21三體綜合征產(chǎn)前診斷滿分-文庫吧
2025-02-11 11:15 本頁面
【正文】 外培養(yǎng)后通過 G顯帶實驗進行核型分析，判斷染色體是否畸形，診斷是否患有 21三體綜合征。 ? 2. G顯帶是指以 Giemsa 染料染色后，使染色體顯帶的技術(shù)。 Giemsa染料是由噻嗪和曙紅組成的，著色時 DNA先于 2個噻嗪分子結(jié)合，然后再與一個曙紅分子結(jié)合，形成沉淀物，而 DNA的某些部位對染料不敏感，由此形成明暗相間的條帶。 三、實驗材料、試劑及器材 ? （ 1）器材：離心管，離心機，天平， 37℃溫箱，載玻片，蓋玻片，恒溫水浴鍋，光學(xué)顯微鏡，標本板，玻璃鉛筆，定時鐘，染色缸，直柄虹膜鑷，滴管。 ? （ 2）藥品： PBS， Giemsa，%胰蛋白酶（取 %氯化鈉 100ml，加 %胰蛋白酶 1ml）。 四、實驗步驟 取材 ↓ 體外細胞培養(yǎng) ↓ 制片 ↓ 顯帶 ↓ 核型分析 取材 腹部備皮，排光膀胱，平臥位常規(guī)消毒后鋪無菌洞巾。 麻醉，一般不必需要，精神緊張者或可用普魯卡因或利多卡因麻醉。 取材 選擇穿刺部位，經(jīng) B超胎盤定位后避開胎盤。 中期妊娠時，一般選擇在恥骨聯(lián)合上 3橫指相當于子宮下段處，于腹中線或其左右側(cè)旁，捫及囊樣感的部位做穿刺；也可于宮底與恥骨聯(lián)合連線中點或左右任何一側(cè)穿刺。 晚期妊娠時，先捫清胎先露，然后上推先露部，在先露部下方穿刺；也可在胎兒頸背部空隙處或胎兒肢體側(cè)空隙處穿刺。 取材 確定穿刺部位后，以 20～ 21號腰椎穿刺針垂直刺入腹壁，通過腹壁及宮壁兩次阻力，當有落空感時即進入羊膜腔，抽出芯針，見羊水溢出，接上注射器，順利抽得清亮羊水，再次證實在羊膜腔內(nèi)后，可注射藥物。如欲做羊水檢查，則抽取羊水 20ml立即送檢。 穿刺完畢后拔出穿刺針，局部壓迫 5分鐘，穿刺部位敷以無菌紗布，膠布固定。 四、實驗步驟 取材 ↓ 體外細胞培養(yǎng) ↓ 制片 ↓ 顯帶 ↓ 核型分析 細胞體外培養(yǎng) ? 無菌超凈臺上將羊水注入 50ml無菌離心管內(nèi)， 1500r/min常溫離心 10min，移去上清，留約 ，槍尖混勻，分裝吸取至3個 60mm培養(yǎng)皿（ falcon），每皿添加 4ml羊水完全培養(yǎng)基， 37℃ 5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 67d。 四、實驗步驟 取材 ↓ 體外細胞培養(yǎng) ↓ 制片 ↓ 顯帶 ↓ 核型分析 制片 ? 培養(yǎng) 6
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