【正文】 如 何 選 擇 液 相 色 譜 儀 一臺品質(zhì)優(yōu)良的液相色譜系統(tǒng)應(yīng)從以下幾個方面考慮： 一．主要技術(shù)指標(biāo)優(yōu)異： 首先是如何看指標(biāo)。就是需要把各單元裝置都要聯(lián)接好，如接好色譜柱，進樣閥，并且要通上流動相。噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測靈敏度，噪音越大，檢測的靈敏度就越低。某些廠家回避了這個指標(biāo)，說明他們不愿在最小檢測濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音。好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分優(yōu)秀的，這就要求多次進樣保留時間及含量的一致性，這樣做出來的結(jié)果才能使人信服。所以要系統(tǒng)地看指標(biāo)。 二．操作方便： 操作方便性無論是對新手還是成熟的用戶都是很重要的。 三．系統(tǒng)的，整體開發(fā) 這里指的是儀器的整體開發(fā)，是一個完整的系統(tǒng)。 整體開發(fā)的主要優(yōu)點有：各項技術(shù)指標(biāo)統(tǒng)一、儀器各單元的通信協(xié)調(diào)、能夠建立一個整體的數(shù)字化評價系統(tǒng)、體現(xiàn)了企業(yè)的科技及開發(fā)實力。 高效液相色譜系統(tǒng)中氣泡對檢測的影響及其解決方法 在我們進行液相色譜分析時，有時會遇到這樣一個問題：系統(tǒng)的流路中存在氣泡。常用的脫氣方法有以下幾種：1. 吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，以約60ml/min流速通入流動相1015min以驅(qū)除溶解的氣體。對多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心: 053188039532809 科曉化工儀器有限公司色譜技術(shù)培訓(xùn)資料 再進行混合，以保證混合后的比例不變。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法，并適用于多元溶劑體系。用戶覺得指標(biāo)都差不多，但卻忽略了另外二個較為重要的指標(biāo)：最小檢測濃度和光程，這二個指標(biāo)有什么作用呢？它們代表了什么含義？ 這里來解釋一下： 最小檢測濃度是考驗儀器的靈敏度。同樣如我公司儀器把最小檢測濃度調(diào)較得和其它產(chǎn)品是一樣，也就表明我們可以做得比其它產(chǎn)品噪音和漂移低4倍。為什么有些廠家把儀器的流通池光程做得很小，有些只有：、而不是我公司的8mm。知道了這些道理,你在挑選液相色譜儀時別忘了這二點哦. 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心: 053188039532809 科曉化工儀器有限公司色譜技術(shù)培訓(xùn)資料 怎 樣 選 擇 色 譜 柱現(xiàn)代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正己烷（Hexane）、氯仿（Chloroform）、二氯甲烷（Methylene Chloride）等。常用的反相填料有：C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。三．其它無機填料其它HPLC的無機填料色譜柱也已經(jīng)商品化。該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強。新型氧化鋯基質(zhì)色譜填料也可用于HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用pH范圍1～14，溫度可達(dá)100℃。13. ◇　過夜或貯存時, 沖洗掉鹽和緩沖液, 用純有機溶劑流動相保存(乙晴最好)。B. 與色譜柱有關(guān)的拖尾問題，反相柱可用20倍柱體積的96%的二氯甲烷與4%甲醇，加1%氫氧化銨混合液沖洗；正向柱可用甲醇沖洗；。，應(yīng)用15～20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水有機溶劑流動相沖洗色譜柱，后換成100%有機溶劑貯存。 怎樣選擇保護柱，但又不影響分離分析？這是色譜工作者經(jīng)常提出的一個問題。保護柱越長，自然所裝填的色譜填料越多，則其越能避免污染物進入分析色譜柱的機會。目前有薄膜裝填法的保護柱，使用過程很簡單方便，而且可以在實驗室中進行干裝。整體式設(shè)計是由色譜柱的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的，必須與色譜分析柱一同訂貨，可以非常方便地使用，但不能夠被修改?，F(xiàn)在大多數(shù)的保護柱均可以更換保護柱柱芯，可以降低保護柱的使用成本。 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心: 053188039532809 科曉化工儀器有限公司色譜技術(shù)培訓(xùn)資料 液相色譜柱使用注意事項 色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。 c、。 d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。 當(dāng)選用最佳流速時，分析時間可能延長。用水最好使用超純水(電阻率大于18兆歐)，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果。 e．使用HPLC級溶劑配制流動相，使用合適的流動相可延長色譜柱的使用壽命，提高柱性能 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心: 053188039532809 科曉化工儀器有限公司色譜技術(shù)培訓(xùn)資料 液相色譜儀色譜柱使用及維護　每天用足夠的時間來平衡色譜柱，您就會在處理問題方面獲得最大的補償，而且您的色譜柱的壽命也會變得更長！ 一定得做！ 　　新的色譜柱在使用之前應(yīng)該在您自己的液相色譜儀上進行性能測試，即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。 卡套柱的安裝（加預(yù)柱） 1．將卡套架套入柱芯 2．將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于柱芯（見左圖） 3．將已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高過夾套片 4．將子彈頭預(yù)柱放入卡套片內(nèi) 5．將卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊 6．然后依同樣的順序連接好柱子的另一端 7．連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手 更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過濾片（同時可以修補色譜柱） 注意：在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前，應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗，而且修補工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時帶出柱子內(nèi)的填料。 　　硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在正庚烷中的。 色譜柱的維護 1．使用預(yù)柱保護分析柱（硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度） 2．大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2－，盡量不超過該色譜柱的pH范圍 3．避免流動相組成及極性的劇烈變化 4．流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理 5．如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相，應(yīng)在實驗完畢柱子沖洗干凈，并保存大乙腈中 6．壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心: 053188039532809 科曉化工儀器有限公司色譜技術(shù)培訓(xùn)資料 液 相 色 譜 儀 的 保養(yǎng)1．HPLC的日常操作條件：溫度：10—30℃； 相對濕度80％； 最好是恒溫、恒濕，遠(yuǎn)離高電干擾、高振動設(shè)備。 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心: 053188039532809 科曉化工儀器有限公司色譜技術(shù)培訓(xùn)資料 高效液相色譜日常簡易保養(yǎng)及維護 流動相的抽作要求： 高效液相級色譜醇，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過濾； 流動相脫氣至關(guān)重要（可采用抽濾，超聲波脫氣等方法） 吸濾頭： 特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。 手動進樣器： 平時應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進樣分析狀態(tài)清洗；如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染，一般須申請維修或更換配件。 泵壓不穩(wěn) 泵頭有氣泡——流動相脫氣/大流量沖洗泵/用注射器抽取流動動相 單向閥故障——清洗 若上述操作仍不能解決，可用異丙醇沖洗流動（無色譜柱沖洗，由手動進樣器直接進檢測器）， 科曉儀器精誠服務(wù) 聯(lián)系電話：053188032362 88034128 技術(shù)服務(wù)中心