【正文】 淮 海 工 學(xué) 院 畢業(yè)設(shè)計 (論文 )說明書 題 目： 鹽藻胞外蛋白質(zhì)的特性分析 作 者： 曹 宇 學(xué) 號： 5203102201 系 (院 )： 海洋學(xué)院 專業(yè)班級 ： 生物技術(shù) 生技 032 指導(dǎo)者： 郭金耀 教授 評閱者： 秦 蕾 副 教授 2020 年 6 月 連 云 港 畢業(yè)設(shè)計（論文）中文摘要 鹽藻胞外蛋白質(zhì)的特性分析 摘 要： 本研究以 鹽藻為研究對象 ，通過蛋白質(zhì)丙酮沉淀，薄板層析， SDS— PAGE 等生物化學(xué)技術(shù)對 鹽藻 胞外蛋白質(zhì)的特性進行分析。 利用考馬斯亮藍 G— 250 染色法 在 595nm下測定吸光值， 得到 鹽藻 胞外蛋白質(zhì)的含量為 。蛋白質(zhì)丙酮沉淀后，通過薄板層析可以看出 鹽藻 胞外蛋白有兩大類蛋白質(zhì) Rf 值分別為 和 ，對遷移率為 的蛋白質(zhì)進 SDS— PAGE 可以得到 3 條帶，其 泳距分別是 mm， mm， mm，其對應(yīng)的分子量依次是 34600， 22900，和 17800。 關(guān)鍵詞： 鹽藻 蛋白質(zhì) 薄板層析 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 分子量 畢業(yè)設(shè)計（論文）外文摘要 The characteristic analysis of Excellular protein from the DunalieUa Salin Abstract: The research takes the DunalieUa Salina as the research object, through acetone, the thin steel plate chromatographic analysis, SDS— PAGE and other biochemistry technology to carriey on the analysis of Excellular protein of the DunalieUa Salina. Using tests Coomassie Brilliant Blue G250 to determine the extinction value under 595 nm, obtains content of the excellular protein of the DunalieUa Salina is , may see the excellular protein of the DunalieUa Salina through the thin— layer chromatograph analysis the protein to have two big albuminoid substance Rf value respectively is and . protein enters SDS— PAGE to the transport ratio to be allowed to obtain three belts,the distance of the three belts is mm， mm， mm respectively,from which we can obtain the molecular weights,they are 34600， 22900， and 17800 accordingly. Keywords: DunalieUa Salina； protein； thin— layer chromatograph； SDS— PAGE； molecular weight 目 錄 1 引言………………………………………………………………………………… 1 鹽生杜氏藻的特性 …………………………………… …………… ………………… 1 鹽藻的研究現(xiàn)狀 ………………………………………………… …………………… 2 鹽藻蛋白質(zhì) ………………………………………………………………………………… 2 本試驗研究意義及前景 ………………………………………………… ……………… 3 2 材料與方法 …………………………………………………………………………………… 4 實驗 材料 ………………………………………………………………………… ……… … 4 實驗 方法 …………………………………………………………………… …………… … 5 3 結(jié)果與分析 …………………………………………………………………………… … … 11 鹽藻胞外蛋白質(zhì)的含量 …………………………………………………………… … 11 鹽藻胞外蛋白質(zhì)的 Rf 值 …………………………………………………………… … 11 鹽藻胞外蛋白質(zhì) 的 分子量 …… …………………………………………………… 11 4 討論 …… ……………………………………………………………………………………… 12 結(jié)論 ……………………………………………………… …………………………………… 13 致謝 …………………………………………………………………………………………… 14 參考文獻 … …………………………………………………………………………………… 15 淮海工學(xué)院二○○六屆畢業(yè)設(shè)計（論文） 第 1 頁 共 16 頁 1 引言 鹽生杜氏藻的特性 杜氏藻的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點 杜氏藻 (DunalieUa Salina)屬于綠藻綱，團藻目，杜氏藻屬，已記錄了 29 個種和一些變種。有人建議將它們列為杜氏藻目，杜氏藻科。杜氏藻形態(tài)上類似于衣藻，為單細胞綠藻，通常為卵形，長 不過 6～ 15μ m，寬只有 4～ 10μ m，具有 2 根 等長鞭毛，可運動 。細胞內(nèi)有 1 個杯狀葉綠體，底基部有 1 個由多糖顆粒包圍的蛋白核廣多糖 ， 是細胞的貯藏產(chǎn)物，此外還有核、線粒體、高爾基體、液泡和眼點。它們結(jié)構(gòu)上的顯著特點是沒有堅硬的細胞壁，細胞由有彈性的多糖蛋白復(fù)合物型細胞膜包裹，表面有粘性覆蓋層。因此，當滲透壓發(fā)生變化時，細胞的形狀、大小就隨之而改變。在不同條件下，可觀察到卵形、球形、圓柱形、橢圓形、梨形、紡錘形等。當環(huán)境不利時，常變?yōu)榍蛐?[1]。 杜氏藻的繁殖有營養(yǎng)繁殖和有性生殖兩種，營養(yǎng)繁殖為縱裂，在一定條件下可形成有厚粘膠層的膠群體，偶爾也形成孢囊 (不 動孢子 )，當環(huán)境不利時或急劇變化時，例如培養(yǎng)時迅速稀釋或干燥時，通常會形成不動孢子。有性生殖類似于衣藻的同配接合生殖。接合子為綠色或紅色，外面有一層厚而平滑的壁，經(jīng)過休止階段后，接合子核分裂生成 32 個細胞，通過母細胞壁放出 [2]。 杜氏藻的分布及生態(tài) 杜氏藻廣泛存在于自然界，既有淡水種類，例如 D. flagellata， D. chordata， D. laleralis，D. paupera。也有廣鹽性種類例如 D. tertiolecta， D. bioculata， D. primolecta， 還有生存于超鹽環(huán)境如鹽湖、鹽田中的種類如 D. salina， D. minuta， D. parva， D. viridis 等。有人建議將淡水種類另列一屬。可見杜氏藻耐受鹽濃度變化范圍很寬。就鹽生杜氏藻 ()而言，能適應(yīng)低鹽水到飽和鹽水 (35%~36%)。當外界鹽濃度化，它們通過合成甘油來調(diào)節(jié)其滲透壓變化。細胞內(nèi)甘油含量與細胞外鹽濃度是呈正相關(guān)的。細胞內(nèi)鈉和鉀濃度與鹽濃度變化是無關(guān)的。杜氏藻中對于 pH 的耐受性也有明顯不同，有耐受強酸性環(huán)境的種類，例如 D. acidophila， 也有耐 受 強堿性的種類 如 D． salina， 一般來說海生的杜氏藻并不是海洋浮游植物的主要種類，但在超鹽環(huán)境中，如美國的大鹽湖、以色列的死海、澳大利亞的賓克湖中，紅色的 D. salina， 粉紅色的 D. parva， 綠色的 D. viridis 常常是優(yōu)勢種。特別是當鹽度 于 20%時，它們是最重要的原初生產(chǎn)者。在鹽田蒸發(fā)池中可見到這些紅色群體的存在。杜氏藻的自然群體有明顯的季節(jié)變化，在 夏季時 當水溫超過 30℃