基因工程的基本操作程序(3)(已修改)
2024-09-28 20:46 本頁面
【正文】 基因工程的基本操作程序主要包括 四個基本步驟： 1）目的基因的獲取 2）基因表達(dá) 載體的構(gòu)建 3）將目的基因 導(dǎo)入 受體細(xì)胞 4）目的基因的 檢測 與鑒定 步驟一： 目的基因的獲取 目的基因是人們所 需要轉(zhuǎn)移 或 改造 的基因 , 獲取目的基因是實(shí)施基因工程的第一步 。 如蘇云金芽孢桿菌的 抗蟲基因 ，還有植物的 抗病 （ 抗病毒 、 抗細(xì)菌 ） 基因 、種子 貯藏蛋白的基因 ，以及人的 胰島素基因 、 干擾素基因 等。 1）從基因文庫中獲取目的基因： 基因文庫 : 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段 ,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存 ,各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因 ,稱為基因文庫 (gene library) 基因組文庫 : 基因文庫中包含了一種生物所有的基因 ,這種基因文庫叫做基因組文庫 . 部分基因文庫 : 基因文庫中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫叫做部分基因文庫 . 如何從基因文庫中得到所需要的基因？ 依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。 如：根據(jù) 基因的核苷酸序列 基因的功能基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì) 等特性。 構(gòu)建基因組 DNA文庫時，首先應(yīng)分離細(xì)胞的 A、染色體 DNA B、線粒體 DNA C、總 mRNA D、 tRNA 目的基因可從基因文庫中獲得，下列有關(guān)基因文庫的描述正確的是 A、某生物的全套基因就是一個基因文庫 B、將含有某種生物不同的許多 DNA片段，導(dǎo)入某個生物 體內(nèi)，則這個生物就是一個基因文庫 C、含有一種生物所有基因的基因文庫叫做基因組文庫 D、含有一種生物的一部分基因的基因文庫叫 cDNA文庫 A C 2） PCR技術(shù) —— 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ? 原理： ? 前提： ? 原料 ? 方式 PCR擴(kuò)增儀 DNA復(fù)制 一段已知目的基因的核苷酸序列 ： 以 _____方式擴(kuò)增， 即 ____（ n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)） 指數(shù) 2n 模板 DNA； DNA引物；四種脫氧核苷酸；熱穩(wěn)定 DNA聚合酶（ Taq酶）；離子 ? 過程 變性、退火、延伸三步曲 ?變性： 加熱至 90～ 95℃雙鏈 DNA解鏈成為單鏈DNA ?退火： 冷卻至 55～ 60℃部分引物與模板的單鏈DNA的特定互補(bǔ)部位相配對和結(jié)合 ?延伸： 加熱至 70～ 75℃以目的基因?yàn)槟０?，合成互補(bǔ)的新 DNA鏈 變性 退火 延伸 ? （ 3） 人工合成 —— 根據(jù)已知的氨基酸序列合成
環(huán)評公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1