【正文】 檢驗科質量管理體系文件 實驗室病原微生物危害評估報告第1版生效日期：2016年04月28日瑞昌市人民醫(yī)院檢驗科3檢驗科質量管理體系文件目 錄第一章 檢驗科實驗活動生物危害評估報告 3第二章 人類免疫缺陷病毒HIV的生物危害評估報告 10第三章 結核分枝桿菌的生物危害評估報告 13第四章 霍亂弧菌的生物危害評估報告 17第五章 流感病毒的危害評估報告 22第六章 梅毒螺旋體的生物危害評估報告 24第七章 SARS冠狀病毒的生物危害評估報告 26第八章 腦炎病毒的生物危害評估報告 28第九章 淋病奈瑟氏菌的生物危害評估報告 33第十章 鼠疫耶爾森菌的生物危害評估報告 36第十一章 傷寒桿菌的生物危害評估報告 39第十二章 肝炎病毒的生物危害評估報告 42第十三章 禽流感病毒危害評估報告 46第十四章 腸道病毒71型危害評估報告 49第十五章 漢坦病毒危害評估報告 52第十六章 炭疽芽胞桿菌的生物危害評估報告 55第一章 檢驗科實驗活動生物危害評估報告為保證實驗室工作人員在工作中不被危害性生物及物品所侵害，保證危害性物品不外泄，對實驗室工作環(huán)境進行評估，以鑒定生物安全防護等級，保證生物安全。一、危害程度分類及生物安全防護水平評估本檢驗科是為醫(yī)院診斷、預防、治療人體疾病或評估人體健康提供信息為目的，對來自人體的材料進行臨床生物化學、臨床微生物、臨床免疫學、臨床血液、細胞遺傳學等檢驗的實驗室。生物源危害主要是由各種檢驗標本中的微生物，尤其是病原微生物引起的，包括細菌、病毒、寄生蟲等，具有潛在危險性，可能引起實驗室感染；檢驗科微生物室還進行一定數(shù)量的各種條件致病性細菌及真菌的分離培養(yǎng)工作，工作過程存在病原微生物對實驗人員、環(huán)境污染的風險；除之以外實驗室還存在觸電、火災、化學品腐蝕、偷盜等危險。根據(jù)《實驗室生物安全通用要求》，本檢驗科不涉及《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性微生物的分離培養(yǎng)及高致病性微生物的菌、毒種的保藏，實驗室采用一定防護措施就能控制感染或防范災害，或者對相應病原體存在有效的免疫方法。評估我檢驗科生物安全防護水平按二級實驗室（BSL2）生物安全要求。二、實驗人員和實驗室安全防護的一般要求（1）實驗室工作區(qū)內絕對禁止吸煙；（2）點燃的香煙是易燃液體的潛在火種；（3）香煙、雪茄或煙斗都是傳染細菌和接觸毒物的途徑。2. 實驗區(qū)內食用食物、飲料及其它危害評估及防護（1）實驗工作區(qū)內不得有食物、飲料及存在“手－口”接觸可能的其它物質（2）實驗室工作區(qū)內的冰箱禁止存放食物。專用存放食物的冰箱應放置在允許進食、喝水的休息區(qū)內。實驗工作區(qū)內禁止使用化妝品進行化妝，但允許并建議經(jīng)常洗手的實驗人員使用護手霜。4. 實驗中眼睛和面部的風險評估及防護（1）處理腐蝕性或毒性物質時，須使用安全鏡、面罩或其它保護眼睛和面部的防護用品。（2）工作人員在實驗室的危險區(qū)內不要佩戴隱形眼鏡，除非同時使用護目鏡或面罩。（3）使用、處理能夠通過粘膜和皮膚感染的試劑，或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時，必須佩帶護目鏡、面罩或面具式呼吸器。5. 實驗中服裝和個人防護裝備的一般要求（1）應穿著符合實驗室工作需要的服裝，工作服應干凈、整潔。當工作中有危險物噴濺到身上的可能時，應使用一次性塑料圍裙或防滲外罩。有時還需要佩戴其它防護裝備如：手套、護目鏡、披肩或面罩等。（2）采血員和其他需要接觸病員的工作人員，在接觸病員時需穿實驗服或工作服。（3）個人防護服裝應定期更換以保持清潔，遇被危險物品嚴重污染，則應立即更換58檢驗科質量管理體系文件（4）不得在實驗室內設值班床，嚴禁在實驗室內住宿。6. 實驗中足部防護的一般要求在工作區(qū)內，應穿舒適、防滑、并能保護整個腳面的鞋。在有可能發(fā)生液體濺溢的工作崗位，可加套一次性防滲漏鞋套。帆布鞋可吸收化學物品和有傳染性的液體，所以最好穿皮革或其它防滲漏的合成材料的鞋。7. 實驗中頭發(fā)和飾物的風險評估及防護留長發(fā)的工作人員應將頭發(fā)盤在腦后，以防止頭發(fā)接觸到被污染物和避免人體脫屑落入工作區(qū)。頭發(fā)不得垂肩，應與離心機、切片機等正在運轉的器械保持一定距離8. 實驗中胡須的風險評估及防護蓄有胡須的男性工作人員必須遵守上項（7）的規(guī)定。實驗室工作人員在脫下手套后、離開實驗室前、接觸患者前后、以及在進食或吸煙前都應該洗手。接觸血液、體液或其它污染物時，應立即洗手。用口液移可導致多種病原體的實驗室感染。所有實驗室操作禁止用口液移，應使用助吸器具。謹慎處理針頭、解剖刀、和碎玻璃等銳利物品。使用后的針具不要折斷、彎曲、破損、重復使用或用手重裝在針管上。一次性注射器上的針頭用后不要取下。銳利物品應立即放置在專用銳器盒內，在完全裝滿之前或48小時之內更換。接觸患者時，實驗室工作人員應遵守醫(yī)院的隔離措施。（1）“清潔”區(qū)和“非清潔”區(qū)根據(jù)實驗室的具體工作情況由主任選擇并確定“清潔”和“非清潔”工作區(qū)，在清潔區(qū)和非清潔區(qū)之間設“緩沖室”。被指定為“清潔”的區(qū)域，則應努力保持清潔，如采取預防措施，防止電話、視頻顯示器終端、鍵盤、門柄及其它經(jīng)常被手或手上的手套觸摸的物品的污染，要求工作人員在觸摸設備（如計算機鍵盤及電話的保護罩等）前取下手套，制定儀器設備和工作面的常規(guī)消毒和清潔制度和對嚴重污染的緊急處理措施辦法。被指定為“非清潔”的區(qū)域，允許戴手套接觸所有物品（如電話、門柄、計算機終端和其它物品），所有這些物品的表面都認為是不清潔的。未戴手套的人員如果使用該區(qū)域內的電話、計算機終端或其它設備，應該戴上手套，或在使用后立即徹底洗手?！扒鍧崱焙汀胺乔鍧崱眳^(qū)都應保持整潔。實驗臺至少應每天清潔、消毒一次，如有必要可以多次清洗、消毒。在處理濺溢的樣品或嚴重污染的工作面時，應戴上手套和其它個人防護裝備、使用相應合適的清潔劑清除所有的濺溢物。（2）冰箱、冷凍柜、水浴和離心機應該定期清洗和消毒（時間由實驗室主任來決定），在發(fā)生嚴重污染后應立即進行清洗和消毒。進行清洗、消毒時要戴上手套，穿上工作服或其它合適的防護服。（3）外衣：外衣（實驗服、工作服、和圍裙）應懸掛在遠離散熱器、蒸汽管道、供暖裝檢驗科質量管理體系文件置、以及有明火的地方，不要掛在壓縮氣瓶或滅火器上，也不要掛在門的玻璃隔板上，妨礙視線?！扒鍧崱钡暮汀胺乔鍧崱钡膫€人防護服要分開存放。（4）垃圾處理：每天至少清理垃圾一次。（5）裝飾：不得在電燈、燈座或儀器上進行裝飾，更不要使用電子裝飾物、蠟燭、圣誕樹等有引起火災危險的裝飾品。（6）為便于清潔消毒，實驗室內不應有織物裝飾的用具或椅子。（7）個人物品：實驗工作區(qū)不得存放個人物品，如錢包、外套、皮靴、咖啡杯、運動服、預包裝的食品和藥品等。（8）實驗室內應配備應急設備，如應急洗眼裝置，酒精等消毒用品。（9）實驗室應安裝非手觸式洗手裝置。（10）實驗室內應安裝防蚊蠅裝置，應定期投撒滅蟑螂、老鼠的藥物。（11）用后的廢棄物品：實驗工作區(qū)內的用后廢棄物品存量不要太大。具危險性的液體如酸或堿性液體應放在視平線以下。較大的廢棄物容器應靠近地面存放。（12）出口通路：實驗室的出口和通道必須保持暢通無阻，不準堆放物品、垃圾、裝置、或設備。安全門必須保持暢通，不得堵塞。注意：無論任何時間、何種原因都不得阻塞通往滅火器、火警箱、防火毯、安全淋浴或出口的道路。操作玻璃器具時應遵循下述安全規(guī)則：（1）不使用破裂或有缺口的玻璃器具。（2）不要用猛力取下玻璃試管上的塞子，粘緊的試管可用刀切開分離。（3）接觸過傳染性物的玻璃器具，清洗之前，應先行消毒。（4）破裂的玻璃器具和玻璃碎片應丟棄在有專門標記的、單獨的、不易刺破的容器里。（5）高熱操作玻璃器具時應戴隔熱手套。（6）在不影響實驗質量的前提下，應盡量減少使用玻璃器具。15. 使用離心機的危害評估及防護感染途徑危害評估感染途徑危害評估感染途徑危害評估皮膚極少粘膜（眼結膜）可能呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）極少經(jīng)血（針刺傷、切割傷）極少經(jīng)血（蟲媒介）極少（1）氣溶膠：離心過程中應控制氣溶膠的產(chǎn)生在最低水平。（2）操作：離心機只有在蓋好蓋板后，才能啟動。（3）傳染性物品：所有能夠產(chǎn)生氣溶膠進行播散的生物制品或標本，都應使用密封的離心管，并在蓋緊的離心頭或轉頭中進行。（4）為防止氣溶膠飛溢，應在離心停止30分鐘后打開離心物。（5）清洗：按照消毒隔離制度要求清洗離心機。（6）平衡：離心時應保持合適的平衡，以保證離心的順利進行。檢驗科質量管理體系文件16．采集血樣的危害評估及防護感染途徑危害評估感染途徑危害評估感染途徑危害評估皮膚極少粘膜（眼結膜）極少呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）極少經(jīng)血（針刺傷、切割傷）可能經(jīng)血（蟲媒介）極少盜竊可能化學腐蝕極少放射無（1）每天早晨用500mg/L的”84”消毒液擦拭抽血臺面及其它物表，并開紫外燈消毒至少30分鐘，并做好記錄。（2）工人每天早晨更換消毒液，包括浸泡銳器、止血帶的消毒液和手消毒液。（3）工作人員必須穿工作服，戴好口罩、帽子、和手套。（4）使用合格的一次性用品。嚴禁使用包裝破損，超過有效期的一次性用品。（5）嚴格執(zhí)行無菌技術操作規(guī)程、靜脈采血必須一人一針一管一巾一帶。微量采血應做到一人一針一管一片，對每位病人操作前洗手或手消毒。（6）無菌物品如棉球需每天更換，開啟后使用不得超過24小時。（7）工作人員需對銳器如采血針采取高度預防措施，用過的采血針需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中。17. 標本(血清、血漿、全血、尿)上檢驗分析儀檢測過程的危害評估及防護感染途徑危害評估感染途徑危害評估感染途徑危害評估皮膚極少粘膜（眼結膜）可能呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）極少經(jīng)血（針刺傷、切割傷）極少經(jīng)血（蟲媒介）極少盜竊可能化學腐蝕無放射無（1）為了避免液滴和氣溶膠和擴散，實驗室儀器加樣、加液，清洗等過程應在封閉罩內進行的。（2）實驗中使后的比色盤，反應杯等廢棄物應當收集在封閉的容器內，集中處置。（3）在每一步完成后應根據(jù)操作指南對對儀器進行消毒。血液、體液污染物表時，應立即消毒。（4）工作人員要戴手套進行操作。18. 標本(血清、血漿、全血、尿、糞)手工檢測過程的危害評估及防護感染途徑危害評估感染途徑危害評估感染途徑危害評估皮膚可能粘膜（眼結膜）可能呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）可能經(jīng)血（針刺傷、切割傷）可能經(jīng)血（蟲媒介）極少盜竊可能化學腐蝕可能放射無（1）每天早晨做好實驗室的清潔消毒工作。（2）工作人員要戴口罩、手套進行操作。（3）實驗中使用的竹簽用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。（4）廢棄的標本連同試管、蓋帽要用1000mg /L“84”消毒液浸泡，由工人統(tǒng)一清潔后進行無害化處理。（5）實驗中使用的吸頭、一次性塑料杯用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。（6）標本污染物表時，應立即消毒。（7）離心時，發(fā)生試管破裂或標本濺出，由操作者負責用有效消毒劑對離心機內部進行及時消毒處置。19．微生物分離鑒定藥敏試驗及基因擴增試驗活動的危害評估及防護感染途徑危害評估感染途徑危害評估感染途徑危害評估皮膚可能粘膜（眼結膜）可能呼吸道可能消化道（經(jīng)手口）可能經(jīng)血（針刺傷、切割傷）可能經(jīng)血（蟲媒介）可能盜竊可能化學腐蝕極少放射無（1）每天早晨開紫外燈消毒空氣至少30分鐘，同時做好各物表、儀器的清潔消毒工作。（2）實驗人員要戴手套、帽子進行操作。當估計會出現(xiàn)微生物和危險物濺出時要戴好眼罩或面罩。（3）操作中使用的接種環(huán)、鑷子等金屬物品要在酒精燈火焰上燒灼滅菌。（4）可能產(chǎn)生致病性微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作如涂片、接種時，應在生物安全柜內操作，并使用個體防護設備。（5）實驗室內的各種標本、菌種、培養(yǎng)基和其它廢棄物在運出實驗室前必須滅活（高壓、浸泡），需運出實驗室滅活的物品必須放在專用的密閉容器中。（6）操作過程中發(fā)生菌種污染物表時，應馬上采取措施進行物表消毒。（7）當發(fā)生致病性微生物氣溶膠污染時，應馬上進行人員疏散，通知負責人到現(xiàn)場進行指導消毒。（8）對菌種的保存應嚴格遵守菌種保存制度，嚴禁擅自保存各種國家法定傳染病菌株或毒株。（9）實驗人員離開實驗室前要去除手套，確認無污染或污染已排除，后方可洗手離去。（10）微生物、PCR實驗室要設置紗窗、擋鼠板。三、特定實驗活動危害評估（見以下章節(jié)之各種病原體的危害評估） 工作人員素質 本實驗室共有技術人員20名，其中申請進入BSL2實驗室20名。學士學位3名，3名曾經(jīng)從事微生物學實驗，3名曾經(jīng)從事無菌實驗室活動經(jīng)歷，5名技術人員學習過生物安全手冊并通過定期培訓及考核成績合格，經(jīng)體檢無現(xiàn)患嚴重疾病，本實驗室除HBV攜帶者1名無其他患傳染性疾病的技術人員，健康狀態(tài)良好。五、評估結論本次評估本實驗室共19項可能潛在危險的實驗活動，在實驗操作實驗施過程中在無控制措施情況下可能產(chǎn)生的高危害度5項，中度14項，低度0項；對危害發(fā)生的可能性分析，實驗危害較大可能發(fā)生的有0項，可能發(fā)生5項，較少可能發(fā)生14項；這些危害造成高度嚴重后果的5項，后果嚴重性中度的14項，后果嚴重性低度的0項。根據(jù)擬采取的預防控制措施后依然存在的殘留風險為高度0項，中度0項，低度危害19項。評 估：瑞昌市人民