【正文】 微生物學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)題 （供 2020級醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)本科） 名詞解釋： 凝固酶 ：金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生游離凝固酶和結(jié)合凝固酶兩種，前者分泌至菌體外，被血漿中的協(xié)同因子激活為凝血酶，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，導(dǎo)致血漿凝固。后者結(jié)合于菌體表面不釋放，能與纖維蛋白原結(jié)合，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白而引起細(xì)菌凝聚，故又稱為凝聚因子。 Vi抗原 ：傷寒、希氏沙門菌的表面抗原，是覆蓋在 LPS外的莢膜多糖抗原。抗吞噬、抗體、補(bǔ)體，與毒力有關(guān)。能阻止 O抗原與相應(yīng)抗體凝集，可進(jìn)行噬菌體分型。 肥達(dá)試驗(yàn)： 用已知傷寒、副傷寒沙門菌的 O、 H抗 原，檢測受檢血清中有無相應(yīng)的抗體的半定量凝集試驗(yàn)，稱為肥大反應(yīng)。 衛(wèi)星現(xiàn)象： 當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌一起培養(yǎng)時(shí)，可見到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血桿菌菌落較大，而遠(yuǎn)離葡萄球菌的流感嗜血桿菌菌落較小，這種現(xiàn)象稱為衛(wèi)星現(xiàn)象。 抗 O試驗(yàn)： 抗鏈球菌溶素 O抗體檢測，是一種體外毒素抗毒素中和試驗(yàn)?？谷苎?O抗體 ASO可中和溶血素 O的活性，常用于風(fēng)濕熱的輔助診斷，活動性風(fēng)濕熱患者抗體效價(jià)一般超過 400個單位。 MRSA:1ug苯唑西林紙片的抑菌圈直徑 10mm或其 MIC4ug/ml的金黃色片葡萄球菌稱為 MRSA. 對 1ug的苯唑西林抑菌圈 10mm或其 MIC 統(tǒng)稱為耐甲氧西林葡萄球菌 MRS. HLARE:氨基糖苷類高水平耐藥 ， D試驗(yàn)： 克林霉素誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)， 外 裴反應(yīng) :變形桿菌屬中的某些特殊菌株如 X1 X XK、的菌體抗原與某些立克次體有共同抗原，能出現(xiàn)交叉凝集，臨床上用這些變形桿菌代替立克次體與患者血清做凝集反應(yīng)，可作為立克次體病的輔助診斷試驗(yàn)，稱為外 裴反應(yīng)（ WeilFelix reaction） 。 遷徙生長現(xiàn)象 ：奇異變形桿 菌和普通變形桿菌的大多數(shù)菌株在普通瓊脂平板上可蔓延成 菌接種部位為中心的厚薄交替 的 波紋狀薄膜布滿整個培養(yǎng)基表面的現(xiàn)象，稱為遷徙生長現(xiàn)象 神奈川試驗(yàn) ： 副溶血性弧菌在普通血平板（含羊、兔或馬等血液）上不溶血或只產(chǎn)生 α溶血；但在在特定條件下 ,副溶血性弧菌中某些菌株在含高鹽 (70g/LNacl)的人 O 型血或兔血及以 D甘露醇為炭源的我妻 (Wagatsuma)血瓊脂平板上可產(chǎn)生 β 溶血 ,該現(xiàn)象作為鑒定致病性與非致病性菌株的一項(xiàng)重要指標(biāo) . 結(jié)核菌素試驗(yàn) ： 結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分，有兩種，舊結(jié)核菌素（ OT） 和 純蛋白 衍生物（ PPD） ，取 5U（ ）PPD 或 OT 注射于前臂掌側(cè)皮下，注射后 48~72 小時(shí)后觀察 ，以是否出現(xiàn)紅腫、硬結(jié)，以及其大小判斷結(jié)果。 卡介苗 ：有毒力的牛型結(jié)核分支桿菌在含甘油、馬鈴薯和膽汁的培養(yǎng)基中經(jīng) 13 年 230 次傳代而獲得的減毒變異株。 抗酸桿菌 ：分支桿菌屬中大多數(shù)細(xì)菌，菌體內(nèi)含有分支菌酸，具有抗酸性，一般不易著色，能抵抗 3%鹽酸酒精的脫色作用，這類細(xì)菌又稱為抗酸桿菌 有菌免疫 ：是指細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體后對細(xì)菌再次入侵有免疫力，而當(dāng)細(xì)菌或其成分從體內(nèi)徹底消失后機(jī)體的免疫力也隨之消失。 細(xì) 菌外膜 ：革蘭陰性菌的特有成分，有脂質(zhì)雙層、脂蛋白、脂多糖三部分組成，作為保護(hù)屏障可阻止或減緩膽汁鹽、抗體及其他可能殺死或損害細(xì)菌的有毒物質(zhì)的進(jìn)入，也可阻止周質(zhì)酶等一些細(xì)胞成分的損失。 脂多糖 ：由脂質(zhì)雙層向細(xì)胞外表伸出的是脂多糖，包括磷脂 A、核心多糖和 O側(cè)鏈三個組成部分。 R 質(zhì)粒 ：又稱耐藥質(zhì)粒，具有編碼能夠破壞或修飾抗生素的酶基因。 毒性噬菌體 ：能在宿主菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖 ,產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌，稱為毒性噬菌體。 溫和噬菌體 ：又稱溶原性噬菌體， 噬菌體基因與宿主菌染色體整合，不產(chǎn)生子代噬菌體，但噬菌 體 DNA 能隨細(xì)菌 DNA 復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳代 。 接 合 ：細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通，將遺傳物質(zhì)（質(zhì)粒）從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。 溶原性轉(zhuǎn)換 ：是侵入細(xì)菌的噬菌體在溶原期以前噬菌體形式在細(xì)菌內(nèi)與細(xì)菌的染色體發(fā)生重組，導(dǎo)致細(xì)菌的基因型發(fā)生改變，溶原性細(xì)菌可以獲得新的性狀。 轉(zhuǎn)導(dǎo) ：以溫和噬菌體為載體，將供體菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌中，使后者獲得新的性狀。 Hfr：高頻重組株， F 質(zhì)?；蚪?jīng)接合傳遞后 ,與染色體重組 ,整合后的細(xì)菌能以高效率轉(zhuǎn)移染色體上的基因， 這種染色體被整合進(jìn) F 質(zhì)?；?的受體菌稱 Hfr。 毒血癥 ：致病菌 進(jìn)入機(jī)體后，只能在機(jī)體局部生長繁殖不進(jìn)入血循環(huán)，但其產(chǎn)生的外毒素入血。 內(nèi)素毒 ：是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖，當(dāng)菌體死亡崩解后游離出來。耐熱，有毒性作用（發(fā)熱、白細(xì)胞反應(yīng)、內(nèi)毒素血癥、DIC），抗原性弱，不可脫毒為類毒素。 外毒素 ：是多數(shù)革蘭陽性菌和少數(shù)革蘭陰性菌在生長繁殖過程中，釋放到菌體外的蛋白質(zhì)。不耐熱，毒性強(qiáng)，對組織有選擇性作用，抗原性強(qiáng)，可脫毒為類毒素。 中度敏感 ：常規(guī)用藥時(shí)，達(dá)到平均血藥濃度，一般相當(dāng)于或略高于某種細(xì)菌的 MIC。對細(xì)菌引起的感染僅在應(yīng)用高劑量該藥物時(shí)有效，或細(xì)菌處于體內(nèi)抗菌藥物濃集 的部位或體液 (尿、膽汁、腸腔）中時(shí)才被抑制。對毒性較小藥物，可適當(dāng)加大劑量仍可獲得臨床療效。 中介 ：不是敏感習(xí)性的度量，作為“緩沖堿”，以防止因微小技術(shù)因素失控導(dǎo)致的結(jié)果偏差，臨床意義不確定。 MIC：最低抑菌濃度（μ g/ml)，指在體外實(shí)驗(yàn)中抗菌藥物抑制培養(yǎng)基中某種細(xì)菌的生長的最低藥物濃度，是藥物抗菌活性的指標(biāo)，提示藥物的抑菌能力。 洶涌發(fā)酵現(xiàn)象 ：在牛乳培養(yǎng)基中能分解乳糖產(chǎn)酸，使酪蛋白胨凝固，同時(shí)產(chǎn)生大量氣體，將凝固的酪蛋白胨沖成蜂窩狀，并將液面上的凡士林層向上推擠，甚至沖開管口棉塞，氣勢兇猛，稱為“洶涌 發(fā)酵“ ，是產(chǎn)氣莢膜梭菌的特征。 無芽胞厭氧菌 ：是指一大群咋愛有氧條件下不能生長，必須在無氧條件下才能生長的無芽孢的革蘭陽性及革蘭陰性的球菌與桿菌。 二相性真菌 ：有些真菌可因環(huán)境條件（如營養(yǎng)、溫度。氧氣等）改變，可由一種形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N形態(tài)，此真菌稱為二相性真菌。 假菌絲 ： 又稱無隔菌絲，是指 酵母菌進(jìn)行出芽生殖時(shí)，子母細(xì)胞不立即分離而以狹小的面積相連，則稱這種藕節(jié)狀的細(xì)胞串為假菌絲 。 病毒 ： 是由一個核酸分子（ DNA 或 RNA）與蛋白質(zhì)構(gòu)成的非細(xì)胞形態(tài)的營寄生生活的生命體。 病毒體 ：完整的成熟病毒顆粒，由核酸和蛋 白質(zhì)構(gòu)成，其核心只有一種核酸（ DNA 或 RNA），外被蛋白質(zhì)衣殼構(gòu)成核衣殼，有些病毒的核衣殼外還被有包膜。 病毒衣殼 :包圍在病毒核酸外的一層蛋白質(zhì)，由一定數(shù)量殼粒聚合而成。病毒衣殼的排列呈 3 種對稱型（ 20 面立體對稱、螺旋對稱、復(fù)合對稱）可作為病毒鑒定和分類的依據(jù)。 包膜 ：是病毒以出芽方式從細(xì)胞內(nèi)釋放時(shí)穿過核膜、胞質(zhì)膜、空泡膜等，在核衣殼外獲得了宿主細(xì)胞的膜成分。 血凝素 ：又稱紅細(xì)胞凝集素，為包膜上的柱狀突起糖蛋白，與病毒吸附和穿入宿主細(xì)胞有關(guān)，能與人、雞、豚鼠等多種紅細(xì)胞表面的 N乙酰神經(jīng)氨酸受體結(jié)合引起紅細(xì) 胞凝集。 反轉(zhuǎn)錄病毒 ：反轉(zhuǎn)錄病毒是帶有反轉(zhuǎn)錄酶（依賴 RNA 的 DNA 聚合酶）的 RNA 病毒，此病毒在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下以病毒 RNA 為模板轉(zhuǎn)錄出互補(bǔ) DNA 鏈，單鏈 DNA進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)互補(bǔ)另一條 DNA，形成雙鏈 DNA 并以前病毒的形式整合于宿主 DNA 中。 問答題： 試述微生物的種類及主要特點(diǎn) 1 試述微生物的種類及主要特點(diǎn) 答：微生物的種類有：非細(xì)胞型微生物，原核細(xì)胞型微生物，真核細(xì)胞型微生物。 主要特點(diǎn) 非細(xì)胞型微生物：無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無產(chǎn)生能量酶，一種核酸，專性胞內(nèi)寄生 原核細(xì)胞型微生物：擬核，無核仁、核膜，只有核糖 體，兼性寄生 真核細(xì)胞型微生物：細(xì)胞核，有核仁、核膜，細(xì)胞器完整，腐生為主 種類： 非細(xì)胞型微生物、原核細(xì)胞型微生物、真核細(xì)胞型微生物 特點(diǎn)： 1 個體?。?um/nm) 2 結(jié)構(gòu)簡單：單細(xì)胞或簡單多細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無分化。 3 代謝能力強(qiáng)、繁殖迅速 4 容易變異、種類多、分布廣泛 簡述正常菌群及生理功能 正常菌群： 正常人體的體表及與外界相通的腔道中，都存在著不同種類和數(shù)量的微生物。在正常情況下，這些微生物對人類無害，成為正常菌群。 生理作用 * 拮抗作用：正常菌群在生物體的特定部位生長后，對其他的菌群有生物拮抗的作用。產(chǎn) 生這種生物屏障的往往是一些 厭氧菌 。正常菌群通過緊密與黏膜上皮細(xì)胞結(jié)出來占領(lǐng)位置，由于在這些部位數(shù)量很大，在營養(yǎng)競爭中處于優(yōu)勢，并通過自身代謝來改變環(huán)境的 pH 值或釋放 抗生素 ，來抑制外來菌的生長。 * 營養(yǎng)作用：正常菌群的存在影響著生物體的物質(zhì)代謝與轉(zhuǎn)化。 如蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪及維生素的合成，膽汁的代謝、膽固醇的代謝及激素轉(zhuǎn)化都有正常菌群的參與。 * 免疫作用：正常菌群的抗源刺激可以使宿主產(chǎn)生免疫，從而減少了本身的危害。已有實(shí)驗(yàn)表明，某些誘發(fā)的自身免疫過程具有抑癌作用。 * 抗衰老作用： 簡述條件致病菌及致病條件 條件致病菌：在正常情況下不致病，在特殊情況下能引起疾病的細(xì)菌。 致病條件： ； ； 。 比較革蘭陽性菌與革蘭陰性菌細(xì)胞壁 細(xì)胞壁 革蘭陽性菌 革蘭陰性菌 強(qiáng)度 較堅(jiān)韌 較疏松 厚度 2080nm 1015nm 肽聚糖層數(shù) 可多達(dá) 50 層 12 層 肽聚糖含量 占細(xì)胞壁干重 50%80% 占細(xì)胞壁干重 5%20% 磷壁酸 + — 外膜 — + 脂蛋白 — + 脂多糖 — + 革蘭染色的步驟及影響因素 （ 1）步驟： 革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟，具體操作方法是： 1）制片：涂片、干燥、固定。 2）初染：草酸銨結(jié)晶紫染 1 分鐘。用細(xì)流水水沖洗，甩去積水。 3）媒染：加盧戈碘液覆蓋涂面染 1 分鐘。用細(xì)流水水沖洗，甩去積水。 4）脫色：加 95%酒精數(shù)滴， 并輕輕搖動進(jìn)行脫色，數(shù)秒后水洗，然后斜持玻片，再加酒精，直到流下的酒精無色為止（約 30秒），用細(xì)流水水沖洗，甩去積水。 5）復(fù)染：加稀釋石炭酸復(fù)紅染 30 秒。用細(xì)流水水沖洗，甩去積水。 標(biāo)本干后，置油鏡下鏡檢。 （ 2）影響因素 操作因素：涂圖片太厚或太薄，固定時(shí)菌體過分受熱以及脫色時(shí)間長短，均會影響結(jié)果 染液因素：所有染液應(yīng)防止染液蒸發(fā)而改變濃度，特別是盧戈碘液久存或受光作用后易失去媒染作用；涂片積水過多會改變?nèi)疽簼舛?，影響染色效果? 細(xì)菌因素：細(xì)菌菌齡不同，革蘭染色結(jié)果也有差異，一般以 18~24 小時(shí)的 培養(yǎng)物染色效果最好，菌齡過長影響細(xì)菌染色性 。 抗酸染色步驟、結(jié)果 步驟 1） 用接種環(huán)挑取約 膿性或呈干酪樣部分痰液做成 25mm 20mm 大小的均勻薄涂片，待自然干燥后用酒精燈火焰固定。 2） 初染 用玻片夾夾持涂片標(biāo)本，滴加石炭酸復(fù)紅 23 滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱 35 分鐘，待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。 3） 脫色 3%鹽酸酒精脫色 至無紅色染液脫下為止， 用水沖洗。 4） 復(fù)染 用堿性美蘭溶液復(fù)染 1 分鐘，用水沖洗后用吸水紙吸干。 用油 鏡檢查并記錄結(jié)果。結(jié)果：油鏡觀察涂片，在淡藍(lán)色背景下可見染成紅色細(xì)長或略帶彎曲的桿菌，并有分枝生長趨向，此為抗酸染色陽性菌。其他細(xì)菌或者細(xì)胞染成藍(lán)色。 ：仔細(xì)觀察至少 300 個視野未發(fā)現(xiàn)抗酸菌。 177。： 100 到 300 個視野內(nèi)發(fā)現(xiàn) 12 條抗酸菌（全部涂膜鏡檢 3 遍） 。 +： 100 個視野內(nèi)發(fā)現(xiàn) 39 條抗酸菌（全部涂膜鏡檢 1 遍）； ++： 10 個視野內(nèi)發(fā)現(xiàn) 19 條抗酸菌； +++：每個視野內(nèi)發(fā)現(xiàn) 19 個抗酸菌； ++++： 每個視野內(nèi)發(fā)現(xiàn) 9 條以上抗酸菌。 細(xì)菌常用生化試驗(yàn)的培養(yǎng)基、底物、指示劑、結(jié)果判斷 A 碳水化合物代謝試驗(yàn) 一 . 糖 (醇 .苷 )類發(fā)酵試驗(yàn) 底物：糖．醇．苷 產(chǎn)物：酸／酸和氣（Ａ／ＡＧ） 指示劑：溴甲酚紫（黃←紫）培養(yǎng)基：肉膏湯Ｐ h７ .４（含相應(yīng) 糖．醇．苷） 結(jié)果：紫→黃（ +） 紫（ ） 二 . 葡萄糖的氧化／發(fā)酵試驗(yàn) 底物：葡萄糖 產(chǎn)物：有機(jī)酸 指示劑：溴色香草酚藍(lán)（黃←綠→藍(lán)）培養(yǎng)基：ＨＬ葡萄糖培養(yǎng)管 （開放 封閉） 結(jié)果： 氧化管（開 ） 發(fā)酵管（封） 綠→黃 綠→黃 發(fā)酵型（ F） 綠→黃 綠 氧化型（ O） 綠 /綠→藍(lán) 綠 不利用 /產(chǎn)堿型（ ） 三 β 半乳糖苷酶試驗(yàn) 底物：鄰硝基酚 β 半乳糖苷（ ONPG）產(chǎn)物：鄰硝基酚（黃色） 培養(yǎng)基： ONPG 培養(yǎng)基 結(jié)果：黃（ +） 不變（ ） 四 七葉甘水解試驗(yàn) 底物：七葉甘 產(chǎn)物：七葉素 指示劑： Fe2+ 培養(yǎng)基：七葉甘培養(yǎng)基 結(jié)果：黑色（ +） 不變（ ） 五．甲基紅試驗(yàn)（ＭＲ試驗(yàn)） 底物： 葡萄糖 產(chǎn)物：酸 指示劑：甲基紅（紅 Ｐ h＜４ .５ ↑