【正文】 2,4D和6BA對何首烏葉片愈傷組織誘導的影響摘 要何首烏不僅是傳統(tǒng)中藥植物，在食用和保健方面也具有很高的使用價值。隨著人們對何首烏的研究不斷深入，傳統(tǒng)的繁殖方法已經(jīng)不能滿足市場的需求。采用組織培養(yǎng)快速繁殖繁技術不僅可以保護品種的遺傳性，而且不受外界條件影響，可以在較短時間內(nèi)繁育出上百萬株種苗。很多研究學者已對何首烏的莖、葉等通過組織培養(yǎng)獲得再生植株。本次研究取何首烏的幼嫩葉片為外殖體，以MS為基本培養(yǎng)基。通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中2，4D、6BA的不同濃度，研究激素對何首烏葉片誘導分化的影響，結(jié)果表明外殖體的誘導分化以MS+2，4D (1mg/L)+6BA()+蔗糖30g/L+瓊脂20g/L組合的培養(yǎng)基最佳，出愈率最高。關鍵詞 何首烏，組織培養(yǎng)，愈傷組織ABSTRACTPolygonum multiflorum is not only the traditional Chinese medicine plants ，also has a high value in the food and health care，With the deepening of Polygonum, traditional breeding methods have been unable to meet market demand. Using tissue culture rapid reproduction of plicated technology not only can protect a variety of hereditary and not subject to external conditions, breeding hundred ten thousand seedlings in a relatively short period of time. Many researchers have fleeceflower root, stem, leaf tissue culture to obtain regenerated plants. This study to take Polygonum young leaves of the explants, MS medium，By adjusting the medium 2,4D,6BA with different concentrations to study the hormone induced differentiation of Polygonum multiflorum leaves, the results show that the induction of differentiation of the explants to MS +2, 4D (1mg / L) +6BA ( / L) + sucrose 30g / L + agar 20g / L, bination of best medium, the highest callus.Key words： Polygonum multiflorum, tissue culture, callus 目 錄摘 要 IABSTRACT II1 緒 論 1 1 1 1 3 3 3 5 7 脫分化與再分化 7 8 目的和意義 9 研究內(nèi)容 9 研究目的 9 研究意義 92　 材料與方法 10 10 實驗用品 10 實驗材料的采集 10 10 10 11 培養(yǎng)基滅菌 12 接種和培養(yǎng) 143 實驗結(jié)果與分析 16 16 實驗結(jié)果分析 16 16 18 194 實驗討論 21 實驗結(jié)果討論 21 21 21 22 22 染菌 235 結(jié)論 24 24 24參 考 文 獻 25致 謝 271 緒 論何首烏為多年生草本。喜陽，耐半陰，喜濕，畏澇。要求排水良好的土壤，塊根肥厚，長橢圓形，黑褐色。莖纏繞，長24厘米，多分枝，具縱棱，無毛。微粗糙，下部木質(zhì)化。葉卵形或長卵形，長37厘米，寬25厘米，頂端漸尖，基部心形或近心形，兩面粗糙，邊緣全緣；；托葉鞘膜質(zhì)，偏斜，無毛，長35毫米。花序圓錐狀，頂生或腋生，長1020厘米，分枝開展，具細縱棱，沿棱密被小突起；苞片內(nèi)具24花；花梗細弱，長23毫米，下部具關節(jié)，果時延長；花被5深裂，白色或淡綠色，花被片橢圓形，大小不相等，外面3片較大背部具翅，果時增大，花被果時外形近圓形，直徑67毫米；雄蕊8，花絲下部較寬；花柱3，極短，柱頭頭狀。瘦果卵形，具3棱，黑褐色，有光澤，包宿花被內(nèi)?；ㄆ?9月，果期910月。何首烏為蓼科多年生纏繞草本植物,其塊根為我國名貴的中藥材,主要分布在廣西、廣東、貴州、四川、湖北、江蘇、河南,此外,云、陜、隴、湘、贛、浙、閩等地也有分布。廣西何首烏野生資源豐富,品種繁多,但是質(zhì)量參差不齊,近幾年來對野生何首烏掠奪性采挖現(xiàn)象非常嚴重,亟須進行人工栽培。何首烏在云南主要分布于昆明、曲靖、昭通、玉溪、楚雄、迪慶、麗江、臨滄、思茅及紅河、文山等地區(qū)。我國的主產(chǎn)區(qū)為河南嵩縣、盧氏，湖北恩施、巴東、長陰、秭歸、建始、咸豐，廣西南丹、靖西，廣東德慶，貴州銅仁、黔南，四川樂山、宜賓，江蘇江寧、江浦等地。另外在我國華東、中南及河北、山西、陜西、甘肅、臺灣等地也有分布。廣東德慶何首烏的種植歷史悠久，產(chǎn)量大，為何首烏的地道藥材品種。常生于海拔1600～2800m的草坡、路邊、山坡石隙及灌木叢中。何首烏味苦、甘、澀，微溫。為補益類中藥。唐代李翱的《何首烏傳》載：治五痔腰膝之病，冷氣心痛，積年勞瘦痰癖，風虛敗劣，長筋力，益精髓，壯氣駐顏，黑發(fā)延年。婦人惡血痿黃，產(chǎn)后諸疾，赤白帶下，毒氣入腹，久痢不止，其功不可具述。《日華子本草》載：“治一切冷氣及腸風”。宋《開寶本草》載：“主瘰疬，消癰腫，療頭面風瘡…”。宋《重修政和經(jīng)史證類備用本草》在上述用途基礎上增補了“止心痛、益血氣，黑須發(fā)，悅顏色，久服長筋骨，益精髓，延年不老，亦治婦人產(chǎn)后及帶下諸疾” 。明代蘭茂《滇南本草》載：“久服延年耐寒”，“入腎為君，澀精，堅腎氣，止赤白便濁，縮小便，入血分，消痰毒。治赤白癜風，瘡疥頑癬，皮膚瘙癢”等疾病。明代李時珍《本草綱目》載：“漢武時，有馬肝石能烏人發(fā)，故后人隱此名。亦曰馬肝石。赤者能消腫毒，外科呼為瘡帚，紅內(nèi)消”。按《中華人民共和國藥典》2000年版一部所述：何首烏性味歸經(jīng)為：苦、甘、澀，溫。歸肝、心、腎經(jīng)。功能主治為：解毒，消癰，潤腸通便。用于瘰疬瘡癰，風疹瘙癢，腸燥便秘；高血脂。據(jù)本草及有關文獻記載，古之“何首烏”藥材有赤、白兩種。經(jīng)考證：赤者即現(xiàn)在全國使用的歷版《中華人民共和國藥典》一部收載品何首烏的干燥塊根；其藤莖為《中華人民共和國藥典》一部收載品首烏藤，又稱夜交藤。白者即今我國北方各省習用的白首烏，其原植物為蘿摩科鵝絨藤屬植物白首烏的干燥塊根。何首烏，是云臺山盛產(chǎn)的藥材之一，屬蓼科多年生草藤植物，其性微溫，微苦，甘，澀。具益氣血、黑須發(fā)、悅顏色、久服長筋骨、益精髓、延年不老等諸多功效。李時珍的《本草綱目》稱其為“地精”，為古今中醫(yī)界公認的“抗衰老中藥”。何首烏是中國特有藥材，其藥用歷史悠久，在臨床有著廣泛的應用。化學成分：塊根含蒽醌類化合物，主為大黃素（emodin），大黃酚（chrysophanol）以及大黃素甲醚（physcion），大黃酸（rhein），大黃酚蒽酮（chrysophanol anthrone）。又含芪類化合物：白藜蘆醇（resveratrol），云杉新甙（piceid），2，3，5，4′四羥基芪2OD葡萄糖甙（2，3，5，4’－tetrahydroxystilbene－2－OβDglu－copyranoside）、 2，3，5，4′四羥基芪2－O葡萄糖甙2″O沒食子酸酯（2，3，5，4′－tetrahydroxystilbene－2－OβD－glucoPyranoside－2″Omonogalloyl ester）、2，3，5，4′四羥基芪2－O葡萄糖甙3″O沒食子酸酯（2，3,5，4′tetrahydroxystilbene2－OβD－glucopyranoside3″monogalloyl ester)。還含沒食子酸（gallic acid），右旋兒茶精（catechin），右旋表兒茶精（epicatechin），3－O沒食子酰（－）兒茶精[3Ogalloyl(）－catechin]， 3－O沒食子酰（）表兒茶精[3Ogalloyl()epicatechin]， 3－O沒食子酰原矢車菊素（3Ogalloylprocyanidin）B2，3，3′二O沒食子酰原矢