基因表達和基因重組(已修改)
2025-01-15 17:44 本頁面
【正文】 基因重組和基因工程 Geic Rebination and Geic Engineering 第 十 四 章 基因重組 ： 不同的 DNA分子間發(fā)生共價連接形成重組 DNA 分子。 重組 DNA 質粒 DNA 基因片段 重組 DNA技術發(fā)展史 pSC101 EcoRI Boyer 和 Cohen的實驗 和pR65 大腸桿菌 pSC101 pR65 抗四環(huán)素 抗卡那霉素 EcoRI 抗卡那霉素基因 DNA連接酶 重組 DNA分子 培養(yǎng)平皿 四環(huán)素平板 卡那霉素基因 四環(huán)素 \卡那霉素基因 大腸桿菌 人體生長激素釋放激素 (SS) 抑制和調節(jié)多種激素的作用 從動物腦中提取 : 5mg50萬只羊腦 基因工程 9升大腸桿菌 培養(yǎng)液 SS基因 基因載體 重組體 分 切 接 轉 篩 表 SS 第 一 節(jié) DNA的重組 DNA Rebination DNA重組 接合作用 (conjugation) 轉化作用 (transformation) 轉導作用 (transduction) 轉 座 (transposition) 同源重組 (homologous rebination) 位點特異的重組 (sitespecific rebination) 發(fā) 生 在 同 源 序 列 間 的 重 組 稱 為 同 源 重 組(homologous rebination)， 又稱基本重組 。 是最基本的 DNA重組方式 ， 通過鏈的斷裂和再連接 ， 在兩個 DNA分子同源序列間進行單鏈或雙鏈片段的交換 。 一、同源重組 二、細菌的基因轉移與重組 （一）接合作用 當細胞與細胞 、 或細菌通過菌毛相互接觸時 ， 質粒 DNA從一個細胞 （ 細菌 ） 轉移至另一細胞 （ 細菌 ） 的 DNA轉移稱為接合作用(conjugation)。 可接合質粒如 F 因子 (F factor) 質粒 —— 細菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈 DNA分子 （二）轉化作用 通過自動獲取或人為地供給外源 DNA， 使細胞或培養(yǎng)的受體細胞獲得新的遺傳表型 ， 稱為轉化作用 (transformation)。 例：溶菌時，裂解的 DNA片段被另一細菌攝取。 （三）轉導作用 當病毒從被感染的 （ 供體 ） 細胞釋放出來 、 再次感染另一 （ 供體 ） 細胞時 ， 發(fā)生在供體細胞與受體細胞之間的 DNA轉移及基因重組即為轉導作用(transduction)。 λ噬菌體的生活史 溶菌生長途徑 (lysis pathway) 溶源菌生長途徑 (lysogenic pathway) 例 第 二 節(jié) 重組 DNA技術 DNA Rebination Technique ? 相關概念 ? DNA克隆 ? 工具酶 ? 目的基因 ? 基因載體 ? 基本原理 ? 重組 DNA技術與醫(yī)學的關系 本節(jié)主要內容 一 、 重組 DNA技術相關概念 克隆 (clone) 來自同一始祖的相同副本或拷貝的集合。 獲取同一拷貝的過程稱為 克隆化 (cloning)，即 無性繁殖 。 （一） DNA克隆 技術水平： 分子克隆 (molecular clone) 即 DNA 克隆 細胞克隆 個體克?。▌游锘蛑参铮? DNA克隆 應用酶學的方法 ， 在體外將各種來源的遺傳物質 （ 同源的或異源的 、 原核的或真核的 、 天然的或人工的 DNA） 與載體 DNA接合成一具有自我復制能力的 DNA分子 —— 復制子 (replicon)， 繼而通過轉化或轉染宿主細胞 ， 篩選出含有目的基因的轉化子細胞 ， 再進行擴增提取獲得大量同一DNA分子 ， 也稱 基因克隆或重組 DNA (reb
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