【正文】 血細(xì)胞形態(tài)學(xué) 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院 李 睿 血細(xì)胞形態(tài)學(xué) 李 睿 血液和骨髓瑞氏染色形態(tài)學(xué)檢查法 通過分析血液和骨髓中有核細(xì)胞 數(shù)量 、相對(duì)構(gòu)成比、形態(tài)特征改變 ，了解骨髓造血功能狀態(tài)和異常改變的形態(tài)學(xué)檢查方法 。 形態(tài)學(xué)檢查方法的價(jià)值 發(fā)現(xiàn)血細(xì)胞構(gòu)成和形態(tài)異常 了解骨髓造血功能狀態(tài) 對(duì)血液病提供確診依據(jù)或提供重要線索 是各種血液病形態(tài)學(xué)檢查的基礎(chǔ) 形態(tài)學(xué)檢查方法的局限性 不能了解骨髓結(jié)構(gòu) 不能了解細(xì)胞分子生物學(xué)特性和功能 骨髓血細(xì)胞檢查適應(yīng)癥 患者多次檢查外周血有異常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴結(jié)腫大 查明感染的原因 查明惡性腫瘤有無轉(zhuǎn)移 助診類脂質(zhì)沉積病 對(duì)血液病進(jìn)行鑒別診斷和療效觀察 骨髓血細(xì)胞檢查禁忌癥 凝血因子嚴(yán)重缺乏的出血性疾病，如血友病。 穿刺部位有炎癥或畸形 晚期妊娠的婦女做髂骨穿刺要謹(jǐn)慎 內(nèi) 容 第一部分 標(biāo)本制作 第二部分 單個(gè)血細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn) 第三部分 骨髓和外周血有核細(xì)胞構(gòu)成比 第四部分 骨髓報(bào)告書寫格式和骨髓申請(qǐng)單 第一部分 標(biāo) 本 制 作 （一） 血液和骨髓標(biāo)本的來源 部位： 一般在髂前上棘或髂后上棘穿刺， 必要時(shí)行胸骨穿刺，兒童還可以選擇 脛骨。 骨髓穿刺成功的標(biāo)志： 抽吸骨髓時(shí)患者感銳痛，骨髓液外觀 紅色粘稠性、有骨髓小粒、油滴。顯 微鏡下見有骨髓成分（如幼紅細(xì)胞、 幼粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞、網(wǎng)狀 細(xì)胞等） （二）血液和骨髓標(biāo)本制作 見幻燈 （三）血液和骨髓標(biāo)本瑞氏染色 選擇標(biāo)本 ：選取長短厚薄適宜的涂片 （骨髓 2張、血片 2 張）進(jìn)行瑞氏染色。 染色原理 ：瑞氏染液含美藍(lán)和伊紅兩種成 分， 美藍(lán)偏堿性 ，與細(xì)胞內(nèi)酸性 物質(zhì)有親和力（ 胞 漿 ），染成 藍(lán)色 ； 伊 紅偏酸性 ，與細(xì)胞內(nèi)堿性物質(zhì)有親和力 （ 胞核 ），染成 紫紅色 濃度 ： 瑞氏染液：緩沖液＝ 1： 2，時(shí)間 1小時(shí) （根據(jù)細(xì)胞數(shù)，室溫調(diào)整 ） 偏酸 合適 偏堿 （ 左）中間為長短合適標(biāo)本 （右）骨髓外觀，骨髓小粒 （四）觀察部位的選擇 五 光學(xué)顯微鏡使用 顯微鏡使用注意事項(xiàng) 低倍鏡（ 10倍）： 判斷取材、涂片、染色是否滿意，小粒、油滴分級(jí)；骨髓增生程度；估計(jì)小粒造血細(xì)胞面積；計(jì)數(shù)全片巨核細(xì)胞數(shù)目；尋找瘤細(xì)胞團(tuán)。 油鏡下（ 100倍）： 觀察單個(gè)血細(xì)胞形態(tài)。 第二部分 正常血細(xì)胞形態(tài) （ 一） 骨髓血細(xì)胞分化 正常情況下 ， 在造血干細(xì)胞分化 、 發(fā)育 、成熟的整個(gè)演變過程中 ， 存在一定的規(guī)律性 。 造血干細(xì)胞逐級(jí)分化形成各系列 、 各階段的骨髓血細(xì)胞 ， 造血干 、 祖細(xì)胞在形態(tài)上無法鑒別 ， 只有分化發(fā)育為各系列原始 、 幼稚細(xì)胞后 ， 其形態(tài)學(xué)特征才較明顯 ，才能辨認(rèn) 。 血細(xì)胞分化模式（ 供參考 ） 11 血細(xì)胞成熟過程規(guī)律 胞體 ：大 — 小 （ 巨核 小 — 大 ） 胞漿 ：細(xì)胞越幼稚 ， 染色越深；細(xì)胞越成熟 ， 染色 越淺淡 ， 以胞漿染色判斷有核紅細(xì)胞 、 粒細(xì) 胞 、 巨核細(xì)胞成熟度 。 胞漿 染色 ：深藍(lán) （ 原始 ） 藍(lán)色 （ 早幼 ） 淺藍(lán) （ 中幼 ） 粉色 顆粒 變化：由無顆粒 （ 原始 ） 噬天青顆粒 （ 早 幼 ） 特異性顆粒 （ 中性粒 、 嗜酸粒 、 嗜堿 粒 ） 。 胞漿 量 ： 有少 多 胞核 ： 體積：有大 小 ， 成熟紅細(xì)胞無核 染色質(zhì)：細(xì)致疏松 粗糙緊密快狀 核膜：不顯著 顯著 核仁：清楚 不清 消失 胞核與胞漿體積之比 ： 大 小 細(xì)胞發(fā)育成熟過程：由原始 早幼 中幼 晚幼 成熟細(xì)胞 以紅細(xì)胞系統(tǒng)的成熟過程為例 12 單個(gè)血細(xì)胞觀察順序 1. 細(xì)胞大小、形狀 2. 胞漿量多少、顏色、顆粒、 3. 細(xì)胞核形狀、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)（粗細(xì)、凝聚） 4. 核仁數(shù)目、大小。 5. 核、漿比例。 （二）：各系列各階段細(xì)胞形態(tài) 紅細(xì)胞系統(tǒng)： 臨床四階段劃分 （ 原始 紅 ， 早幼紅 ， 中幼紅 ， 晚 幼紅 ） （ 有些學(xué)者提出 六 階段劃 分：原始紅 ， 早幼 紅 ， 中幼紅 I,II， 晚幼紅 I,II） 細(xì)胞的分化成熟本身是一個(gè) 連續(xù) 的過程 ， 只是被人為地進(jìn)行了定義分類而已 。 紅細(xì)胞系統(tǒng)占骨髓有核細(xì)胞 15－ 25％ 原始紅細(xì)胞 細(xì)胞圓形或橢圓形 ， 直徑 15— 25μm 胞核圓形或橢圓形 ， 居中 染色質(zhì)粗顆粒網(wǎng)狀 ， 深紫紅色 ， 核仁 2— 3個(gè) ， 胞漿濃 （ 深 ） 藍(lán)色 ， 著色不均 ， 邊緣著色深 ，核周淺染 （ 相當(dāng)于高爾基體部分和線粒體 ） ， 無顆粒 ， 有鈍偽足 。 % IDA骨髓中原始紅（ 明顯核仁及鈍偽足） 早幼紅細(xì)胞 圓形 ， 直徑 1518μm 核圓形 ， 略偏位 ， 染色質(zhì)開始凝聚 ， 核仁消失或不明顯 。 胞漿量增多 ， 藍(lán)色 ， 核周明亮淡染區(qū) ， 無顆粒 。 % 中幼紅細(xì)胞 胞體圓形 ， 直徑 8—18μm 核圓形 ， 居中 ， 或偏位 ， 染色質(zhì)凝聚小塊直至碎墨塊狀 ，核周邊出現(xiàn)透亮的縫隙 。 核 、 漿各占半 ， 漿灰蘭色 ， 淡蘭色 ， 嗜