【正文】 臨床 生化 檢驗室 分析項目作業(yè)指導(dǎo)書 溫州 醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗中心 Laboratory Medicine Center The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University 溫州 醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗中心 臨床 生化 檢驗室 分析項目作業(yè)指導(dǎo)書 編 制 ： 審 核： 批 準(zhǔn)： 發(fā)布日期： 實施日期： 目 錄 文件編號 名稱 頁碼 回顧和修訂頁 14 LABSHXMSOP001 血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 59 LABSHXMSOP002 血清白蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 1014 LABSHXMSOP003 血清總膽紅素測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 1519 LABSHXMSOP004 血清結(jié)合膽紅素測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 2024 LABSHXMSOP005 血清總膽汁酸測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 2529 LABSHXMSOP006 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 3034 LABSHXMSOP007 血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 3540 LABSHXMSOP008 血清堿性磷酸酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 4145 LABSHXMSOP009 血清 γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 4650 LABSHXMSOP010 乳酸脫氫酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 5155 LABSHXMSOP011 血清肌酸激酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 5660 LABSHXMSOP012 血清肌酸激酶同工酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 6166 LABSHXMSOP013 血清 α羥丁酸脫氫酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 6771 LABSHXMSOP014 淀粉酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 7276 文件編號 名稱 頁碼 LABSHXMSOP015 葡萄糖測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 7782 LABSHXMSOP016 尿素測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 8387 LABSHXMSOP017 肌酐測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 8893 LABSHXMSOP018 尿酸測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 9498 LABSHXMSOP019 血清總膽固醇測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī) 程 99104 LABSHXMSOP020 血清甘油三酯測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 105109 LABSHXMSOP021 血清高密度脂蛋白膽固醇測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 110114 LABSHXMSOP022 血清低密度脂蛋白膽固醇測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 115119 LABSHXMSOP023 血清載脂蛋白 A1測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 120124 LABSHXMSOP024 血清載脂蛋白 B測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 125128 LABSHXMSOP025 鈣測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 129133 LABSHXMSOP026 血清無機(jī)磷測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 134138 LABSHXMSOP027 血清鎂測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 139143 LABSHXMSOP028 血清鐵測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 144148 LABSHXMSOP029 血清不飽和鐵結(jié)合力測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 149153 LABSHXMSOP030 血清電解質(zhì)測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 154159 LABSHXMSOP031 糖化血紅蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 160162 1 回 顧 頁 回 顧 人 回 顧 日 期 2 修 訂 頁 頁碼 條目 原內(nèi)容 修訂后內(nèi)容 修訂者 批準(zhǔn)者 修訂日期 3 頁碼 條目 原內(nèi)容 修訂后內(nèi)容 修訂者 批準(zhǔn)者 修訂日期 4 頁碼 條目 原內(nèi)容 修訂后內(nèi)容 修訂者 批準(zhǔn)者 修訂日期 溫州 醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗中心 血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件編號： LABSHXMSOP001 臨床 生化 檢驗室分析項目 SOP 版本號： 2021B/0(2021) 共 5 頁 5 一、血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 1 檢驗申請 單獨檢驗項目申請：血清總蛋白測定 (縮寫 TP)；組合項目申請：肝功能測定項目組合。 臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。 2 標(biāo)本采集與處理 標(biāo)本采集 常 規(guī)靜脈采血約 2ml，置含分離膠的真空采血管 （黃蓋管） 。 采用電子檢驗 申請單 ， 血標(biāo)本試管 粘貼附患者信息的條形碼 。 標(biāo)本采集后，通過 LIS 及標(biāo)本條形碼管理系統(tǒng)記錄標(biāo)本采集時間。 標(biāo)本采集后及時運送至醫(yī)學(xué)檢驗中心。由標(biāo)本處理中心負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。 不合格標(biāo)本 標(biāo)本量不足：少于 的全血標(biāo)本，或少于 的血清或血漿。 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。 其他如標(biāo) 識涂改、標(biāo)本試管破裂等。 注： 嚴(yán)重溶血或脂濁的標(biāo)本，應(yīng)在檢驗報告中標(biāo)注標(biāo)本狀況，并建議復(fù)查 ， 并在工作日志中記錄。 標(biāo)本保存 接收標(biāo)本后在 30min 內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。 標(biāo)本保存時間：室溫（ 20℃ ~25℃）下可穩(wěn)定一周，普通冰箱中（ 4℃ ~8℃）穩(wěn)定一個月，20℃保存可穩(wěn)定 1年。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過 1d 的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。 已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置 2℃ ~8℃ 冰箱內(nèi)保存 7d。 標(biāo)本采集注意事項 采血前使受檢者保持平靜、松弛狀態(tài)。 不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。 3 方法原理 雙縮脲法。堿性溶液中的銅離子和蛋白質(zhì)或多肽分子中的肽鍵反應(yīng)，生成紫藍(lán)色絡(luò)合物，絡(luò)合物在波長 540nm 處的吸光度和蛋白質(zhì)的濃度成正比。 溫州 醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗中心 血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件編號： LABSHXMSOP001 臨床 生化 檢驗室分析項目 SOP 版本號： 2021B/0(2021) 共 5 頁 6 4 試劑及其他用品 試劑： 雙縮脲法測定總蛋白試劑盒，由 貝克曼 公司出品 。 試劑盒保存：避光保存于 2℃ ~25℃ ，不開蓋情況下至標(biāo)簽的失效期。開蓋后放于儀器的試劑倉冰箱中可至少穩(wěn)定 30 天。變質(zhì)指示：正常試劑是清澈的藍(lán)色溶液，當(dāng) 試劑渾濁或有黑色沉淀物時，表明已經(jīng)變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。 試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。 試劑盒主要成分： 試劑 1(R1)：氫氧化鈉 80mmol/L， 酒石酸鉀鈉 ； 試劑 2(R2)：氫氧化鈉 100mmol/L， 酒石酸鉀鈉 16mmol/L， 碘化鉀 15 mmol/L， 硫酸銅6mmol/L。 5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式 System Calibrator，貨號 OE66300。定標(biāo)品 TP 的值可溯源到國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)協(xié)會 (NIST) 標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì) (SRM) 927c。 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點數(shù)目：線性模式， 1 個校準(zhǔn)點。 校準(zhǔn)液 重建方法： 蒸餾水復(fù)溶，無需特殊準(zhǔn)備。 校準(zhǔn)周期 ：①更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果指示需重建標(biāo)準(zhǔn)曲線時；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須進(jìn)行一次校準(zhǔn)。 6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則 質(zhì)控液： Beckman Coulter AU 血清質(zhì)控液 Control Sera，貨號 ODC0003 和 ODC0004。 質(zhì)控液重建方法： 蒸餾水復(fù)溶，無需特殊準(zhǔn)備。 質(zhì)控品測定： 在每一測試批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。 質(zhì)控規(guī)則：采用 Westgard 多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則 。 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測。 7 適用儀器 適用 BECKMAN COULTER AU5800 全自動生化分析儀 。 8 標(biāo)本檢測步驟 裝載試劑 → 進(jìn)行校準(zhǔn) → 進(jìn)行質(zhì)控 → 輸入標(biāo)本檢測項目 → 加載標(biāo)本 → 標(biāo)本測定 → 結(jié)果復(fù)核 →報告。 溫州 醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗中心 血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件編號： LABSHXMSOP001 臨床 生化 檢驗室分析項目 SOP 版本號： 2021B/0(2021) 共 5 頁 7 9 主要分析參數(shù) General LIH ISE Range 測試名稱 ? ? ? 類型 血清 ? 操作 是 ? 樣品體積 ?L 稀釋 0 ?L OD 區(qū)間 預(yù)稀釋率 1 稀釋瓶 外側(cè) 最小 OD 最大 OD 試劑體積 R1（ R11） 25 ?L 稀釋 65 ?L 試劑 OD 區(qū)間 R12 ?L 稀釋 ?L 最初 低 高 R2（ R21） 25 ?L 稀釋 10 ?L 最后 低 高 共同試劑 類型 無 名稱 無 動態(tài)范圍 低 高 相關(guān)系數(shù) A 1 B 0 波長 主要 540 ? nm 次要 660 ? nm 制造商因子 A 1 B 0 方法 END ? 反應(yīng)斜率 + ? 在線穩(wěn)定期 天 小時 測量點 1 最初 0 最后 27 測量點 2 最初 0 最后 10 線性區(qū)間 % 滯后時間檢查 10 結(jié)果計算 公式： ）校準(zhǔn)液總蛋白濃度（校準(zhǔn)液 標(biāo)本）總蛋白濃度（ ）（ LgAALg nmnm // )660540( 660540 ?? ?? 儀器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本 的 測定結(jié)果。 11 檢驗結(jié)果的報告及范圍 結(jié)果報告 結(jié)果經(jīng)審核確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。 報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、檢驗者和審核者，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單 上指出。 溫州 醫(yī)科大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗中心 血清總蛋白測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件編號： LABSHXMSOP001 臨床 生化 檢驗室分析項目 SOP 版本號： 2021B/0(2021) 共 5 頁 8 報告范圍： 22~90g/L，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。 12 操作性能 精密度： CV 約 %。 線性范圍： 30~90g/L。 方法的有限性及干擾因素：當(dāng)樣品中抗壞血酸 ≤ 1704μmol/L，膽紅素 ≤ 684μmol/L，血紅蛋白 ≤ ，甘油三酯 ≤ 。 13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平 參考范圍： 65~85g/L 14 臨床意義 血漿總蛋白包括血漿中所有蛋白質(zhì)，其中主要有白蛋白和球蛋白兩大類。血漿蛋白主要的生理功能是維持血漿膠體滲透壓和 pH 值 ， 作為 載體運送多種物質(zhì) ， 參與凝血和抗凝 ， 免疫作用和營養(yǎng)作用等。 TPALB＝球蛋白（含量），并可由此得出 A/G 比值。 血清 TP 增高 ： 多 見于 高免疫球蛋白癥，由于肝臟合成蛋白質(zhì)增多所致，如多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、冷沉淀球蛋白血癥等。 各種原因失水所致血液濃縮時 TP