——蛋白的分離純化制作孫艷芝蔣楠于海濤-wenkub
2022-09-12 14:13:23 本頁面
【正文】 蛋白的分離純化 制作 孫艷芝 蔣楠 于海濤 在 高效液相色譜分析 中，用 GFC或 SEC表示凝膠過濾 色譜 或尺寸排阻 色譜 ，流動相通常是水溶液；在有機高分子分析中，常用GPC表示凝膠滲透 色譜 ，流動相通常是有機溶劑；在蛋白質(zhì)分離純化中用 GFC或 SEC表示凝膠過濾層析或尺寸排阻層析 ? 蛋白質(zhì)分離 ，基于混合中不同蛋白質(zhì)分子尺寸大小進行分離； ? 分子量測定 ，蛋白質(zhì)分子量（球形）的對數(shù)與其在凝膠過濾層析時的保留時間呈線性關(guān)系； ? 樣品 脫鹽 或溶劑置換。根據(jù) 1g干膠溶脹后的體積和所需柱床體積，即可推算出干膠的需要量。此時柱下口一邊排水，上口一邊加入攪勻的凝膠，可見凝膠連續(xù)均勻地沉降，逐步形成凝膠柱。然后將樣品加在凝膠表面，打開柱下口開關(guān)，控制流速，使樣品慢慢滲入凝膠內(nèi)。 ? 洗脫 A. 用規(guī)定的溶液流過樣品，使分子量不同的樣品逐步分開并先后由柱床流出的過程稱為洗脫。與此同時，再從蛋白質(zhì)的管中取出 1滴于白色比板中，加入奈氏試劑 1滴，如蛋白管中不出現(xiàn)棕色，即表示蛋白質(zhì)中的硫酸銨已除去。
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