【正文】 第一章 藥物鑒別 一、藥物鑒別的目的和特點 1．鑒別目的 藥物鑒別依據(jù)藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進(jìn)行某些化學(xué)反應(yīng)，測定某些理化常數(shù)或光譜特征，來判斷藥物及其制劑的真?zhèn)巍?只有在藥物鑒別無誤的情況下，藥物被證實是真的， 才有必要接著進(jìn)行雜質(zhì)檢查、有效化學(xué)成份含量測定。 在藥物分析中藥物鑒別屬首項工作， 為確保臨床用藥的安全與有效提供科學(xué)依據(jù)。 第一節(jié) 常用鑒別方法 （ 1）藥物鑒別是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用生物學(xué)、化學(xué)或物理化學(xué)方法來判斷藥物的真?zhèn)巍? 藥典所收載的藥物項下的鑒別試驗方法， 僅適用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證實是否為其所標(biāo)示的藥物， 它與分析化學(xué)中的定性鑒別有所區(qū)別 。 2．特 點 （ 2） 藥物鑒別不只由一項試驗就能完成 ，而是采用 一組試驗項目 （ 2個或 2個以上 ） 全面評價一個藥物 ， 力求使結(jié)論正確無誤 。 （ 3）藥物鑒別通常選用 綜合分析試驗法 ，用化學(xué)鑒別法、儀器分析法、生物檢定法等不同方法鑒別同一種供試品，綜合做出判斷。一般每種藥品選用 2～ 4種方法進(jìn)行鑒別 試驗，相互取長補(bǔ)短。 藥物鑒別采用的方法應(yīng)是 專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，靈敏度高，并且簡單可行、快速 。常用的方法有化學(xué)法、紫外吸收光譜法、薄層色譜法、紅外吸收光譜法等多種方法，下面主要介紹幾種常用的鑒別方法。 二、常用鑒別方法 特點： 化學(xué)鑒別法 操作簡便、快速、實驗成本低，是藥物鑒別時最常用的方法。 鑒別依據(jù)： 根據(jù)藥物與化學(xué)試劑在一定條件下發(fā)生離子反應(yīng)或官能團(tuán)反應(yīng)產(chǎn)生 不同顏色，生成不同沉淀，放出不同氣體，呈現(xiàn)不同熒光， 從而做出定性分析結(jié)論。 （一）化學(xué)鑒別法 （ 1）干法 干法系指將供試品加適當(dāng)試劑在規(guī)定的溫度條件下（一般是高溫）進(jìn)行試驗，觀測此時所發(fā)生的特異現(xiàn)象。 常用的方法有 焰色試驗和加熱分解試驗。 類型： 根據(jù)試驗條件的不同化學(xué)鑒別法可分為 干法和濕法 兩種類型。 ? 焰色試驗： 利用 某些元素所具有的特異焰色，可鑒別它們?yōu)槟囊活慃}類藥物。 ? 方法為： 取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，使火焰顯出特殊的顏色。 ? 例如： 鈉為鮮黃色，鉀為紫色。 在臨床使用的青霉素類及頭孢菌素類藥物大多為其鈉鹽或鉀鹽，鑒別時利用鈉、鉀鹽的焰色反應(yīng)。 ? 加熱分解： 在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下， 加熱 使供試品分解，生成有 特殊氣味 的氣體。 例如： 舒林酸的加熱分解（取本品約 15mg,置試管中 ,小火加熱數(shù)分鐘），產(chǎn)生刺激性的 二氧化硫氣體 ,并能使?jié)駶櫟牡?淀粉試紙藍(lán)色消褪。 （ 2）濕法 濕法系指將供試品和試劑在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，于一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，發(fā)生易于觀測的化學(xué)變化 ，如顏色、沉淀、氣體、熒光等。 ? 呈色反應(yīng)鑒別法： 系指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤海谝欢l件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測的 有色產(chǎn)物。 常用的反應(yīng)類型有： ① 三氯化鐵呈色反應(yīng) —— 酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥； ② 異羥肟酸鐵反應(yīng) —— 多為芳酸及其酯類、酰胺類； ③ 茚三酮呈色反應(yīng) —— 脂肪氨基； ④ 重氮 偶合顯色反應(yīng) —— 芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基； ⑤ 氧化還原顯色反應(yīng) 及其他顏色反應(yīng)。 ? 沉淀生成反應(yīng)鑒別法 常用的反應(yīng)有： ① 與 重金屬離子 的沉淀反應(yīng)在一定條件下，藥物和重金屬離子反應(yīng)，生成不同形式的沉淀； ② 與 硫氰化鉻銨 （雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽； ③ 其他沉淀反應(yīng) 。 ? 熒光反應(yīng)鑒別法： 常用的熒光發(fā)射形式有 ① 藥物本身 可在可見光下發(fā)射熒光； ②藥物 溶液加硫酸 使呈酸性后，可見光下發(fā)射熒光； ③藥物和 溴反應(yīng) 后，于可見光下發(fā)射出熒光； ④藥物和 間苯二酚反應(yīng) 后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其他反應(yīng)后，發(fā)射熒光。 ?氣體生成反應(yīng)鑒別法 ① 大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生 氨（胺）氣； ②化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生 硫化氫氣體 ； ③含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成 紫色碘蒸氣 ； ④含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生 乙酸乙酯的香味 。 1．紫外 可見分光光度法 紫外 可見分光光度法（ UVVis） 是藥典中常用的一種藥品鑒別方法 ， 如 《 中國藥典 》 （ 2021年版）二部收載的藥物采用此法鑒別的有 546種。鑒別時一般采用 對比法 ，即按規(guī)定的方法配制供試品溶液與對照品溶液，通過對比吸收光譜的特征數(shù)據(jù)、吸收度或吸收系數(shù)、吸收光譜的一致性等進(jìn)行鑒別。 （二）儀器鑒別法 （ 1）測定最大吸收波長及不同波長的吸收度比值。 例如：丙酸倍氯米松，取本品精密稱定，加乙醇溶解并定量稀釋成濃度為 20?g/ml的溶液，依法測定，在 239nm處有最大吸收，吸收度為 ～ ；在 239nm與 263nm波長處的吸收度比值應(yīng)為 ～ 。 紫外 可見分光光度法應(yīng)用時， 主要有以下幾種方式： （ 2）測定吸收系數(shù)。 藥品在一定波長下的吸收系數(shù)，可用于藥品的鑒別。 例如： 甲砜霉素，取本品精密稱定，加水溶解并定量稀釋成濃度為 200?g/ml的溶液，依法測定，在266nm和 276nm處有最大吸收，吸收系數(shù)分別為 25～28和 ～ ；取上述供試品溶液 1ml，加水稀釋成 20ml后，在 224nm處有最大吸收，吸收系數(shù)為370～ 400。 （ 3）對比吸收度或吸收系數(shù)的比值。 取不同吸收峰或吸收谷處的吸收度的比值作為鑒別的依據(jù)。 由于溶液濃度和吸收池厚度均相同，因此用此法可消除濃度和厚度的影響。 例如 :維生素 B12的鑒別， 《 中國藥典 》 （ 2021年版）規(guī)定 361nm處的吸收度與 278nm處的吸收度比值應(yīng)為～ ， 361nm處的吸收度與 550nm處的吸收度比值應(yīng)為 ～ 。 （ 4）對比吸收光譜的一致性。 用上述幾種方法鑒別時，無法發(fā)現(xiàn)吸收曲線其他部分的差異。必要時可將濃度相同的試樣與標(biāo)準(zhǔn)品在同一條件下分別掃描其吸收光譜，對比其一致性；也可利用文獻(xiàn)中的標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照。如 《 中國獸藥典 》 （ 2021年版）二部連翹中連翹甙的紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)圖譜（圖 41），用此標(biāo)準(zhǔn)圖譜來比較吸收光譜的一致性。 圖 41 連翹甙的紫外吸收圖譜 ? 特點： 紅外吸收光譜法（ IR）是一種 專屬性很強(qiáng)、應(yīng)用廣泛（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。 ? 作用： 主要用于組成單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥鑒別， 特別是 結(jié)構(gòu)復(fù)雜、用化學(xué)方法不易鑒別的藥物 。 《 中國藥典 》 （ 2021年版）二部中幾乎所有的原料藥都采用本法鑒別，采用此法鑒別的原料藥及其制劑共有 593種。 2．紅外吸收光譜法 ? 鑒別方法： 時采用 標(biāo)準(zhǔn)圖譜對比法， 即在藥典規(guī)定的條件下測定供試品的圖譜，然后與 《 藥品紅外光譜集 》 對照。 對照時一般先看 最強(qiáng)峰 的吸收位置、形狀、數(shù)目等是否一致，然后再檢查 中等強(qiáng)度縫和弱吸收峰是否對應(yīng)，如果供試品的紅外光吸收圖譜與對照品的圖譜完全一致，一般可認(rèn)為是同一種化合物。 為了確保鑒別結(jié)果準(zhǔn)確無誤，藥典 一般不單獨用本法進(jìn)行鑒別，常與其他理化方法聯(lián)合進(jìn)行鑒別。 如： 《 中國獸藥典 》 （ 2021年版）一部苯酚鑒別項下規(guī)定：取本品 ，加水 10ml溶解后，照下述方法試驗。 （ 1）取溶液 5ml，加 三氯化鐵試液 1滴，即顯藍(lán)紫色。 （ 2）取溶液 5ml， 加溴試液，即生成瞬即溶解的白色沉淀， 但溴試液過量時，即生成持久的沉淀。 （ 3）本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（圖 42）一致。 圖 42 苯酚的紅外光吸收譜圖 薄層色譜法 （ TLC） 是將細(xì)粉狀的吸附劑或載體涂布于一塊具有光潔表面的玻璃板 、 塑料片或鋁基片上 ， 形成以均勻薄層 （ 厚度～ 1mm） ,待點樣 、 展開后 ， 各組分在薄層上得到彼此分離的方法 ， 也是 目前藥典中收載最多的藥品鑒別方法之一 。 《 中國藥典 》 （ 2021年版 ） 一部中 TLC法用于鑒別的已達(dá) 1523項 ， 二部 199項 。 3．薄層色譜法 ? 鑒別原理： 同一種藥物在同樣條件下的薄層色譜行為是相同的 ,依此可以鑒別藥物及其制劑的真?zhèn)?。 ?鑒別時將供試品和對照品按中國藥典規(guī)定 ，用同種溶