【正文】 第四章 食用菌菌種的制備 第一節(jié) 菌種生產(chǎn)流程及設(shè)備 一、菌種生產(chǎn)流程 （一）、菌種類(lèi)型 根據(jù)菌種來(lái)源和生產(chǎn)目的，通常將菌種分為母種、原種、栽培種三級(jí)。 母種 ? 是指首次從大自然分離得到的純菌絲體，它是生產(chǎn)其它菌種類(lèi)型的原始種，俗稱一級(jí)種，因其在試管里培養(yǎng)而成，也稱試管種。擴(kuò)大繁殖后，叫再生母種。 原種 ? 來(lái)自一級(jí)種的擴(kuò)大培養(yǎng)，是母種和栽培種之間的過(guò)渡種，也稱二級(jí)種。 栽培種 ? 是由原種擴(kuò)接而繁殖得出的種，直接用于生產(chǎn)栽培上，也稱為三級(jí)種。 （二）菌種生產(chǎn)流程 各級(jí)菌種生產(chǎn)，使用基質(zhì)不一，生產(chǎn)工藝流程有別，大致如下： 分離 ↓ 母種培養(yǎng)基制備 →滅菌 →接種 →培養(yǎng) →篩選提純 →母種 →保存 ↓ 擴(kuò)繁 ↓ 原種培養(yǎng)基制備 →滅菌 →接種 →培養(yǎng) →原種 ↓ ↓▔▔▔▔▔▔▔▔ 栽培種培養(yǎng)基制備 →滅菌 →接種 →培養(yǎng) →栽培用種 二、常用設(shè)備儀器和藥品 （一）設(shè)備 食用菌菌種生產(chǎn)流程應(yīng)呈流水作業(yè)，菌種廠應(yīng)有配料室、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、貯藏室等。 配料室 要求地面平整光滑，有水電，并配備下列用具、物品： （ 1）拌料機(jī)或拌料槽及拌料、配料工具； ? （ 2）衡器 磅稱、工業(yè)天平、量杯等； ? （ 3）分裝操作臺(tái)（臺(tái)高 80cm左右）及分裝工具（裝瓶機(jī)、裝袋機(jī)；如人工裝瓶，需有壓板，打孔棒等。） ? 滅菌室 應(yīng)有滅菌設(shè)備，這里專(zhuān)指用于培養(yǎng)基和其他物品消毒滅菌的滅菌鍋。 （ 1）高壓蒸汽滅菌鍋； （ 2）常壓蒸汽滅菌鍋。 ? 接種設(shè)備 是指分離和擴(kuò)大轉(zhuǎn)接各級(jí)菌種的專(zhuān)用設(shè)備： （ 1）接種室（無(wú)菌室）： 10平方米左右的小套間，拉門(mén)，安裝紫外燈，內(nèi)放超凈工作臺(tái)、接種箱等； （ 2）接種箱； （ 3）接種工具：是指分離和移接菌種的專(zhuān)用工具，樣式很多，一般用不銹鋼制成，主要有接種鏟、接種針、接種鉤、接種耙、接種槍等。 ? 培養(yǎng)設(shè)備 恒溫培養(yǎng)箱、恒溫培養(yǎng)室、恒溫振蕩培養(yǎng)箱等。 （二）儀器和藥品 ? 儀器： 顯微鏡、干濕溫度計(jì)、電熱干燥箱等。 ? 藥品： 乙醇（ 70%75%）、石碳酸（ 5%）、來(lái)蘇爾（ 2%）、新潔爾滅（ %）、 升汞（ %）、高錳酸鉀、甲醛、硫磺等。 第二節(jié) 培養(yǎng)基的制備 ? 培養(yǎng)基：人工配制供給食用菌生長(zhǎng)發(fā)育或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，稱為培養(yǎng)基或培養(yǎng)料、培養(yǎng)底物。 ? 培養(yǎng)基必須具備三個(gè)條件：第一、含有食用菌生長(zhǎng)所需要的物質(zhì)，如水分、養(yǎng)分和適宜的酸堿度。第二、具有一定的生長(zhǎng)反應(yīng)。第三、經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌，保持無(wú)菌狀態(tài)。 一、培養(yǎng)基的類(lèi)型 ? 按營(yíng)養(yǎng)來(lái)源 按培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，可將培養(yǎng)基分為： ? （ 1）天然培養(yǎng)基 ； ? （ 2）合成培養(yǎng)基 ； ? （ 3）半合成培養(yǎng)基 。 按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可將培養(yǎng)基分為： ? （ 1）液體培養(yǎng)基 ； ? （ 2）固體培養(yǎng)基 ； ? （ 3）半固體培養(yǎng)基 。 二、母種培養(yǎng)基的制備 ? 母種培養(yǎng)基多用試管作為容器，所以又叫試管斜面培養(yǎng)基，常用于菌種分離、純化、擴(kuò)大、轉(zhuǎn)管和菌種保藏。 ? 常用配方 ? （ 1）馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（ PDA培養(yǎng)基） 馬鈴薯（去皮） 200克，葡萄糖 20克，瓊脂 18～ 20克，水1000毫升。 ? （ 2）馬鈴薯綜合培養(yǎng)基 馬鈴薯（去皮） 200克，葡萄糖 20克，磷酸二氫鉀 3克，硫酸鎂 ，維生素 B1 10毫克，瓊脂 20克，水 1000毫升。 ? 以上兩個(gè)配方適用于培養(yǎng)各種食用菌。 ? （ 3）完全培養(yǎng)基 蛋白胨 2克，葡萄糖 20克，磷酸二氫鉀 ，磷酸氫二鉀 1克，硫酸鎂 ，瓊脂 15克，水 1000毫升。此配方是培養(yǎng)食用菌較常用的合成培養(yǎng)基，有緩沖作用，適用于保藏菌種。 ? （ 4）木屑浸出汁培養(yǎng)基 木屑 500克，瓊脂 20克，細(xì)米糠 100克，硫酸銨 1克，葡萄糖（或蔗糖） 20克，水 1000毫升。此配方適用于木腐菌類(lèi)的菌種分離與培養(yǎng)。 ? （ 5）玉米粉蛋白胨葡萄糖培養(yǎng)基 玉米粉 40克，蛋白胨 2克，葡萄糖 20克，瓊脂 17克，水 1000毫升。此配方適用于培養(yǎng)香菇母種。 ? （ 6）黃豆粉瓊脂培養(yǎng)基 黃豆粉 40克（煮汁過(guò)濾），蔗糖 20克，過(guò)磷酸鈣 ，磷酸鎂 ，瓊脂 20克，水 1000毫升。此配方適用于培養(yǎng)木耳母種。 ? （ 7）棉籽殼汁培養(yǎng)基 新棉籽殼 250克（煮汁過(guò)濾），葡萄糖 20克，瓊脂 20克，水 1000毫升。此配方適用于培養(yǎng)猴頭、黑木耳母種。 ? （ 8）糯米粉糖瓊脂培養(yǎng)基 糯米粉 50克，葡萄糖 15克，蔗糖 15 克，瓊脂 20克，水1000毫升。此配方適用于培養(yǎng)靈芝，能供菌絲生長(zhǎng)，延緩老化結(jié)皮。 ? （ 9）改進(jìn) PDA培養(yǎng)基 馬鈴薯（去皮） 200克，葡萄糖 20克，石膏粉 1克，瓊脂20克，蘑菇堆料 100～ 150 克（煎汁），水 1000毫升。此配方適用于培養(yǎng)雙孢蘑菇。 制作方法 ? 母種培養(yǎng)基種類(lèi)很多，但制作方法基本相同。其操作步驟如下： ? 第一步：稱量溶化、取汁和補(bǔ)水。 （ 1）對(duì)易溶物質(zhì)，按配方稱取后置于燒杯中，加入其量 1/3～ 1/4的水，攪成糊狀；對(duì)難溶物質(zhì)，按配方稱取適量水后，加熱不斷攪拌，促其溶解； （ 2）對(duì)去皮切塊的馬鈴薯、黃豆芽、菇類(lèi)子實(shí)體等，按配方稱后置容器中，加清水 500～ 1000毫升（料水比 1： 5）。文火煮沸 25分鐘左右，用 4層紗布過(guò)濾取汁； （ 3）玉米粉加 1000毫升清水，加熱到 70℃ 左右，保持 1小時(shí)，用 4層紗布過(guò)濾取汁； ?（ 4）對(duì)木屑浸出汁所用的去心、帶皮木材，切成薄片，加水 700毫升，煮沸 20分，用 4層紗布過(guò)濾取汁，所用之米糠加入 80℃ 溫水 300毫升，浸泡 30分，用 4層紗布過(guò)濾取汁，然后將兩汁混合。最后均要補(bǔ)