木瓜蛋白酶提取實驗方案-wenkub
2023-05-10 01:43:12 本頁面
【正文】 存透析袋處理取酶液并編號酶液6，20℃保存酶原液4編號酶液5，20℃保存透析袋處理取酶液并編號酶液7，20℃保存：800014000標(biāo)號的透析袋處理：①取透析袋剪成適當(dāng)長度的小段。③收集10ml乳汁加入190ml蒸餾水水，勻速輕柔攪拌1h，得漿液。用前配置。 。酶保護劑：，溶解半胱氨酸，定容至250ml，轉(zhuǎn)入棕色瓶中?？捡R斯亮藍(lán)G250染液（%）：，溶于50mL 95%乙醇中（95%）再加入86% 磷酸100mL，倒入1000mL容量瓶加蒸餾水定容至1000mL。飽和硫酸銨溶解曲線：二、實驗材料與儀器：材料：未成熟的番木瓜，無水乙醇。酪蛋白經(jīng)蛋白酶作用后，降解成相對分子質(zhì)量較小的肽和氨基酸，在反應(yīng)混合物中加入三氯乙酸溶液，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)和肽就沉淀下來，相對分子質(zhì)量較小的肽和氨基酸仍留在溶液中，溶解于三氯乙酸溶液中的肽的數(shù)量正比于酶的數(shù)量和反應(yīng)時間。鹽析時溶液PH在木瓜蛋白酶等電點時（PI=）則效果最好，鹽濃度通常用飽和度來表示。硫酸銨分級沉淀法：硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質(zhì)。有機溶劑沉淀法：有機溶劑能降低溶液的電解常數(shù)，從而增加蛋白質(zhì)分子上不同電荷的引力，導(dǎo)溶解度的降低，另外，有機溶劑與水的作用，能破壞蛋白質(zhì)的水化膜，故蛋白質(zhì)在一定濃度的有機溶劑中的溶解度差異而分離的方法?，F(xiàn)已知經(jīng)木瓜乳汁干燥而得的木瓜蛋白酶至少含有四種主要酶類：木瓜蛋白酶（papain）、木瓜凝乳蛋白酶（chymopapain）、木瓜蛋白酶Ω（papaya proteinaseΩ）、木瓜凝乳蛋白酶M（chymopapain M），其中木瓜凝乳蛋白酶的含量最多，占可溶性蛋白的45%。實驗設(shè)計題目：木瓜蛋白酶的提取,純化分離及其生物學(xué)研究一、 實驗原理：木瓜蛋白酶（papain）又稱木瓜酶，廣泛存在于番木瓜的根、莖、葉和果實，未成熟果實的乳
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