檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(已修改)
2025-01-27 18:28 本頁面
【正文】 第一單元 細胞及其分子組成 第 三 講 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質 一、還原糖的檢測 二、脂肪的檢測 1 ． 實驗原理 脂肪＋蘇丹 Ⅲ ( 或蘇丹 Ⅳ ) 染液 ― → 橘黃色 ( 或紅色 ) 2 ． 方法步驟 ( 1) 方法一：花生種子勻漿＋ 3 滴蘇丹 Ⅲ 染液 → 橘黃色 。 ( 2) 方法二： 結論：花生種子的子葉有脂肪存在。 三、蛋白質的檢測 1 ． 斐林試劑與雙縮脲試劑比較 具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2＋ 反應生成絡合物 含醛基的可溶性還原糖將 Cu(OH)2還原為 Cu2O沉淀 反應原理 g/mL CuSO4溶液 g/mL NaOH溶液 g/mL CuSO4溶液 g/mL NaOH溶液 B液 A液 乙液 甲液 成分 雙縮脲試劑 斐林試劑 比較項目 都含有 NaOH、 CuSO4兩種成分，且所用NaOH溶液濃度都是 g/mL 相同點 樣液變紫色 樣液淺藍色 → 棕色 →磚紅色 反應現(xiàn)象 不需加熱 50～ 65℃ 水浴加熱 反應條件 先加入 A液 2 mL搖勻，再加 3～ 4滴 B液搖勻 甲、乙兩液等量混勻后立即使用 添加順序 雙縮脲試劑 斐林試劑 比較項目 2 ． 注意事項 ( 1) 三個實驗中都不宜選取有顏色的材料，否則會干擾實驗結果的顏色變化。 ( 2) 脂肪鑒定的過程中滴加 1 ～ 2 滴體積分數(shù)為 5 0% 的酒精的目的是洗去浮色，原因是蘇丹 Ⅲ 或蘇丹 Ⅳ 染液易溶于酒精。 ( 3) 蛋白質鑒定中，若用大豆作材料，必須提前浸泡；若用蛋清作材料，必須稀釋，防止其黏在試管上不易刷洗；且該實驗應預留部分組織樣液作對比。 ( 4) 物質鑒定實驗一般不設立對照實驗，若需設立對照實驗，對照組應加入成分已知的物質，如驗證唾液淀粉酶是蛋白質，對照組可加入稀釋的雞蛋清。 [ 易誤提醒 ] ? 1 ? 易忽略斐林試劑本身的顏色。 非還原糖 ? 如蔗糖 ? ＋斐林試劑水浴加熱后的現(xiàn)象不是無色而是淺藍色 [Cu ? OH ? 2 的顏色 ] 。 ? 2 ? 易混淆雙縮脲試劑和斐林試劑的使用。 混合后加入 —— 斐林試劑，且現(xiàn)配現(xiàn)用；分別加入 —— 雙縮脲試劑 ? 先加 A 液，后加 B 液，且 B 液不能過量 ? 。 ? 3 ? 易寫錯 “ 斐 ” 和 “ 脲字 ” 。 “ 斐林試劑 ” 中的 “ 斐 ” 不可錯寫成 “ 非 ” ，雙縮脲試劑中“ 脲 ” 不可錯寫成 “ 尿 ” 。 ? 4 ? 誤認為脂肪的鑒定必須使用顯微鏡。 若要觀察被染色的脂肪顆粒，則使用顯微鏡，但若要通過溶液顏色變化，則不必使用顯微鏡。 化學物質的檢測方法 常用的試劑或 指示物 作 用 現(xiàn) 象 碘 液 檢測、鑒定淀粉 淀粉遇碘變藍 斐林試劑 檢測、鑒定還原糖 磚紅色沉淀 雙縮脲試劑 檢測、鑒定蛋白質 紫色 蘇丹 Ⅲ/Ⅳ 染液 檢測、鑒定脂肪 橘黃色 /紅色 二苯胺 檢測、鑒定 DNA 藍色 龍膽紫溶液或醋酸洋紅液 檢測染色體 深紫色 /紅色 無水乙醇、層析液 葉綠體中色素的提取和分離 出現(xiàn)四條色素帶 健那綠染液 線粒體 藍綠色 常用的試劑或 指示物 作 用 現(xiàn) 象 余燼木條 檢測、鑒定 O2 O2使余燼木條 復燃 Ca(OH)2溶液 檢測、鑒定 CO
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