葡聚糖凝膠測(cè)蛋白質(zhì)分子量(已修改)
2024-10-31 05:37 本頁(yè)面
【正文】 凝膠過(guò)濾法測(cè)定(c232。d236。ng)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量,第一頁(yè)，共十頁(yè)。,目的要求： 學(xué)習(xí)凝膠過(guò)濾法的操作方法 學(xué)習(xí)使用凝膠過(guò)濾法測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量 實(shí)驗(yàn)原理： 凝膠層析法〔即凝膠過(guò)濾法，gel filtration〕是以具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠顆粒作為固定相，葡聚糖凝膠是由線性葡聚糖和交聯(lián)劑組成的有不同孔隙度的立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，根據(jù)物質(zhì)在凝膠顆粒的微孔中擴(kuò)散的速率進(jìn)行別離(fēnl237。)，大分子移動(dòng)的速度快，先被洗脫出來(lái)，而小分子物質(zhì)移動(dòng)的速度慢，后被洗脫出來(lái)。,第二頁(yè)，共十頁(yè)。,不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。例如，G25為每克凝膠膨脹(p233。ng zh224。ng)時(shí)吸水2.5克，同樣G200為每克干膠吸水20克。因此，“G〞反映，凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分部范圍。,第三頁(yè)，共十頁(yè)。,在洗脫過(guò)程中，大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而沿凝膠顆粒間的空隙最先流出柱外，而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，流速緩慢，以致最后流出柱外，從而使樣品中分子大小不同的物質(zhì)得到(d233。 d224。o)別離。,第四頁(yè)，共十頁(yè)。,將凝膠裝柱后，柱床體積稱為“總體積〞，以Vt〔total volume〕表示。Vt是由三局部組成，包括內(nèi)水容積
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