【正文】
element are also given. The antiparallel strands (except for the interactions between strands 1 and 6) make a tightly formed barrel. The green fluorescent protein GFP consists of 238 amino acids, linked together in a long chain. This chain folds up into the shape of a beer can. Inside the beer can structure the amino acids 65, 66 and 67 form the chemical group that absorbs UV and blue light, and fluoresces green. 綠色熒光蛋白的罐形結(jié)構(gòu) 綠色熒光蛋白的結(jié)構(gòu)解析 The dimer contact region. The two polypeptide chains associate over a broad area, with a small hydrophobic patch (in the yellow box) and numerous hydrophilic contacts. The twofold symmetry axis is in the plane of the page, and is marked by the red arrow. The polar residues are marked with red atoms for oxygen and blue for nitrogen. 綠色熒光蛋白的結(jié)構(gòu)解析 綠色熒光蛋白的發(fā)光特性 GFP吸收的光譜 ,最大峰值為 395nm(紫外 ),并有一個(gè)峰值為 470nm的副峰 (藍(lán)光 )。 綠色熒光蛋白的研究史 ? 2022年 1月 7日,東北農(nóng)業(yè)大學(xué)劉忠華教授主持的轉(zhuǎn)基因克隆豬課題獲得成功。 1995年,他完成的單點(diǎn)突變( S65T)顯著提高了 GFP的光譜性質(zhì),起熒光強(qiáng)度和光穩(wěn)定性也大大增強(qiáng)。 ? 馬丁 這是物理化學(xué)中已知的熒光共振能量轉(zhuǎn)移( FRET)在生物中的發(fā)現(xiàn)。沙爾菲,美國(guó)哥倫比亞大學(xué)生物學(xué)教授,他獲獎(jiǎng)的主要貢獻(xiàn)在于向人們展示了綠色熒光蛋白作為發(fā)光的遺傳標(biāo)簽的作用,這一技術(shù)被廣泛運(yùn)用于生理學(xué)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。1962年從一種水母中發(fā)現(xiàn)了熒光蛋白,被譽(yù)為生物發(fā)光研究第一人。綠色熒光蛋白 —— 將色彩引入生命科學(xué)研究 GFP——Bring the Colors to the Study for Life Science 南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院張朝 綠色熒光蛋白的分子生物學(xué) 及其應(yīng)用 The Nobel Prize in Chemistry 2022 ? for the discovery and development of the green fluorescent protein, GFP Osamu Shimomura Martin Chalfie Roger Y. Tsien Marine Biological Laboratory, Woods Hole, MA, USA。 錢(qián)永健,美籍華裔,現(xiàn)為美國(guó)加州大學(xué)圣迭戈分校生物化學(xué)及化學(xué)系教授、美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院士、國(guó)家醫(yī)學(xué)院院士,2022年沃爾夫醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)得主。 ? 1962年 Shimomure等首先從維多利亞水母 (Aequorea Victoria)中分離出了 GFP (GreenFluorescent Protein) 。 鈣離子 藍(lán)光 發(fā)光過(guò)程 下村修 ? 下村修因此成為首位從水母中分離出 GFP,并發(fā)現(xiàn)這種蛋白質(zhì)在紫外光下呈亮綠色的科學(xué)家,他被譽(yù)為生物發(fā)光研究的第一人 ?1992年 Prasher等克隆了 GFP基因的 cDNA,并分析了GFP的一級(jí)結(jié)構(gòu)。 沙爾菲等對(duì)實(shí)現(xiàn)GFP的基因表達(dá)做出了突出的貢獻(xiàn) ? 他獲獎(jiǎng)的主要貢獻(xiàn)在于向人們展示了綠色熒光蛋白作為發(fā)光的遺傳標(biāo)簽的作用。 ? 錢(qián)永健的主要貢獻(xiàn)在于利用GFP來(lái)追蹤追蹤多種生物細(xì)胞進(jìn)行的生物反應(yīng),他是這方面公認(rèn)的先驅(qū)。中國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬成功產(chǎn)下 2頭具有綠色熒光遺傳特征的小豬。發(fā)射光譜最大峰值為 509nm(綠光 ),并帶有峰值為 540nm的側(cè)峰 (Shouder)。 ? GFP需要在氧化狀態(tài)下產(chǎn)生熒光,強(qiáng)還原劑能使 GFP轉(zhuǎn)變?yōu)榉菬晒庑问?,但一旦重新暴露在空氣或氧氣中?GFP熒光便立即得到恢復(fù)。 ? GFP熒光在 ,在 ,高溫 (70℃ )、極端 pH或胍基氯化物條件下, GFP會(huì)變性,熒光消失,一旦外界條件恢復(fù)正常,熒光將部分恢復(fù)。一但發(fā)色團(tuán)吸收一個(gè)光子,激活的水分子通常就會(huì)奪取它的能量。 GFP熒光生色團(tuán) 翻譯出的蛋白質(zhì)折疊環(huán)化之后 ,