【正文】 第一章 藥物鑒別 一、藥物鑒別的目的和特點 1．鑒別目的 藥物鑒別依據(jù)藥物的化學結構和理化性質進行某些化學反應，測定某些理化常數(shù)或光譜特征，來判斷藥物及其制劑的真?zhèn)巍?只有在藥物鑒別無誤的情況下，藥物被證實是真的， 才有必要接著進行雜質檢查、有效化學成份含量測定。 在藥物分析中藥物鑒別屬首項工作， 為確保臨床用藥的安全與有效提供科學依據(jù)。 第一節(jié) 常用鑒別方法 （ 1）藥物鑒別是根據(jù)藥物的分子結構、理化性質，采用生物學、化學或物理化學方法來判斷藥物的真?zhèn)巍? 藥典所收載的藥物項下的鑒別試驗方法， 僅適用于貯藏在有標簽容器中的藥物，用以證實是否為其所標示的藥物， 它與分析化學中的定性鑒別有所區(qū)別 。 2．特 點 （ 2） 藥物鑒別不只由一項試驗就能完成 ，而是采用 一組試驗項目 （ 2個或 2個以上 ） 全面評價一個藥物 ， 力求使結論正確無誤 。 （ 3）藥物鑒別通常選用 綜合分析試驗法 ，用化學鑒別法、儀器分析法、生物檢定法等不同方法鑒別同一種供試品，綜合做出判斷。一般每種藥品選用 2～ 4種方法進行鑒別 試驗，相互取長補短。 藥物鑒別采用的方法應是 專屬性強，重現(xiàn)性好，靈敏度高，并且簡單可行、快速 。常用的方法有化學法、紫外吸收光譜法、薄層色譜法、紅外吸收光譜法等多種方法，下面主要介紹幾種常用的鑒別方法。 二、常用鑒別方法 特點： 化學鑒別法 操作簡便、快速、實驗成本低，是藥物鑒別時最常用的方法。 鑒別依據(jù)： 根據(jù)藥物與化學試劑在一定條件下發(fā)生離子反應或官能團反應產(chǎn)生 不同顏色，生成不同沉淀，放出不同氣體，呈現(xiàn)不同熒光， 從而做出定性分析結論。 （一）化學鑒別法 （ 1）干法 干法系指將供試品加適當試劑在規(guī)定的溫度條件下（一般是高溫）進行試驗，觀測此時所發(fā)生的特異現(xiàn)象。 常用的方法有 焰色試驗和加熱分解試驗。 類型： 根據(jù)試驗條件的不同化學鑒別法可分為 干法和濕法 兩種類型。 ? 焰色試驗： 利用 某些元素所具有的特異焰色，可鑒別它們?yōu)槟囊活慃}類藥物。 ? 方法為： 取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，使火焰顯出特殊的顏色。 ? 例如： 鈉為鮮黃色，鉀為紫色。 在臨床使用的青霉素類及頭孢菌素類藥物大多為其鈉鹽或鉀鹽，鑒別時利用鈉、鉀鹽的焰色反應。 ? 加熱分解： 在適當?shù)臏囟葪l件下， 加熱 使供試品分解，生成有 特殊氣味 的氣體。 例如： 舒林酸的加熱分解（取本品約 15mg,置試管中 ,小火加熱數(shù)分鐘），產(chǎn)生刺激性的 二氧化硫氣體 ,并能使?jié)駶櫟牡?淀粉試紙藍色消褪。 （ 2）濕法 濕法系指將供試品和試劑在適當?shù)娜軇┲?，于一定條件下進行反應，發(fā)生易于觀測的化學變化 ，如顏色、沉淀、氣體、熒光等。 ? 呈色反應鑒別法： 系指供試品溶液中加入適當?shù)脑噭┤芤海谝欢l件下進行反應，生成易于觀測的 有色產(chǎn)物。 常用的反應類型有： ① 三氯化鐵呈色反應 —— 酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥； ② 異羥肟酸鐵反應 —— 多為芳酸及其酯類、酰胺類； ③ 茚三酮呈色反應 —— 脂肪氨基； ④ 重氮 偶合顯色反應 —— 芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基； ⑤ 氧化還原顯色反應 及其他顏色反應。 ? 沉淀生成反應鑒別法 常用的反應有： ① 與 重金屬離子 的沉淀反應在一定條件下，藥物和重金屬離子反應，生成不同形式的沉淀； ② 與 硫氰化鉻銨 （雷氏鹽）的沉淀反應多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機堿及其鹽； ③ 其他沉淀反應 。 ? 熒光反應鑒別法： 常用的熒光發(fā)射形式有 ① 藥物本身 可在可見光下發(fā)射熒光； ②藥物 溶液加硫酸 使呈酸性后，可見光下發(fā)射熒光； ③藥物和 溴反應 后，于可見光下發(fā)射出熒光； ④藥物和 間苯二酚反應 后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其他反應后，發(fā)射熒光。 ?氣體生成反應鑒別法 ① 大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強堿處理后，加熱，產(chǎn)生 氨（胺）氣； ②化學結構中含硫的藥物，可經(jīng)強酸處理后，加熱，發(fā)生 硫化氫氣體 ； ③含碘有機藥物經(jīng)直火加熱，可生成 紫色碘蒸氣 ； ④含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生 乙酸乙酯的香味 。 1．紫外 可見分光光度法 紫外 可見分光光度法（ UVVis） 是藥典中常用的一種藥品鑒別方法 ， 如 《 中國藥典 》 （ 2021年版）二部收載的藥物采用此法鑒別的有 546種。鑒別時一般采用 對比法 ，即按規(guī)定的方法配制供試品溶液與對照品溶液，通過對比吸收光譜的特征數(shù)據(jù)、吸收度或吸收系數(shù)、吸收光譜的一致性等進行鑒別。 （二）儀器鑒別法 （ 1）測定最大吸收波長及不同波長的吸收度比值。 例如：丙酸倍氯米松，取本品精密稱定，加乙醇溶解并定量稀釋成濃度為 20?g/ml的溶液，依法測定，在 239nm處有最大吸收，吸收度為 ～ ；在 239nm與 263nm波長處的吸收度比值應為 ～ 。 紫外 可見分光光度法應用時， 主要有以下幾種方式： （ 2）測定吸收系數(shù)。 藥品在一定波長下的吸收系數(shù)，可用于藥品的鑒別。 例如： 甲砜霉素，取本品精密稱定，加水溶解并定量稀釋成濃度為 200?g/ml的溶液，依法測定，在266nm和 276nm處有最大吸收，吸收系數(shù)分別為 25～28和 ～ ；取上述供試品溶液 1ml，加水稀釋成 20ml后，在 224nm處有最大吸收，吸收系數(shù)為370～ 400。 （ 3）對比吸收度或吸收系數(shù)的比值。 取不同吸收峰或吸收谷處的吸收度的比值作為鑒別的依據(jù)。 由于溶液濃度和吸收池厚度均相同，因此用此法可消除濃度和厚度的影響。 例如 :維生素 B12的鑒別， 《 中國藥典 》 （ 2021年版）規(guī)定 361nm處的吸收度與 278nm處的吸收度比值應為～ ， 361nm處的吸收度與 550nm處的吸收度比值應為 ～ 。 （ 4）對比吸收光譜的一致性。 用上述幾種方法鑒別時，無法發(fā)現(xiàn)吸收曲線其他部分的差異。必要時可將濃度相同的試樣與標準品在同一條件下分別掃描其吸收光譜，對比其一致性；也可利用文獻中的標準圖譜對照。如 《 中國獸藥典 》 （ 2021年版）二部連翹中連翹甙的紫外吸收標準圖譜（圖 41），用此標準圖譜來比較吸收光譜的一致性。 圖 41 連翹甙的紫外吸收圖譜 ? 特點： 紅外吸收光譜法（ IR）是一種 專屬性很強、應用廣泛（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。 ? 作用： 主要用于組成單一、結構明確的原料藥鑒別， 特別是 結構復雜、用化學方法不易鑒別的藥物 。 《 中國藥典 》 （ 2021年版）二部中幾乎所有的原料藥都采用本法鑒別，采用此法鑒別的原料藥及其制劑共有 593種。 2．紅外吸收光譜法 ? 鑒別方法： 時采用 標準圖譜對比法， 即在藥典規(guī)定的條件下測定供試品的圖譜，然后與 《 藥品紅外光譜集 》 對照。 對照時一般先看 最強峰 的吸收位置、形狀、數(shù)目等是否一致，然后再檢查 中等強度縫和弱吸收峰是否對應，如果供試品的紅外光吸收圖譜與對照品的圖譜完全一致，一般可認為是同一種化合物。 為了確保鑒別結果準確無誤，藥典 一般不單獨用本法進行鑒別，常與其他理化方法聯(lián)合進行鑒別。 如： 《 中國獸藥典 》 （ 2021年版）一部苯酚鑒別項下規(guī)定：取本品 ，加水 10ml溶解后，照下述方法試驗。 （ 1）取溶液 5ml，加 三氯化鐵試液 1滴，即顯藍紫色。 （ 2）取溶液 5ml， 加溴試液，即生成瞬即溶解的白色沉淀， 但溴試液過量時，即生成持久的沉淀。 （ 3）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（圖 42）一致。 圖 42 苯酚的紅外光吸收譜圖 薄層色譜法 （ TLC） 是將細粉狀的吸附劑或載體涂布于一塊具有光潔表面的玻璃板 、 塑料片或鋁基片上 ， 形成以均勻薄層 （ 厚度～ 1mm） ,待點樣 、 展開后 ， 各組分在薄層上得到彼此分離的方法 ， 也是 目前藥典中收載最多的藥品鑒別方法之一 。 《 中國藥典 》 （ 2021年版 ） 一部中 TLC法用于鑒別的已達 1523項 ， 二部 199項 。 3．薄層色譜法 ? 鑒別原理： 同一種藥物在同樣條件下的薄層色譜行為是相同的 ,依此可以鑒別藥物及其制劑的真?zhèn)?。 ?鑒別時將供試品和對照品按中國藥典規(guī)定 ，用同種溶