中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程-文庫吧
2025-02-11 12:30 本頁面
【正文】 相l(xiāng) 反相色譜系統(tǒng)的流動相首選甲醇 水系統(tǒng)（采用紫外末端波長檢測時，首選乙腈 水系統(tǒng)），如經(jīng)試用不合適時，再選用其他溶劑系統(tǒng)。應(yīng)盡可能少用含有緩沖液的流動相，必須使用時，應(yīng)盡可能選用含較低濃度緩沖液的流動相。由于 C18鏈在水相環(huán)境中不易保持伸展?fàn)顟B(tài)，故對于十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的反相色譜系統(tǒng)，流動相中有機溶劑的比例通常應(yīng)不低于 5%，否則 C18鏈的隨機卷曲將導(dǎo)致組分保留值變化，造成色譜系統(tǒng)不穩(wěn)定。 l 各品種項下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組成、檢測器類型不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組成的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以適應(yīng)供試品并達到系統(tǒng)適用性試驗的要求。其中，調(diào)整流動相組分比例時，以組分比例較低者（小于或等于 50%）相對于自身的改變量不超過 177。30%且相對于總量的改變量不超過177。10%為限，如 30%相對改變量的數(shù)值超過總量的 10%時，則改變量以總量的177。10%為限。 l 對于必須使用特定牌號的填充劑方能滿足分離要求的品種，可在該品種項下注明。系統(tǒng)適用性試驗l 色譜系統(tǒng)的適用性試驗通常包括理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個參數(shù)。其中，分離度和重復(fù)性尤為重要。 l 按各品種項下要求對色譜系統(tǒng)進行適用性試驗，即用規(guī)定的對照品溶液或系統(tǒng)適用性試驗溶液在規(guī)定的色譜系統(tǒng)進行試驗，必要時，可對色譜系統(tǒng)進行調(diào)整，以符合要求。 色譜柱的理論板數(shù) (n)。 l 用于評價色譜柱的分離效能。由于不同物質(zhì)在同一色譜柱上的色譜行為不同，采用理論板數(shù)作為衡量柱效能的指標(biāo)時，應(yīng)指明測定物質(zhì)，一般為待測組分或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的理論板數(shù)。l 在規(guī)定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分峰或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的保留時間 t R（以分鐘或長度計，下同，但應(yīng)取相同單位）和峰寬（ W）半峰高寬（ Wh/2 ），按 n＝ 16(t R/W)2或 n=(tR/Wh/2)2計算色譜柱的理論板數(shù)。 分離度（ R） l 用于評價待測組分與相鄰共存物或難分離物質(zhì)之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)效能的關(guān)鍵指標(biāo)。可以通過測定待測物質(zhì)與已知雜質(zhì)的分離度，也可以通過測定待測組分與某一添加的指標(biāo)性成分（內(nèi)標(biāo)物質(zhì)或其他難分離物質(zhì)）的分離度，或?qū)⒐┰嚻坊驅(qū)φ掌酚眠m當(dāng)?shù)姆椒ń到?，通過測定待測組分與某一降解產(chǎn)物的分離度，對色譜系統(tǒng)進行評價與控制。 l 無論是定性鑒別還是定量分析，均要求待測峰與其他峰、內(nèi)標(biāo)峰或特定的雜質(zhì)對照峰之間有較好的分離度。除另有規(guī)定外，待測組分與相鄰共存物之間的分離度應(yīng)大于 。 重復(fù)性 l 用于評價連續(xù)進樣后，色譜系統(tǒng)響應(yīng)值的重復(fù)性能。采用外標(biāo)法時，通常取各品種項下的對照品溶液，連續(xù)進樣 5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測量值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于 ％；采用內(nèi)標(biāo)法時，通常配制相當(dāng)于 80％、 100％和 120％的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成 3種不同濃度的溶液，分別至少進樣 2次，計算平均校正因子，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差也應(yīng)不大于 ％。 拖尾因子（ T） l 用于評價色譜峰的對稱性。為保證分離效果和測量精度，應(yīng)檢查待測峰的拖尾因子是否符合各品種項下的規(guī)定。拖尾因子計算公式為： T＝ l 式中 , 為 5%峰高處的峰寬； d1為 5%峰高出峰頂點至峰前沿之間的距離。l 除另有規(guī)定外，峰高法定量時 T應(yīng)在 ～ 。
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