【正文】 XXXXXXXXXXXXX。第六部分 XXXXXXX防治大鼠肝纖維化(1)造模采用膽總管結(jié)扎和CCl4肝纖維化兩種動物模型。(2)分組及處理XXXXXXXXXXXXXX。(3)治療效果檢測主要比較以下指標：XXXXXXXXXXXXXXX。技術(shù)路線圖XXXXXXXXXXXXXXX。 立項依據(jù)有堅實的理論與實踐基礎(chǔ)。本研究是參閱大量文獻并結(jié)合自身以往深厚的肝纖維化防治研究基礎(chǔ)，特別是結(jié)合近四年國家自然科學基金資助研究成果，在XXXX 化學合成及功能研究、低劑量XXX抗肝纖維化作用和機制的前期工作基礎(chǔ)上，提出的多途徑、互補協(xié)同與靶向治療肝纖維化的新探索。掌握了國內(nèi)外在受體調(diào)節(jié)藥物靶向、低毒性高效中藥新劑型開發(fā)和以HSC的靶標的肝纖維化靶向治療中的最新研究動態(tài)，借鑒“雙靶向”干預(yù)的最新研究成果，并與自身實踐相結(jié)合，在理論上、實踐上均有可靠基礎(chǔ)。 相關(guān)實驗技術(shù)成熟，實驗結(jié)果可信。本研究使用的實驗方法、動物模型和生物分子化學合成等多為國內(nèi)外應(yīng)用多年的經(jīng)典方法，并有自身實踐基礎(chǔ)。本課題組由掌握以上技術(shù)的成員組成，相關(guān)技術(shù)已應(yīng)用于科研工作。 人員配備合理，具有扎實的相關(guān)工作基礎(chǔ)和完善的實驗設(shè)備及技術(shù)支持。申請人長期從事肝纖維化防治研究，先后承擔包括國家自然基金在內(nèi)的各類科研項目15項，指導(dǎo)或協(xié)助指導(dǎo)博士后、博士生及碩士生70余名。近四年主持了國家自然科學基金項目“RGD修飾細胞生物信息調(diào)控分子和綴合基因的功能研究(編號30170412）”和“人卵泡抑素防治肝纖維化的實驗研究(編號30170411)”的研究工作，項目組主要成員參與并完成以上研究工作。實驗設(shè)計指導(dǎo)者、熟練技術(shù)人員及輔助人員等各司其職，可保障研究有條不紊的進行。XXXXXXXXX是國家級重點學科和“211”工程重點建設(shè)學科的組成單位之一，長期從事肝纖維化防治研究，先后承擔包括國家自然科學基金在內(nèi)的各級各類科研項目20余項。本項目的特色與創(chuàng)新之處 本課題首次嘗試利用XXXXXXX構(gòu)建HSC特異性受體調(diào)節(jié)藥物靶向載體。將新型配體人工化學合成、受體調(diào)節(jié)藥物靶向技術(shù)與新型脂質(zhì)體載藥技術(shù)三者結(jié)合應(yīng)用于肝纖維化防治，有很強的原始創(chuàng)新性。 本課題首次研究XXXXX生物小分子通過XXXXX與中藥粉防己堿相聯(lián)合，多途徑、互補與協(xié)同防治肝纖維化。本課題是利用分子機制指導(dǎo)中西藥聯(lián)合應(yīng)用、構(gòu)建中藥靶向制劑提高療效降低副作用和多途徑協(xié)同作用抗肝纖維化的全新嘗試，是在總結(jié)自身工作基礎(chǔ)上進行的大膽設(shè)想與創(chuàng)新。年度研究計劃及預(yù)期研究結(jié)果 年度研究計劃： 預(yù)期研究成果 獲得快速、有效和大量合成XXXXXXX和高藥物包封率、高配體修飾率的穩(wěn)定XXXXXXXX的技參數(shù)，并合成足量研究相關(guān)產(chǎn)物。 體外研究證實XXXXXXXX。 在體內(nèi)XXXXXXXXX，有效降低有效劑量、提高療效和降低副作用。 研究證實XXXXXXX可成為抗肝纖維化藥物新劑型開發(fā)的有效載體。（二）研究基礎(chǔ)與工作條件 1 研究基礎(chǔ)。自1981年以來，我們研究室長期從事肝纖維化防治研究，先后對鈣拮抗劑、鈣調(diào)蛋白拮抗劑、大黃素、激活素、腎素血管緊張素系統(tǒng)及卵泡抑素等在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用進行了系列的研究，積累了較豐富的理論，掌握了相關(guān)研究技術(shù)。承擔了包括國家自然科學基金在內(nèi)的各類科研項目20多項，先后獲省部級以上科技進步獎10項。項目負責人率先在我國開展鈣拮抗劑尤其是中藥粉防己堿對肝纖維化防治研究，取得豐富的粉防己堿抗肝纖維化基礎(chǔ)和臨床研究成果，在國內(nèi)外期刊發(fā)表相關(guān)論文50余篇，獲省部級以上科技進步獎5項。近兩年，我們在上海市教委基金項目“粉防己堿影響肝星狀細胞活化信號分子研究（編號02BK14）”資助下完成了小劑量粉防己堿抗肝纖維化效果與機制的研究，在國內(nèi)外首次報道小劑量粉防己堿可通過影響TGFβSmads信號通路抑制HSC活化，相關(guān)研究論文被SCI收錄(收錄號 IDS Number: 963XN)。該研究為指導(dǎo)粉防己堿在肝纖維化防治中應(yīng)用有重要價值。（參見申請人簡歷及附件二、三）。近四年來，申請人承擔并完成了國家自然科學基金項目“RGD修飾細胞生物信息調(diào)控分子和綴合基因的功能研究（編號 30170412）”，化學合成了RGDM6P，分子克隆構(gòu)建pCIRGDSmad7并成功通過脂質(zhì)體進行基因轉(zhuǎn)染，通過體內(nèi)外實驗觀察了RGDM6P和pCIRGDSmad7的生物學效應(yīng)。細胞及動物學實驗均證實pCIRGDSmad7和RGDM6P可減輕ECM沉積，并影響TGFβ1和整合素表達強度和分布。主要研究工作由本項目組成員參與并完成。目前我們正在利用基金很少量結(jié)余款項進行合成RGDM6P修飾SSL的工作。得益于此，他（她）們分別熟練掌握了生物小分子的化學合成相關(guān)技術(shù)（多肽合成、固相化反應(yīng)、納米技術(shù)、高效分離技術(shù)等）、免疫組織與細胞化學技術(shù)、RTPCR和定量PCR、蛋白印跡、高效液相分析、質(zhì)譜分析、肝纖維化動物模型及生物信息學方法等與本課題相關(guān)的關(guān)鍵技術(shù)與方法（相關(guān)論文參見申請人簡歷）。由于以上的工作基礎(chǔ)，我們擁有豐富的生物分子合成經(jīng)驗，成熟的生物分子構(gòu)建技術(shù)和良好的人員與設(shè)備支持。已經(jīng)構(gòu)建成功的RGDM6P及相關(guān)技術(shù)要領(lǐng)，可直接用于本課題。構(gòu)思本課題的重要原因之一是探討解決簡單單一藥物治療中發(fā)現(xiàn)的諸多問題而開展的，密切相關(guān)的細胞學、動物學實驗基礎(chǔ)也是本實驗成功的重要保證。工作條件 XXXXXXX設(shè)有校屬的XXXXXXXXX消化系疾病第三研究室。實驗室擁有本項目研究相關(guān)的大部分生化、細胞生物學及分子生物學等方面的各種儀器設(shè)備，如倒置顯微鏡攝影設(shè)備、γ計數(shù)儀、CO2培養(yǎng)箱、酶聯(lián)免疫測定儀、電轉(zhuǎn)膜儀、低溫冰箱、低溫超速離心機及其它分子生物學設(shè)備等。 XXXXXXXXXXXX醫(yī)學研究所為本項目開展提供了儀器、技術(shù)支持和信息服務(wù)平臺。我們可免費使用相關(guān)設(shè)備如層流無菌室、質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀、定量PCR儀、NICOMP Particle Sizer Model 3700分析系統(tǒng)、流式細胞儀和FlousS MultiImage圖像分析儀等，新華醫(yī)院和學院均有SPF級的動物飼養(yǎng)條件。第二篇：國家自然科學基金項目申請書國家自然科學基金申請書報告正文部分正文報告撰寫提綱： ．立項依據(jù)與研究內(nèi)容(4000 ～ 8000 字)：(1)項目的立項依據(jù)(附主要的參考文獻目錄)(2)項目的研究內(nèi)容，研究目標，以及擬解決的關(guān)鍵問題(3)擬采取的研究方案及可行性分析(4)本項目的特色與創(chuàng)新之處(5)研究計劃及預(yù)期研究結(jié)果 2 ．研究基礎(chǔ)與工作條件(1)工作基礎(chǔ)(2)工作條件(3)申請人簡歷(4)承擔科研項目情況 正文第一部分 ．項目的立項依據(jù)立項依據(jù)與研究內(nèi)容中的前 3 部分是撰寫基金申請書最關(guān)鍵的 3 個部分。這 3 個部分寫好了，其他各部分就相當于錦上添花。立項依據(jù)應(yīng)包括項目的研究意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及分析。作為基礎(chǔ)研究須結(jié)合科學研究發(fā)展趨勢來論述科學意義；作為應(yīng)用研究須結(jié)合國民經(jīng)濟和社會發(fā)展中迫切需要解決的關(guān)鍵科學和技術(shù)問題來論述其應(yīng)用前景。這部分應(yīng)注意以下幾方面主要問題：(1)既要介紹國外動態(tài)，更要介紹國內(nèi)研究情況不知從何時開始，中國人寫論文時喜歡引用外國人的工作，而不注意引用國內(nèi)同行的工作，基金申請書也有類似的問題。這樣，評議人會認為申請人對國內(nèi)研究情況不了書解，就可能會以 “ 不了解國內(nèi)情況 ” 為由，不同意資助該項目。(2)國內(nèi)情況應(yīng)包括申請者自己的研究工作 不少申請人往往只介紹他人的工作，而不介紹自己的工作?？赡苡械纳暾埲苏J為在研究基礎(chǔ)中會介紹，立項據(jù)據(jù)中就不介紹了。這樣就顯得立項依據(jù)不太全面、充分。申請者必須在這里簡單介紹自己已有的工作基礎(chǔ)，以使評議人能比較全面地了解申請人。(3)必須闡明申請人要從事本項研究的理由 有些申請只談及本項目的意義和國內(nèi)外動態(tài)，但沒看介紹申請者本人為什么要從事本項研究，似乎申請是給別人寫的，而不是給自己寫的。應(yīng)該清晰地介紹究竟您在前期工作中發(fā)現(xiàn)了什么，別人的工作中存在什么問題，或者您對哪個科學問題有什么特殊想法等等。否則，評審人難以判斷申請人自己的具體想法，這樣的申請絕對屬于沒有到位。(4)堅持 “ 有所為，有所不為 ” 的基本國策，填補空白不是立項依據(jù) 不少申請人把填補空白作為立項的理由，這不符合國家實施科學基金制和成立基金會的目的?？茖W基金是要使我國的基礎(chǔ)研究在世界上占有一席之地，而不是跟蹤或填補空白。盡管國家不斷增加對基金會的投入，但研究經(jīng)費依然不足，目前在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域，只可能支持那些有研究基礎(chǔ)、有特色或有創(chuàng)新性的申請項目。有人指出，基礎(chǔ)研究只能爭第一名，第二名、第三名等于白干，所以，更不應(yīng)該去填補什么空白。這就和下圍棋一樣，不管是輸是贏，必須做活兩個眼，才能在棋盤上占領(lǐng)一塊地盤，否則，人家下一個子，你也跟著下一個子，最后全部棋子被人吃光。如果國家經(jīng)濟需要，可以填補某些空白，但做基礎(chǔ)研究就不一樣了，填補空白必要性不大，也許可以培養(yǎng)一些年輕人，但根據(jù)目前國家的經(jīng)濟實力還不能夠這么做。(5)主要參考文獻，包括國內(nèi)、外的關(guān)鍵性研究工作都要有所顯示，注意時間性，不必像研究生的開題報告，列出一大堆文獻，但太少了也不合適，容易讓評審人誤認為你了解情況不夠。總之，立項目的要明確，申請理由要充分，立項依據(jù)既不要太科普，又要把關(guān)鍵問題交待清楚，能引起評審人的興趣，愿意繼續(xù)讀完你的申請。能夠讓人不愿放棄地閱讀你的申請書，那樣的申請才有競爭力。，項目的研究內(nèi)容、研究目標，以及擬解決的關(guān)鍵問題 這是正文的重點闡述部分，應(yīng)該注意以下問題：(1)研究目標應(yīng)是解決科學問題和學術(shù)性問題 作為基金項目不是簡單地去做一件具體的事，解決一個非學術(shù)性的目標，而是要研究和解決具體事件中的科學問題或?qū)W術(shù)性問題。以材料為例，很多申請的目標只是研究一種最佳工藝或者使某種材料達到什么具體性能，這類項目屬于開發(fā)性研究，沒提出任何科學問題或?qū)W術(shù)性問題，不符合基礎(chǔ)研究的要求。另外，探索規(guī)律本應(yīng)該屬于基礎(chǔ)研究，但在目前經(jīng)費還比較緊張的情況下，泛泛地探索什么規(guī)律，而不能很好地論證要了解某個規(guī)律的意義，那就缺乏競爭力，難以得到支持。(2)研究內(nèi)容要突出重點目前的面上基金項目的強度不算很高，一個基金面上項目只要求解決一兩個科學問題。希望最后的研究結(jié)果要有力度，不要泛泛的，什么都做。過去曾有評委指出，有的申請內(nèi)容什么都做，好像把教科書的目錄全列上了，這種申請多半出自高校老師之手。為了把研究內(nèi)容敘述得清楚些，可以在每一個研究內(nèi)容下把細節(jié)描述得清楚一點，列出關(guān)鍵的細目。以免因 “ 內(nèi)容過多，重點不突出 ” 而招 “ 槍斃 ”。