng)用范圍受到一定的限制。（見 Fig Fig2） 。 ?激素與其受體。 ?顆粒均勻，具有良好的流速。 ?，因?yàn)樵诮怆x配 基復(fù)合物時(shí)所 需的條件就要強(qiáng)烈，這樣可能使生物分子變性。形成雜質(zhì)峰（見下圖）。 發(fā)酵法 主要用于生產(chǎn)單核苷酸 。 降解法 （ degradation） 適用于從組織中提取結(jié)合比較牢固的粘多糖 （ mucoitin） 。 ? 乙醇沉淀法 （ alcohol precipitation） ：是從提取液中沉淀多糖的最簡(jiǎn)易方法 ， 也適用于分級(jí)分離 。 ? 離子交換層析法 （ ion exchange chromatagraphy)：粘多糖的聚陰離子能夠很好地被陰離子交換劑吸附和分離，如Dowex IX2（商品名）離子交換樹脂、DEAE離子交換纖維素（二乙胺乙基）等。 提取脂質(zhì)就是要選擇適當(dāng)?shù)娜軇﹣砥茐倪@種結(jié)合鍵 ， 將脂質(zhì)溶解出來 。它是通過極性和離子力等把各種化合物結(jié)合到固體吸附劑上。 如TEAE— 纖維素對(duì)分離脂肪酸和膽汁酸等特別有效 。 ③ 酶水解法 水解不夠完全。 ?沉淀法 (percipitation)：根據(jù)形成沉淀的原理不同分為兩種： ① 是依據(jù)不同氨基酸在水中或其他溶劑中的溶解度差異進(jìn)行沉淀分離 。 ? 離子交換法 （ ionexchange )：氨基酸是兩性電解質(zhì) ， 在一定 pH條件下 ， 不同氨基酸帶電性質(zhì)及解離狀態(tài)是不相同的 ， 因此在離子交換劑上被吸附的強(qiáng)度不同 。 ?血漿中除含有大量的水分以外，還含有血漿蛋白等溶質(zhì)。對(duì)酸較穩(wěn)定，受熱變性。 可進(jìn)一步開發(fā)新產(chǎn)品 exploitation of new productio） （ 1）血液的利用，血漿蛋白可分離為 IV5個(gè)成分。 第三節(jié) 動(dòng)物來源生物制品的制備 （ 2）工藝路線 豬胰臟 提取 乙醇，草酸， 1015℃ 提取液 堿化 氨水， 堿化液 酸化 硫酸， ,5 ℃ 酸化液 濃縮 30 ℃ 以下，減壓 濃縮液 去脂 速熱速冷 去脂溶液 鹽析 NaCl, 鹽析物 水、丙酮、氨水（ ~） 除酸性蛋白 濾液 鋅沉淀 氨水， Zn（ Ac） 2， 沉淀 除堿性蛋白，結(jié)晶 Zn（ Ac） 2，丙酮、氨水， ，5℃ 以下，檸檬酸調(diào) 結(jié)晶 洗滌，干燥 水、丙酮、乙醚 胰島素精品 超氧化物歧化酶（ SOD）的制備 ?超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase, SOD）與機(jī)體抗衰老、腫瘤發(fā)生、自身免疫疾病和輻射
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