微生物的利用和生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用(已修改)
2025-01-25 23:49 本頁(yè)面
【正文】 第一講 微生物的利用和生物技術(shù) 在食品加工中的應(yīng)用 專(zhuān)題八 生物技術(shù)實(shí)踐 選修部分 題組 1 微生物利用 1． (2022安徽理綜， 6)下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘 述，其中錯(cuò)誤的是 ( ) A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取 10 10 106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各 mL，分別涂布于 各組平板上 C．將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置， 37℃ 恒溫培養(yǎng) 24～ 48小時(shí) D．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在 300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 解析： 檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取 10 10 106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各 mL，分別涂布于各組平板上，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置， 37℃ 恒 溫培養(yǎng) 24～ 48小時(shí)，在確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在 30～ 300的一 組平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)。 答案： D 2． (2022寧夏理綜， 40)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件 外，還要考慮 ________、 ________和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具 有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、 ________、 __________ 等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng) 器皿進(jìn)行 ________(消毒、滅菌 )；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和 ____； 靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅，其原因是紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變 性，還能 _________________。 (3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì) 值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品 稀釋的 ____________。 溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短 滅菌 消毒 損傷 DNA的結(jié)構(gòu) 比例合適 (4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì) 菌進(jìn)行初步的 ___________________。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培 養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_______________________________________________________________ ______________________。 (6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò) ________ 處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 鑒定 (或分類(lèi) ) 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀(guān)察培養(yǎng)基上是 否有菌落產(chǎn)生 滅菌 解析： (1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易培 養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫 度、酸堿度和滲透壓等條件。 (2)滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基 和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒是用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表 面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消 毒，紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷 DNA的結(jié)構(gòu)。 (3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪? 的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋 的比例適合。 (4)對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn) 行初步的鑒定。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體 培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適 宜的時(shí)間，觀(guān)察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。 (6)因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸道出現(xiàn)嚴(yán) 重癥狀，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄， 以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。 3． (2022山東理綜， 34)生物柴油是一種可再生的清潔能源，其應(yīng)用在一 定程度上能夠減緩人類(lèi)對(duì)化石燃料的消耗?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物 M 產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油 (如下圖 )。 (1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用 ________、 ________方 法從油料作物中提取。 (2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物 M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生 長(zhǎng)提供 ________，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是 ________________法。 (3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用 ______________法直接計(jì)數(shù)；從微 生物 M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè) ____________________，以確定 其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用 ____________________ ________技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。 (4)若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱 DNA聚合酶催化的 _____________ ________________________________技術(shù)。 壓榨 萃取 碳源 高壓蒸汽滅菌 顯微鏡直接計(jì)數(shù) 酶活性 (或：酶活力 ) 固定化酶 (或：固定化 細(xì)胞 ) PCR(或：多 聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ) 解析： (1)因?yàn)橹参镉筒灰讚]發(fā)，不能選用蒸餾法，可以用壓榨法、萃 取法從油料作物中提取。 (2)微生物的生長(zhǎng)需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī) 鹽等，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供碳源。分析灼燒滅 菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的特點(diǎn)可知，培養(yǎng) 基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。 (3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物的 數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)。提取的脂肪酶在應(yīng)用于實(shí)驗(yàn) 生產(chǎn)之前，要先
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