食品中蛋白質(zhì)的測定方法-wenkub
2023-04-23 07:11:35 本頁面
【正文】 一 凱氏定氮法 我們在檢驗食品中蛋白質(zhì)時，往往只限于測定總氮量，然后乘以蛋白質(zhì)核算系數(shù)，得到蛋白質(zhì)含量，實際上包括核酸、生物堿、含氮類脂、葉啉和含氮色素等非蛋白質(zhì)氮化合物，故稱為粗蛋白質(zhì)。 測定原理： 食品經(jīng)加硫酸消化使蛋白質(zhì)分解，其中氮素以氨的形式與硫酸化合成硫酸銨。 三角瓶250ml 3只。 1小漏斗1只。 蒸餾、吸收：按圖裝好定氮裝置。同時作一試劑空白測定除不加樣品外，叢消化開始操作完全相同。 （3）消化時如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷后，慢慢加入30%過氧化氫23ml，促使氧化。 （7）混合指示劑在堿性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。 （11）向蒸餾瓶中加入濃堿時，往往出現(xiàn)褐色沉淀物，這是由于分解促進堿與加入的硫酸銅反應(yīng)，生成氫氧化銅，經(jīng)加熱后又分解生成氧化銅的沉淀。 （3）熱源的強度 消化時熱源的強度同迅速消化和完全氨化關(guān)系很大，即便鹽類K2SO4加得多，如果熱源弱，也是沒有意義的，熱源過強導(dǎo)致H2SO4損失，使氨回收率低，另外K氏瓶的容量大小，頸部的粗細(xì)和長短等，也與熱源的強度有關(guān)。 ，不要黏附瓶頸上，萬一黏附可用少量水緩慢沖下，以免被檢樣消化不完全，使結(jié)果偏低。 ，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色，如果沒有溴甲酚綠，%甲基紅乙醇溶液。 。 二 水揚酸比色法1 原理： 樣品中的pro經(jīng)H2SO4消化轉(zhuǎn)化為銨鹽溶液后，在一定的酸度和溫度下與水揚酸鈉和次氯酸鈉作用生成有顏色的化合物，可以在波長660nm處比色測定，求出樣品含氮量，計算蛋白質(zhì)含量。 （4）計算 W10001000 C從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出測定樣液的含氮量（Ug） F樣品溶液的稀釋倍數(shù) W樣品重量（g） 蛋白質(zhì)%=總氮%K（，也可查） 3注意事項： A 當(dāng)天消化液最好當(dāng)天測定，結(jié)果重現(xiàn)性好，如果樣液改至第二天比色就有變化。 （2）空白酸液：→加15mlH2SO4和5g催化劑→與樣品一樣消化→定容250ml→ 使用時吸收此液10ml→加水至100ml為工作液備用。 （2）8mol/l脲[（NH2）2CO]的2NNaOH溶液。 計算： 蛋白質(zhì)= C/W 100 C從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的pro含量（mg） W測定樣品溶液相當(dāng)于樣品量（mg） 說明： ，牛乳和可溶性pro樣品，測定糕點時，應(yīng)把表皮顏色去掉。本法直接用于測定像小麥粉等固體試樣的pro含量。 ⑵酒石酸鈉作穩(wěn)定劑，吸10ml10N KOH溶液和20ml25%酒石酸鉀鈉溶液加到930ml水中，激烈攪拌，同時加入4%CuSO4液40ml。 事先用K氏定氮法測定樣品中pro含量為橫坐標(biāo)，以上述吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。不要做金錢、權(quán)利的奴隸；應(yīng)學(xué)會做“金錢、權(quán)利”的主人。壓力不是有人比你努力，而是那些比你牛幾倍的人依然比你努力。最值得欣賞的風(fēng)景，是自己奮斗的足跡。贈語； 如果我們做與不做都會有人笑，如果做不好與做得好還會有人笑，那么我們索性就做得更好，來給人笑吧！ 現(xiàn)在你不玩命
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