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從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌實驗方案說明(已修改)

2025-05-04 22:41 本頁面
 

【正文】 專業(yè)資料分享 土壤中產(chǎn)淀粉酶芽胞桿菌的篩選及其淀粉酶活力的測定設(shè)計性實驗方案一、綜述: 淀粉酶是淀粉降解酶。它們廣泛存在于微生物、植物和動物體中。它們將淀粉及相關(guān)的聚合物分解為帶有具體淀粉分解酶特征的產(chǎn)品。淀粉酶廣泛存在于動植物和微生物中,是最早用于工業(yè)生產(chǎn)并且迄今仍是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑產(chǎn)品之一。淀粉酶種類繁多,特點各異,可應(yīng)用于造紙、印染、釀造、果汁和食品加工、醫(yī)藥、洗滌劑、工業(yè)副產(chǎn)品及廢料的處理、青貯飼料及微生態(tài)制劑]等多種領(lǐng)域。在釀造發(fā)酵工業(yè)如酒精生產(chǎn)、啤酒制造、發(fā)酵原料液化及糖化工藝過程中均有重要價值,如添加淀粉酶分布非常廣泛,是人們經(jīng)常研究的一種酶。從紡織工業(yè)到廢水處理,這些酶都有不同規(guī)模的應(yīng)用【1】。常見產(chǎn)淀粉酶的主要為芽孢桿菌屬。其中的常見產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌菌種有:地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌和納豆芽孢桿菌【2】、凝結(jié)芽孢【3】。由于芽孢桿菌屬是一類好氧或兼性厭氧、產(chǎn)生抗逆性內(nèi)生抱子的桿狀細菌,許多為腐生菌,主要分布于土壤和植物體表面及水體中【4】。所以此次實驗從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌。二、實驗?zāi)康囊?.了解生物分離提純的原理和方法技術(shù)2.掌握從土壤中篩選產(chǎn)淀粉酶菌株的原理和方法、綜合分析問題解決問題和判斷實驗結(jié)果的能力。三、實驗原理自然界中,土壤是微生物生活最適宜的環(huán)境。土壤具有微生物進行生長繁殖和生命活動中所需的各種條件。土壤中微生物的數(shù)量因土壤類型、季節(jié)、土層深度與層次等不同而異。一般地說,在土壤表面,由于日光照射及干燥等因素的影響,微生物不易生存,離地表10 cm~30 cm的土層中菌數(shù)最多,隨土層加深,菌的數(shù)量減少【5】。從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。平板分離法普遍用于微生物的分離與純化。其基本原理是選擇適合與待分離微生物的生長條件,如營養(yǎng)成分、酸堿度、溫度和氧等要求,或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長,而抑制其他微生物生長的環(huán)境,從而淘汰一些不需要的微生物。值得指出的是,從微生物群體中經(jīng)分離生長在平板上的單個菌落并不一定保證是純培養(yǎng)。因此,純培養(yǎng)的確定除觀察其菌落特征外,還要結(jié)合顯微鏡檢測個體形態(tài)特征后才能確定,有些微生物的純培養(yǎng)要經(jīng)過一系列分離與純化過程和多種特征鑒定才能得到。芽孢桿菌屬的共同特征是:革蘭氏陽性;接觸酶陽性;水解淀粉;VP試驗陽性;不產(chǎn)生吲哚;苯甲氨酸不脫氨;分解酪素;不分解酪氨酸;不產(chǎn)生二羥丙酮;營養(yǎng)體的最高生長溫度大約從25℃到75℃以上;最低生長溫度大約5℃到45℃;生長最低pH值,—8到2左右;耐鹽范圍從低于2%的NaCl到25%NaCl;營養(yǎng)明膠(22℃)7天內(nèi)液化1厘米或1厘米以上??莶菅挎邨U菌和地衣芽孢桿菌在糖發(fā)酵試驗用阿拉伯糖,木糖和甘露糖代替葡萄糖可產(chǎn)酸;作為營養(yǎng)生長的最低限培養(yǎng)基是無維生素的,但含有葡萄糖、檸檬酸鹽和一個氨態(tài)鹽作為唯一的碳源和氮源【6】。細菌特性1. 繁殖快速:代謝快、繁殖快,四小時增殖10萬倍,標(biāo)準(zhǔn)菌四小時僅可繁殖6倍。2. 生命力強:無濕
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