生化實(shí)驗(yàn)05凱氏定氮法(已修改)
2025-05-28 16:32 本頁面
【正文】 Designed by XK Wang 1 實(shí)驗(yàn) 06 植物組織中總氮含量的測(cè)定 （微量凱氏定氮法） Designed by XK Wang 2 氮素代謝在植物新陳代謝中占有主導(dǎo)地位。測(cè)定氮素含量對(duì)于研究植物的氮素吸收、運(yùn)輸和代謝規(guī)律，以及確定農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等均具有一定意義。 動(dòng)植物組織中的氮包括蛋白氮和非蛋白氮兩大類，主要以有機(jī)氮形式存在。由于蛋白質(zhì)的含氮量相對(duì)穩(wěn)定，測(cè)定出樣品中總氮含量，再乘上一個(gè)系數(shù)即可得出樣品中 粗蛋白 含量。 組織中含氮量常用凱氏定氮法測(cè)定。 Designed by XK Wang 3 一、原理 在催化劑（如 CuSO K2SO硒粉等）存在的條件下，將植物材料與濃硫酸共熱，有機(jī)物氧化分解成 CO2和 H2O，其中的氮轉(zhuǎn)變?yōu)榘?，并進(jìn)一步生成 (NH4)2SO4，這個(gè)過程稱為 消化 。在消化后的樣品中加入過量的 NaOH，經(jīng)強(qiáng)堿堿化使之分解釋放出 NH3,通過 蒸餾 借蒸汽將 NH3導(dǎo)入過量的硼酸溶液中生成四硼酸銨；再用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸 滴定 ，直到硼酸溶液恢復(fù)到原來的 H+濃度，根據(jù)鹽酸的用量即可計(jì)算出樣品中總氮的含量。 Designed by XK Wang 4 一、原理 以甘氨酸為例的化學(xué)反應(yīng)式： 消化： CH2NH2COOH + 3H2SO4→2CO2 + 3SO2 + 4H2O+NH3 2NH3 + H2SO4 →(NH4)2SO4 蒸餾 : (NH4)2SO4 + 2NaOH →2H2O + Na2SO4 + 2NH3↑ 2NH3 + 4H3BO3 →(NH4)2B4O7 + 5H2O 滴定： (NH4)2B4O7 + 2HCl + 5H2O →2NH4Cl + 4H3BO3 Designed by XK Wang 5
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