【正文】 第三章 生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本知識 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)用純水 天然水 自來水 實(shí)驗(yàn)用純水 經(jīng)簡單的物理、化學(xué)方法處理，除去懸浮物質(zhì)和部分無機(jī)鹽 經(jīng)蒸餾、電滲析等處理，除去雜質(zhì) 實(shí)驗(yàn)用純水并非不含任何雜質(zhì)，其質(zhì)量高低直接影響到所配試劑的質(zhì)量，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度。 一、純水的制備方法 ? 蒸餾法 25℃ 時其電阻率為 IX 105Ω／ cm左右 ? 離子交換法 25℃ 時其電阻率為 5X 106Ω／ cm左右 ? 電滲透法 104－ 105Ω／ cm ? 炭吸附法 除去有機(jī)物質(zhì) ? 超濾膜法 除去懸浮物 ? 混合純化系統(tǒng) 二、水的純度檢查 ? 水的純度檢查首先用電導(dǎo)率儀測定其電導(dǎo)率或電阻率，然后可用特定試劑檢測水中殘留的 Ca2+、 Mg2+、 CI、 So4 等成分的含量。 ? 臨床實(shí)驗(yàn)室用水，一般選用 11級水，特殊實(shí)驗(yàn)如酶活性測定、電解質(zhì)分析等應(yīng)選用 1級水，Ill級水用做儀器、器皿的自來水清潔后沖洗 ? 一般選用聚乙烯或聚丙烯桶（瓶）貯存，貯存時間不宜太長，使用時應(yīng)避免一切可能的污染，切勿用手接觸純水或容器內(nèi)壁 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)用玻璃儀器 普通玻璃儀器的使用 （略） 二、普通玻璃儀器的清洗 ? 初用玻璃儀器的清洗 ? 使用過的玻璃儀器的清洗 ? 清潔液的配制和使用 初用玻璃儀器的清洗 ? 新購買的玻璃儀器表面常附著有游離的堿性物質(zhì)，可先用肥皂水（或去污粉）洗刷再用自來水洗凈，然后浸泡在 l％～ 2％鹽酸溶液中過夜（不少于 4小時），再用自來水沖洗，最后用蒸餾水沖洗 2～ 3次，在 100～ 130oC烘箱內(nèi)烤干備用。 使用過的玻璃儀器的清洗 ? 容器類玻璃儀器 如試管、燒杯、錐形瓶等。先用自來水洗刷至無污物，再選用大小合適的毛刷蘸取去污粉（摻人肥皂粉）或浸人肥皂水內(nèi)。將器皿內(nèi)外（特別是內(nèi)壁）細(xì)心刷洗，用自來水沖洗干凈后，蒸餾水沖洗 2～ 3次，烤干或倒置在清潔處，干后備用。 ? 量器類玻璃儀器 如吸量管、滴定管、容量瓶等。使用后應(yīng)立即浸泡于涼水中，勿使物質(zhì)干涸；然后用流水沖洗，除去附著的試劑、蛋白質(zhì)等物質(zhì)。晾干后浸泡在鉻酸洗液中 4～ 6小時（或過夜），再用自來水充分沖洗，最后用蒸餾水沖洗 2～ 4次，晾干備用 使用過的玻璃儀器的清洗 ? 其它 具有傳染性標(biāo)本的容器，如病毒、傳染病患者的血清等動污過的容器。應(yīng)浸泡在殺菌劑（ 5％煤酚皂溶液）中過夜，進(jìn)行消毒后再清洗 清潔液的配制和使用 清潔液的配制和使用 ? 配制時，先將重鉻酸鉀溶于水中，加熱助溶，待冷。然后將粗濃硫酸緩慢加人上液中，邊加邊攪拌，切勿過快，以免產(chǎn)生高熱使容器破裂。不要把重鉻酸鉀溶液向硫酸中傾倒。配制時，根據(jù)用量選用燒杯或陶瓷缸作容器。 ? 清潔液的腐蝕性強(qiáng)，用時注意勿濺在皮膚和衣服上。它的吸水性較強(qiáng)，故應(yīng)加蓋貯存。如果清潔液的顏色逐漸變?yōu)榫G色，表示效力降低，再加人適量的重鉻酸鉀和濃硫酸，還可繼續(xù)使用；如已變成黑色，則不能再用。清潔液適用于事先清洗過但未能洗凈的玻璃器皿，將水甩干后浸泡。未清洗或未消毒的器皿不要直接浸泡于清潔液中，否則會使清潔液迅速失效，減低洗滌能力。 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法的選擇 ? 實(shí)驗(yàn)方法選擇的目的 （略） ? 實(shí)驗(yàn)方法的分級 ? 標(biāo)準(zhǔn)試劑的分級 ? 實(shí)驗(yàn)方法選擇的原則 （略） ? 實(shí)驗(yàn)方法選擇的步驟 （略） 實(shí)驗(yàn)方法的分級 ? 決定性方法 ? 參考方法 ? 常規(guī)方法 決定性方法 ? 決定性方法（ definitive method）準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最?。唤?jīng)過詳細(xì)研究未發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因，其測定結(jié)果與“真值”最為接近。主要方法有重量分析法、中子活化法、同位素稀釋一質(zhì)譜分析法（ ID－ MS）等。 ? 由于技術(shù)要求太高，費(fèi)用昂貴，這類方法不直接用于鑒定常規(guī)方法的準(zhǔn)確性，只用于評價參考方法與一級標(biāo)準(zhǔn)品。國際上研究這類方法的實(shí)驗(yàn)室很少，美國、法國、德國、丹麥等國家有這類實(shí)驗(yàn)室 參考方法 ? 參考方法（ referenc。 method）是指準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)被充分證實(shí)，且經(jīng)公認(rèn)的權(quán)威機(jī)構(gòu)（國家主管部門、相關(guān)學(xué)術(shù)團(tuán)體和國際性組織等）頒布的方法。這類方法干擾因素少，系統(tǒng)誤差很小，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異度、較寬的分析范圍并且線性良好，重復(fù)測定中的隨機(jī)誤差可以忽略不計(jì)。 ? 參考方法能在條件優(yōu)越的實(shí)驗(yàn)室作常規(guī)分析，主要用于鑒定常規(guī)方法，評價其誤差大小、干擾因素并決定是否可以被接受；用于鑒定二級標(biāo)準(zhǔn)品和為質(zhì)控血清定值；用于商品試劑盒的質(zhì)量評價。 常規(guī)方法 ? 常規(guī)方法（ routine method）應(yīng)具有足夠的精密度、準(zhǔn)確度和特異度，有適當(dāng)?shù)姆治龇秶?，?jīng)濟(jì)實(shí)用，其性能指標(biāo)符合臨床或其它目的的需要。其中準(zhǔn)確度已經(jīng)確定即已查明偏差方向和數(shù)量的方法稱為偏差已知方法，而準(zhǔn)確度不明者稱為偏離未知方法。 ? 常規(guī)方法在作出評定以后，經(jīng)有關(guān)學(xué)術(shù)組織認(rèn)可，可以作為推薦方法 臨床生化檢驗(yàn)部分項(xiàng)目的決定性方法、參考方法和常規(guī)方法見表 3－ 5 三、標(biāo)準(zhǔn)試劑的分級 ? 一級標(biāo)準(zhǔn)品 ? 二級標(biāo)準(zhǔn)品 ? 控制物 一級標(biāo)準(zhǔn)品（原級參考物） ? 它是已經(jīng)確定的穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，其數(shù)值已由決定性方法確定或由高度準(zhǔn)確的若干方法確定，所含雜質(zhì)已經(jīng)定量。一級標(biāo)準(zhǔn)品都有證書，在美國由國家標(biāo)準(zhǔn)局（ WBS）頒發(fā)證書，并指明其性質(zhì)和有關(guān)數(shù)據(jù)。 ? 一級標(biāo)準(zhǔn)品用于校正決定性方法，評價和校正參考方法以及為“二級標(biāo)準(zhǔn)品”定值。 二級標(biāo)準(zhǔn)品（次級參考物） ? 這類標(biāo)準(zhǔn)品可以是純?nèi)芤海ㄋ蛴袡C(jī)溶劑的溶液），也可以存在于相似基質(zhì)中?？捎蓪?shí)驗(yàn)室自己配制或?yàn)樯唐罚渲杏嘘P(guān)物質(zhì)的量由參考方法定值或用一級標(biāo)準(zhǔn)品比較而確定。 ? 二級標(biāo)準(zhǔn)品主要用于常規(guī)方法的標(biāo)化和控制物的定值。 （三）控制物 ? 控制物用于常規(guī)質(zhì)量控制，以控制病人標(biāo)本的測定誤差。有定值血清和未定值血清兩種?？刂莆锊荒苡糜跇?biāo)定儀器或方法。在控制物的制備、定值和使用過程中，應(yīng)嚴(yán)格按有關(guān)規(guī)程進(jìn)行。 各級分析方法和標(biāo)準(zhǔn)品的相互關(guān)系 第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法的評價 ? 實(shí)驗(yàn)誤差 ? 實(shí)驗(yàn)誤差的表示方法 （一）實(shí)驗(yàn)誤差的分類 ? 系統(tǒng)誤差 ? 隨機(jī)誤差 系統(tǒng)誤差 ? 系統(tǒng)誤差（ systematic error， SE）是指一系列測定值對真值存在同一傾向的偏差。具有單向性，而沒有隨機(jī)性，常有一定的大小和方向；一般由恒定的因素引起，并在一定條件下多次測定中重復(fù)出現(xiàn)。當(dāng)找到引起誤差的原因，采取一定措施即可糾正，消除系統(tǒng)誤差能提高測定的準(zhǔn)確度。