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正文內(nèi)容

微生物學(xué)復(fù)習(xí)資料(已修改)

2025-08-17 07:11 本頁(yè)面
 

【正文】 微生物學(xué)中的一些問(wèn)題第2章純培養(yǎng)、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法,大多數(shù)專業(yè)的菌種保藏機(jī)構(gòu)均采用這兩種方法作為主要的微生物保存手段。( T ),4D作為唯一碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物,你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)? 從對(duì)氨基苯乙酸/2,4D含量較高的環(huán)境中采集土樣或水樣。配制僅以對(duì)氨基苯乙酸//2,4D作為唯一碳源培養(yǎng)基,進(jìn)行增殖培養(yǎng)。配制培養(yǎng)基,制備平板,一種僅以對(duì)氨基苯乙酸/2,4D作為唯一碳源(A),另一種不含任何碳源作為對(duì)照(B) 。將樣品適當(dāng)稀釋(十倍稀釋法),涂布A平板。將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng),觀察是否有菌落產(chǎn)生。將A平板上的菌落編號(hào)并分別轉(zhuǎn)接至B平板,置于相同溫度條件下培養(yǎng)(在B平板上生長(zhǎng)的菌落是可利用空氣中CO2的自養(yǎng)型微生物) 。挑取在A平板上生長(zhǎng)而不在B平板上生長(zhǎng)的菌落,在一個(gè)新的A平板上劃線、培養(yǎng),獲得單菌落,初步確定為可利用對(duì)氨基苯乙酸/2,4D作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物。第3章結(jié)構(gòu)1.革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖單體由(1)雙糖單位 (2)四肽尾 (3)肽間橋三部分組成。.組成上的差別:大腸桿菌(革蘭氏陰性菌):肽聚糖含量低;無(wú)磷壁酸;類脂質(zhì)含量高;蛋白質(zhì)含量高。金黃色葡萄球菌(革蘭氏陽(yáng)性菌):肽聚糖含量很高;磷壁酸含量很高;無(wú)類脂質(zhì);無(wú)蛋白質(zhì)。 結(jié)構(gòu)差別:大腸桿菌:肽聚糖:四肽尾是“L丙氨酸—D谷氨酸—L賴氨酸—D丙氨酸” );甘氨酸五肽橋;厚度大;交聯(lián)度大。金黃色葡萄球菌:四肽尾是“L丙氨酸—D谷氨酸—mDPA—D丙氨酸”;無(wú)特殊肽橋;厚度?。唤宦?lián)度小。A肽橋 B粘肽 C雙糖單位 D四肽尾4. 革蘭氏染色法的分子機(jī)制是什么,基本操作步驟,哪一步是關(guān)鍵步驟;G+ 菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖含量高,交聯(lián)度大,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結(jié)晶紫碘復(fù)合物被阻留在細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞不能被酒精脫色,仍呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,酒精將細(xì)胞脫色,細(xì)胞無(wú)色,沙黃復(fù)染后呈紅色革蘭氏染色法的操作步驟:第一步:結(jié)晶紫初染;第二步:碘液媒染;第三步:酒精脫色。第四步:沙黃復(fù)染。其中關(guān)鍵步驟:酒精脫色。:溶菌酶主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N乙酰胞壁酸和N乙酰氨基葡糖之間的β1,4糖苷鍵,使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。水解肽聚糖雙糖單位中的β-1,4-糖苷鍵,導(dǎo)致細(xì)菌因細(xì)胞壁肽聚糖的“散架”而死亡。青霉素抑制繁殖期細(xì)菌細(xì)胞壁的合成而發(fā)揮殺菌作用,起效迅速。作用于肽聚糖肽橋的聯(lián)結(jié),即抑制肽聚糖的合成,故僅對(duì)生長(zhǎng)著的菌有效,主要是G+菌。+細(xì)菌的細(xì)胞壁上存在,而LPS則僅在G細(xì)菌的細(xì)胞壁上存在。(T ):L型細(xì)菌、支原體、原生質(zhì)體、球狀體。:某些微生物在其生長(zhǎng)發(fā)育后期于胞內(nèi)形成的一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、抗逆性極強(qiáng)的休眠體。(F ),由內(nèi)向外分別是:皮層、芽孢衣和孢外壁。: 少數(shù)芽孢桿菌在其形成芽孢的同時(shí),會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體內(nèi)毒素,稱為伴胞晶體,并用滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說(shuō)說(shuō)明芽孢的耐熱機(jī)制。.芽孢的外壁層厚而致密,主要成分為脂蛋白,通透性差,不易著色。核心含有大量的DNA、RNA、蛋白質(zhì)酶等物質(zhì),還含有2,6—吡啶二羧酸(DPA),DPA是芽孢特有的成分。一般以 DPA—Ca的形式存在。皮層主要含芽孢肽聚糖、 DPA—Ca,皮層體積大,比較致密。芽孢平均含水量低,約40%。滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說(shuō)認(rèn)為芽孢衣對(duì)多價(jià)陽(yáng)離子和水分的透性很差,而皮層含有大量交聯(lián)度低、負(fù)電荷強(qiáng)的芽孢肽聚糖,它與低價(jià)陽(yáng)離子一起賦予皮層高滲透壓的特性去奪取芽孢核心的水分,結(jié)果造成皮層的充分膨脹,而核心部分的細(xì)胞質(zhì)高度失水。核
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