掌握層析chromatography的概念-wenkub
2023-05-23 10:53:32 本頁面
【正文】 的 。 ?.親和層析 （ affinity chromatography） 利用生物大分子之間特有 親和力的不同 進(jìn)分離純化的方法 。 層析 氣相層析（ gaschromatography） 液相層析（ liquidchromatography） 氣 固層析（ gassolid chromatography） 氣 液層析（ gasliquid chromatography） 液 固層析（ liquidsolid chromatography） 液 液層析（ liquidliquid chromatography） ?.吸附層析 (adsorption chromatography ) 利用吸附劑對(duì)不同組分 吸附 能力的不同 加以分離的方法 。 色譜歷史 古羅馬人分析混合染料（類似輻射紙色譜） 1903（ 1906） 年 ， Michael Tswett提出 色譜法 1931年 ， Kuhn采用柱色譜分離了類胡蘿卜素 1941年 ， Martin和 Synge提出分配色譜法 1944年 ， Martin等又提出紙色譜法 1952年 ， Martin和 James發(fā)明了氣液色譜法 1955年 ， 第一臺(tái)商品氣相色譜問世 ， 標(biāo)志著現(xiàn)代色譜分析的建立 1956年 ， Stahl系統(tǒng)研究了薄層色譜法 (TLC) 1958年 ， Stein和 Moore研制出氨基酸分析儀 ，確定了核糖核酸的分子結(jié)構(gòu) 1967年 ， Horvvath和 Huber等研制了高效液相色譜 (highperformance liquid chromatography,HPLC)儀 1975年， Small等提出離子色譜 20世紀(jì) 80年代 ， 超臨界色譜 20世紀(jì) 90年代 ， 毛細(xì)管電泳 （ 1809年 Re?ss第一次電泳實(shí)驗(yàn) ） 21世紀(jì) ， 聯(lián)用技術(shù) 、 大分子色譜分離 、 制備色譜可望取得更大的發(fā)展 層析法進(jìn)行時(shí)有兩個(gè)相 ， 一個(gè)相稱為 固定相 (Stationary phase )， 另一相稱為 流動(dòng)相 (Mobile phase )。 由于各組分所受 固定相的阻力 和 流動(dòng)相的推力 影響 不同 ， 各組分移動(dòng)速度也 各異 ，從而使各組分得到分離 。 ?.分配層析 (partition chromatography ) 利用不同組分在流動(dòng)相和固定相中的 分配系數(shù) 不同而進(jìn)行分離的方法 。 ?.柱層析 （ colum chromatography） 將 固 定 相 裝 在 層 析 柱 中 ， 使樣品 朝著一個(gè)方向移動(dòng) ， 通過各組分隨流動(dòng)相流動(dòng)而得到分離的方法 。 分配系數(shù) 是一種物質(zhì)在兩種特定相中分配 ，在 特定的溫度時(shí) 這個(gè)系數(shù)的值是一個(gè) 常數(shù) ， 即 : 溶質(zhì)在固定相中的濃度 Cs K= ———————————— = —— 溶質(zhì)在流動(dòng)相中的濃度 Cm 有效分配系數(shù) ：定義為化合物在一個(gè)相的總量除以另一個(gè)相中的總量。在離子交換層析中 K為交換常數(shù) . 分配系數(shù) K值大 ,說明物質(zhì)在層析中被固定相吸附得比較牢固 ,隨流動(dòng)相遷移的速度較慢 ,留在固定相中的時(shí)間較長(zhǎng) ,在洗脫液中后出峰。 反之 ,K值相差較小
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