【正文】 ....................... 11 甲基對硫磷標(biāo)準(zhǔn)品的提取及純化 ............................... 12 試劑及儀器 ........................................... 12 超聲波提取條件選擇 ................................... 12 提取劑的配制 ......................................... 13 提取樣品的純化 ....................................... 13 3 結(jié)果與討論 ....................................................... 14 提取條件的選擇 ............................................. 14 提取時(shí)間選擇 ......................................... 14 提取功率選擇 ......................................... 14 提取溶劑劑量選擇 ...................................... 15 三七樣品的處理 ....................................... 15 三七樣品氣相色譜圖 ................................... 15 甲基對硫磷含量計(jì)算 .................................... 16 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 4 展望 ............................................................. 17 參考文獻(xiàn) ........................................................... 18 致 謝 ............................................................. 20 紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 1 1 緒論 引言 三七簡介 三七 （ Panax notoginseng） ，又叫田七，因枝分三叉，葉為七片，故稱為三七。三七在春冬兩季采挖，又分為 春七 和 冬七 。 云南文山是是全國的三七生產(chǎn)地和原產(chǎn)地，三七具有止血、活血化瘀、 降低血脂、膽固醇、抑制動(dòng)脈硬化 等多種功能，并且三七的花和根都可以入藥。到目前為止， 從三七中分離得到的化學(xué)成分主要有皂苷、黃酮、揮發(fā)油、氨基酸、多糖、 淀粉、蛋白質(zhì)等以及部分無機(jī)化學(xué)成分如氮、磷、鉀等大量元素和鈷、鉬、銫等微量元素。 本實(shí)驗(yàn)所用的樣品為三七粉（灰黃色）， 三七粉是用三七主根 粉碎而成的粉 。 圖 1－ 1 產(chǎn)自云南文山的三七 有機(jī)磷類農(nóng)藥的種類 有機(jī)磷農(nóng)藥是一種含有磷原子的有機(jī)脂類化合物，在體內(nèi)與膽堿酯酶形成磷酸化膽堿酯酶，使膽堿酯酶活性受抑制，而產(chǎn)生毒性的一類農(nóng)藥的總稱。大多為磷酸脂類和硫代磷酸酯類。 其種類主要為： 劇毒類： LD5010mg/kg,甲拌磷，對硫磷，內(nèi)吸磷 高毒類： LD50:10100mg/kg,甲基對硫磷，甲胺磷，氧樂果，敵敵畏 緒論 2 中毒類： LD50:1001000mg/kg,樂果，乙硫磷，敵百蟲 低毒類： LD50:10005000mg/kg,馬拉硫磷（ LD50:大鼠經(jīng)口） 在三七種植過程中一些藥農(nóng) 使用農(nóng)藥的方式方法 也不科學(xué)；有些藥農(nóng)片面追求產(chǎn)量，盲目過度使用農(nóng)藥，這些都給人工種植的中草藥的質(zhì)量造成一定的影響]2[ 。而文獻(xiàn)報(bào)道多為食品、蔬菜、谷物、飼料、水果等有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測定方法，鮮有中草藥有 機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測定方法的報(bào)道。為了把握中草藥的質(zhì)量，建立這些中草藥有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的定性或定量分析方法是非常必要的。 本論文主要側(cè)重研究三七中甲基對硫磷的提取、純化及檢測。 有機(jī)磷類農(nóng)藥的危害 有機(jī)磷農(nóng)藥 是用于防治植物病、蟲 害的含有機(jī)磷農(nóng)藥的有機(jī)化合物 ]21[? 。這一類農(nóng)藥品種多、藥效高，用途廣，易分解，在人、畜體內(nèi)一般不積累，在農(nóng)藥中是極為重要的一類化合物 。 但有不少品種對人、畜的急性毒性很強(qiáng)，在使用時(shí)特別要注意安全，近年來，高效低毒的品種發(fā)展很快，逐步取 代了一些高毒品種，使有機(jī)磷農(nóng)藥的使用更安全有效 ]43[? 。 我國農(nóng)藥污染面積大，影響范圍廣。我國是一個(gè)農(nóng)業(yè)大同，農(nóng)藥使用品種多，用量大，其中70％～ 80％的農(nóng)藥直接散落到環(huán)境中，對土壤、地表水、地下水和農(nóng)產(chǎn)品造成污染。并進(jìn)一步進(jìn)入生物鏈，對整個(gè)環(huán)境生物和人類自身都有影響 ]5[ 。一旦產(chǎn)生危害，其后果不堪設(shè)想 。所以繼續(xù)開發(fā)高效、低殘、低毒農(nóng)藥尤為重要。 開發(fā)各種能消除環(huán)境中農(nóng)藥污染的技 術(shù)和產(chǎn)品，將污染產(chǎn)生的危害和損失降到最低限度。加強(qiáng)農(nóng)藥在環(huán)境中遷移、轉(zhuǎn)化規(guī)律及毒理學(xué)研究，弄清農(nóng)藥對環(huán)境生態(tài)危害和人體毒害作用的機(jī)制。為農(nóng)藥環(huán)境安全管理、農(nóng)藥科學(xué)合理使用。新農(nóng)藥品種開發(fā)等提供科學(xué)依據(jù)。 在有機(jī)磷類農(nóng)藥中以甲基對硫磷為代表的氣相色譜測定，為有機(jī)磷類農(nóng)殘檢測提供依據(jù) ]6[ 。 、有機(jī)磷類農(nóng)藥的提取、檢測方法研究 農(nóng)藥殘留分析的一般步驟為：提取－純化－檢測。在農(nóng)藥殘留測定之前要有適合于各種蔬菜食品和目標(biāo)物化學(xué)性質(zhì)的萃取、 凈化、濃縮等前步驟，這些前處紅河學(xué)院本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)） 3 理過程在分析中起決定作用。鑒于不同食品或植物中的農(nóng)藥提取有各自的特殊性，因此針對不同的目標(biāo)物需采用不同的提取純化方法和不同的檢測方法。農(nóng)藥殘留采用有機(jī)溶劑提取目標(biāo)分析物，常用的提取純化方法有冷浸、熱回流、超聲波、微波等。目前主要研究最多的是各類蔬菜、水果中農(nóng)殘的檢測 ]107[? ，對于三七的研究還甚少。 微波提取方法 的原理是在微波場中，吸收微波能力的差異使得基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱， 從而使得被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離，進(jìn)入到介電常數(shù)較小、微波吸收能力相對差的萃取劑中 [11]；楊云等采用微波萃取，萃取率高達(dá) 90%以上，且微波萃取具有設(shè)備簡單、適用范圍廣、萃取效率高、重現(xiàn)性好、節(jié)省時(shí)間、節(jié)省試劑、污染小等特點(diǎn)。目前，除主 要用于環(huán)境樣品預(yù)處理外，還用于生化、食品、工業(yè)分析和天然產(chǎn)物提取等領(lǐng)域 [12]。 超聲提取技術(shù)的基本原理主要是利用超聲波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外超聲波的次級效應(yīng)，如機(jī)械振動(dòng)、乳化、擴(kuò)散、擊碎、化學(xué)效應(yīng)等也能加速欲提取成分的擴(kuò)散釋放并充分與溶劑混合，利于提 取。與常規(guī)提取法相比，具有提取時(shí)間短、產(chǎn)率高、無需加熱等優(yōu)點(diǎn)。 根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥的化學(xué)特性和毒理學(xué)性質(zhì)，目前常用的檢測方法有紫外可見分光光度法、氣相色譜法、高效液相色譜法。 紫外可見分光光度法是根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥中的一些官能團(tuán)或水解、還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在一定的條件下，發(fā)生氧化、磺酸化、酯化、絡(luò)合等化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生特定波長的顏色反應(yīng)來進(jìn)行定性或定量測定。它的檢測限雖然可以達(dá)到 ug級，但波譜法一次只能測定一種或相同基團(tuán)的一類有機(jī)磷農(nóng)藥，且此種方法靈敏度不高，一般只能作為鑒別方法粗選。 氣相色譜 法具有分離效能高，選擇性高，靈敏度高，分析速度快和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)。是有機(jī)磷農(nóng)藥測定的國家標(biāo)準(zhǔn)方法。其中應(yīng)用于有機(jī)磷檢測的檢測器主要有氯磷檢測器 (FPD)，氮磷檢測器 (NPD)等。該方法是利用經(jīng)提取、凈化、濃縮后的有機(jī)磷農(nóng)藥注入氣相色譜柱，程序升溫后，不同的有機(jī)磷農(nóng)藥在固定相中分離，經(jīng)不同的檢測器檢測掃描繪出氣相色譜圖，通過保留時(shí)間來定性，通過峰或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)