【正文】 運(yùn)輸。 33．4．2體內(nèi)法 按附錄X B測(cè)定供試品體內(nèi)活性(IU／m1)，根據(jù)標(biāo)示裝量計(jì)算供試品生物學(xué)括性(IU／瓶)，應(yīng)為標(biāo)示量的80％～140％。 3 3．3．3鈉離子含量 應(yīng)不大于190mmol／L(附錄ⅦJ)。 依法檢查(附錄V B)，應(yīng)符合規(guī)定。 除復(fù)溶時(shí)間和水分測(cè)定外，應(yīng)按標(biāo)示量加入滅菌注射用水，復(fù)溶后進(jìn)行其余各項(xiàng)檢定?！姹?小時(shí)，色譜柱為反相C8柱(25cm，粒度5um，孔徑30nm)，柱溫為45℃℃；；進(jìn)樣量為20ul；按下表進(jìn)行梯度洗脫(表中A為O．1％三氟乙酸水溶液，B為0．1％三氟乙酸80%乙腈水溶液)。 CHO細(xì)胞蛋白殘留量 用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，％。2nm；在320～360nm處無(wú)吸收峰。 依法測(cè)定(附錄Ⅳc)。用非還原SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，考馬斯亮藍(lán)染色，％，加樣量應(yīng)不低于10ug，經(jīng)掃描儀掃描，％。 依法測(cè)定(附錄X B)。凍干的全過(guò)程中，制品溫度應(yīng)不高于30℃。 。除菌過(guò)濾后保存于適宜溫度，并規(guī)定其有效期。 生產(chǎn)用細(xì)胞培養(yǎng)液應(yīng)不含牛血清和任何抗生素。 應(yīng)用同工酶分析、生物化學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞學(xué)和遺傳標(biāo)記物等任一方法進(jìn)行鑒別，應(yīng)為典型CHO細(xì)胞。每次傳代不超過(guò)批準(zhǔn)的代次。含適宜穩(wěn)定劑，不含防腐劑和抗生素。 4保存、運(yùn)輸及有效期 于2～8℃避光保存和運(yùn)輸。 每1次人用劑量應(yīng)小于IOEU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。 ％(附錄ⅦD)。 按免疫印跡法(附錄ⅧA)或免疫斑點(diǎn)法(附錄Ⅷ B)測(cè)定，應(yīng)為陽(yáng)性。 每100萬(wàn)IU應(yīng)小于10EU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。 最大吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)為277nm177。如制品中含有SDS，％進(jìn)行測(cè)定。用還原型SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，分離膠膠濃度為15％，177。 依法測(cè)定（附錄ⅢB)。 為生物學(xué)活性與蛋白質(zhì)含量之比，107IU。 應(yīng)為經(jīng)批準(zhǔn)的規(guī)格。除菌過(guò)濾后即為半成品，保存于2～8℃。 。 用適宜的方法收集處理菌體。 采用適宜的不含任何抗生素的培養(yǎng)基。 應(yīng)符合大腸桿菌生物學(xué)性狀。 應(yīng)呈典型大腸桿菌集落形態(tài)，無(wú)其他雜菌生長(zhǎng)。 1 基本要求 生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、原料及輔料、水、器具、動(dòng)物等主符合“凡例”的要求。自分裝之日起，按批準(zhǔn)的有效期執(zhí)行。 依法檢查(附錄ⅫA)，應(yīng)符合規(guī)定。 按附錄I A中裝量項(xiàng)進(jìn)行。 依法檢查(附錄ⅫA)，應(yīng)符合規(guī)定。3nm(附錄ⅡA)。 依法測(cè)定(附錄ⅨA)，不應(yīng)有殘余氨芐西林或其他抗生素活性。 每1次人用劑量應(yīng)不高于10ng(附錄ⅨB)。色譜柱以適合分離分子質(zhì)量為5～60kD蛋白質(zhì)的色譜用凝膠為填充劑；／L磷酸鹽O．1mol／L氯化鈉緩沖液，pH7．0；上樣量不低于20ug，于波長(zhǎng)280nm處檢測(cè)，以干擾素色譜峰計(jì)算理論板數(shù)應(yīng)不低于1000。 依法測(cè)定(附錄Ⅳc)。 應(yīng)符合“生物制品包裝規(guī)程”規(guī)定。 。 。 用適宜的方法收集處理菌體。 采用適宜的不含任何抗生素的培養(yǎng)基。 在搖床中培養(yǎng)，應(yīng)不低于原始菌種的表達(dá)量。 應(yīng)為典型的革蘭陰性桿菌。 2制造 重組人干擾素α2b工程菌株系由帶有人干擾素α2b基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的大腸桿菌菌株。重組人干擾素α2b注射液 Chongzu Ren Ganraosuα2b Zhusheye Rebinant Human Interferon α2b Injection 本品系由含有高效表達(dá)人干擾素α2b基因的大腸桿菌，經(jīng)發(fā)酵、分離和高度純化后制成。 應(yīng)符合“生物制品生產(chǎn)檢定用菌毒種管理規(guī)程”的規(guī)定。 應(yīng)與原始菌種相符。 應(yīng)用抗α2b型干擾素參考血清做中和試驗(yàn)，證明型別無(wú)誤。 。 采用經(jīng)批準(zhǔn)的純化工藝進(jìn)行初步純化，使其純度達(dá)到規(guī)定的要求。 按經(jīng)批準(zhǔn)的配方配制稀釋液。 2 4成品 應(yīng)符合“生物制品分批規(guī)程”規(guī)定。 3檢定 依法測(cè)定(附錄X c)。用非還原型SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，分離膠膠濃度為15％，加樣量應(yīng)不低于10ug(考馬斯亮藍(lán)R250染色法)或5ug(銀染法)。按面積歸一化法計(jì)算，％。 如采用單克隆抗體親和色譜法純化，應(yīng)進(jìn)行本項(xiàng)檢定。 每300萬(wàn)IU應(yīng)小于10EU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。 (至少每半年測(cè)定1次) 依法測(cè)定(附錄ⅧE)，應(yīng)與對(duì)照品圖形一致。 按免疫印跡法(附錄ⅧA)或免疫斑點(diǎn)法(附錄1 B)測(cè)定，應(yīng)為陽(yáng)性。應(yīng)不低于標(biāo)示量。 每1次人用劑量應(yīng)小于IOEU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。 5使用說(shuō)明 應(yīng)符合“生物制品包裝規(guī)程”規(guī)定。 2 制造 重組人白介素2工程菌株系由帶有人白介索2基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的大腸桿菌菌株。 應(yīng)為典型的革蘭陰性桿菌。 在搖床中培養(yǎng)，應(yīng)不低于原始菌種的表達(dá)量。 。 采用經(jīng)批準(zhǔn)的純化工藝進(jìn)行初步純化，使其純度達(dá)到規(guī)定的要求。 按經(jīng)批準(zhǔn)的配方配制稀釋液。 。 應(yīng)符合“生物制品包裝規(guī)程”規(guī)定。 依法測(cè)定(附錄Ⅳc)。色譜柱以適合分離分子質(zhì)量為5～60kD蛋白質(zhì)的色譜用凝膠為填充劑；流動(dòng)相為 ／／L氯化鈉緩沖液，；上樣量不低于20ug，于波長(zhǎng)280nm處檢測(cè)，以人白介素2色譜峰計(jì)算理論板數(shù)應(yīng)不低于1500。 每1次人用劑量應(yīng)不高于10ng(附錄ⅨB)。 每100萬(wàn)IU應(yīng)小于10EU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。3nm(附錄ⅡA)。如制品中含有SDS，應(yīng)將SDS濃度至少稀釋至 ％進(jìn)行測(cè)定。 應(yīng)為白色或微黃色疏松體，加入標(biāo)示量注射用水后應(yīng)迅速?gòu)?fù)溶為澄明液體。 pH值 ～(附錄V A)。 依法檢查(附錄ⅫF小鼠試驗(yàn)法)，應(yīng)符合規(guī)定。自分裝之日起，按批H的有效期執(zhí)行。 l基本要求 生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、原料及輔料、水、器具、動(dòng)物等應(yīng)符合“凡例”的有關(guān)要求。細(xì)胞系凍存于液氮中，檢定合格后方可用于生產(chǎn)。 應(yīng)不低于原始細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞表達(dá)量。 細(xì)胞培養(yǎng)全過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作。 。 應(yīng)符合“生物制品分批規(guī)程”規(guī)定。 應(yīng)為經(jīng)批準(zhǔn)的規(guī)格。 按酶聯(lián)免疫法試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定。 依法測(cè)定(附錄ⅢB)。用還原型SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法，考馬斯亮藍(lán)R250染色，％，加樣量應(yīng)不低于lug，分子質(zhì)量應(yīng)為36～45kD。 依法測(cè)定(附錄ⅣD)，～5. O的兩性電解質(zhì)，～。 每lO 000IU人促紅素應(yīng)小于2EU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。編號(hào)時(shí)間／分鐘流速／mlA％B％1234567100. O85. 0 肽圖應(yīng)與人促紅素對(duì)照品一致。 按免疫印跡法(附錄ⅧA)或免疫斑點(diǎn)法(附錄ⅧB(niǎo))測(cè)定，應(yīng)為陽(yáng)性。 按附錄IA中裝量差異項(xiàng)進(jìn)行，應(yīng)符合規(guī)定。 應(yīng)不大于190mmol／L(附錄ⅦH第二法)。 依法檢查(附錄ⅫA)，應(yīng)符合規(guī)定。自分裝之日起，按批準(zhǔn)的有效期執(zhí)行。 1基本要求 生產(chǎn)和檢定用設(shè)施、原料及輔料、水、器具、動(dòng)物等應(yīng)符合“凡例”的有關(guān)要求。 應(yīng)呈典型大腸桿菌集落形態(tài)，無(wú)其他雜菌生長(zhǎng)。 應(yīng)符合大腸桿菌生物學(xué)性狀。 采用適宜的不含任何抗生素的培養(yǎng)基。 用適宜的方法收集處理菌體。 。除菌過(guò)濾后即為半成品，保存2～8℃。 應(yīng)為經(jīng)批準(zhǔn)的規(guī)格。 為生物學(xué)活性與蛋白質(zhì)含量之比，每lmg蛋白質(zhì)，104IU。 依法測(cè)定(附錄ⅢB)。％。 ％(附錄Ⅸc)。 最大吸收峰波長(zhǎng)應(yīng)為277nm177。 每lmg蛋白質(zhì)應(yīng)小于3EU(附錄ⅫE凝膠限量試驗(yàn))。 應(yīng)為白色或微黃色疏松體，加入標(biāo)示量注射用水后應(yīng)迅速?gòu)?fù)溶為澄明液體。 pH值 ～(附錄V A)。 依法檢查(附錄ⅫF小鼠試驗(yàn)法)，應(yīng)符合規(guī)定。傷寒菌苗制造及檢定規(guī)程本品系用傷寒菌培育后取菌苔制成懸液，加甲醛殺菌，以磷酸鹽緩沖生理鹽水稀釋成每ml含菌3億制成?！　?培養(yǎng)特性　　制造菌苗的菌株應(yīng)具有典型的形態(tài)、培養(yǎng)和生化特性?！　　?毒力試驗(yàn)　　用37℃培育12～16小時(shí)的瓊脂培養(yǎng)物以生理鹽水稀釋成6億/ml、3億/ml、（根據(jù)菌種毒力情況稀釋度可作更改也可增加稀釋度）。不加防腐劑。末次注射后10～14天采血做定量凝集試驗(yàn)測(cè)定效價(jià)，2/3家兔血清之凝集效價(jià)不低于1∶12800為合格?！　?制造用培養(yǎng)基　　～?！　?純菌試驗(yàn)　　原液采集后應(yīng)逐瓶取樣接種瓊脂斜面1管，于37℃培育2天，24～26℃1天，如有雜菌生長(zhǎng)應(yīng)廢棄?！　?無(wú)菌試驗(yàn)　　純菌試驗(yàn)合格的原液，應(yīng)取樣接種不含瓊脂的硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基及普通瓊脂斜面各1管，放37℃培育5天，如有本菌生長(zhǎng)，可加培量復(fù)試一次；如有雜菌生長(zhǎng)應(yīng)廢棄?！　?凝集試驗(yàn)　　原液與相應(yīng)血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)，其凝集效價(jià)不應(yīng)低于血清原效價(jià)之半。唯所用小白鼠每組至少15只，保護(hù)60%免疫小白鼠活存為合格。　　 菌苗稀釋　　%～%（g /ml）苯酚或其他適宜的防腐劑之磷酸鹽緩沖生理鹽水。　　 分裝　　分裝后每亞批應(yīng)抽樣送質(zhì)量檢定部門(mén)進(jìn)行成品檢定。至少觀察10個(gè)視野，平均每個(gè)視野內(nèi)不得有10個(gè)以上非典型菌（線狀、粗大或染色可穎桿菌），并不應(yīng)有雜菌?！　? 保存與效期　　應(yīng)保存于2～8℃。用于預(yù)防傷寒?！　?．初次注射本菌苗者，需注射3次，每次間隔7～10天，注射劑量如下：　　1～6周歲：?！　〗伞　?．發(fā)熱，嚴(yán)重高血壓，心、肝、腎臟病及活動(dòng)性結(jié)核?！　∽⒁馐马?xiàng)　　1．用前搖勻。吸附百日咳菌苗、白喉、破傷風(fēng)類毒素混合制劑制造及檢定規(guī)程本品系由百日咳菌苗原液、精制白喉類毒素及精制破傷風(fēng)類毒素用氫氧化鋁吸附制成。　　 精制破傷風(fēng)類毒素應(yīng)符合《吸附精制破傷風(fēng)類毒素制造及檢定規(guī)程》中4項(xiàng)的要求。　　 吸附　　按計(jì)算量將精制白喉類毒素、精制破傷風(fēng)類素及百日咳菌苗原液加入稀釋好的吸附劑內(nèi)?！　? 成品檢定　　 物理化學(xué)檢查　　 振搖后應(yīng)呈均勻乳白色混懸液?！　?%～%(mg /ml)。　　 毒性試驗(yàn)　　應(yīng)符合附錄1《百日咳菌苗原液制造及檢定要求》。　　 白喉及破傷風(fēng)類毒素的效力試驗(yàn)　　每更換1批類毒素時(shí)進(jìn)行?！　?白喉類毒素的效力試驗(yàn)亦可采用攻毒法?！　? 保存與效期　　應(yīng)保存于2～8℃?！　? 菌種　　 制造百日咳菌苗之菌種、檢定用的Ⅰ相診斷血清、百日咳分型血清及百日咳參考菌苗，由中國(guó)藥品生物制品檢定所分發(fā)或經(jīng)同意。　　　　用健康家兔或豚鼠至少2只，用培育40～48小時(shí)的菌苔混懸于磷酸鹽緩沖生理鹽水內(nèi)，然后稀釋為幾個(gè)不同濃度的菌液，經(jīng)72小時(shí)觀察反應(yīng)。　　　　。合格的菌種可使用2年，以后每年檢查1次，如仍合格可繼續(xù)使用1年?！　?原液制造　　 菌種　　凍干菌種啟開(kāi)后接種于改良包姜氏或活性炭半綜合培養(yǎng)基或其他適宜的培養(yǎng)基上?！　?殺菌　　%（ml /ml）甲醛溶液殺菌，放37℃2～3天。　　 原液合并　　固體法工藝生產(chǎn)經(jīng)純菌試驗(yàn)合格的原液應(yīng)進(jìn)行合并。稀釋菌苗時(shí)即按此濃度計(jì)算。　　 無(wú)菌試驗(yàn)　　每瓶原液除按《生物制品無(wú)菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)外，并做特異無(wú)菌試驗(yàn)?！　≡囼?yàn)結(jié)果達(dá)不到上述要求，可復(fù)試一次。原液自采集之日起效期為3年。、百日咳參考菌苗稀釋至每ml含8IU，（）、（）（）?！　?培養(yǎng)溫度及時(shí)間　　放35～37℃培育，第一代不超過(guò)72小時(shí)，攻擊時(shí)菌種的培育時(shí)間為20～24小時(shí)?！　?工作起止時(shí)間　　自攻擊菌液制備（開(kāi)始刮菌）?！　? 記錄結(jié)果　　動(dòng)物攻擊后觀察14天。SD%，每個(gè)ED50標(biāo)準(zhǔn)差的范圍一般應(yīng)為64%～156%。附錄3 百日咳菌苗原液毒性試驗(yàn)方法　　1 選用體重14～16g健康小白鼠，每批原液不少于10只（同性或雌雄性各半）。另取同數(shù)量同體重的小白鼠（同性或雌雄性各半），177?！　? 試驗(yàn)結(jié)果若達(dá)不到上述要求，可進(jìn)行復(fù)試，仍達(dá)不到上述要求，原液可放置2～8℃保存3～4個(gè)月再進(jìn)行復(fù)試，如仍達(dá)不到上述要求，該批原液的毒性判為不合格?！　”酒窞槿榘咨珣乙?，含硫柳汞防腐劑，放置后菌體易下沉，但經(jīng)振搖后能均勻分散。18～24月齡注