【正文】 COO負離子，為 兩性電解質 。 調(diào)節(jié)氨基酸溶液的 pH，使氨基酸分子上的 — NH3 +基和 — COO基的解離程度完全相等時，即所帶凈電荷為零，此時氨基酸所處溶液的 pH值稱為該氨基酸的等電點 （ pI）。 H3N— CH— COOH R + 在酸性溶液中的 氨基酸 （ pH＜ pI） H3N— CH— COO R + 在晶體狀態(tài)或水溶液中的氨基酸（ pH=pI） H2N— CH— COO R 在堿性溶液中的氨基酸 （ pH＞ pI） 等電點的含義 ：當氨基酸在其某一 PH值時，氨基酸所帶正電荷和負電荷相等，即凈電荷為零，此時的 PH值成為氨基酸的等電點，用 PI表示。氨基酸在等電點時主要以偶極離子形式存在。 ： 凈電荷數(shù)等于零，在電場中不移動； 此時氨基酸的溶解度最小。 氨基酸等電點的確定： 酸堿滴定 根據(jù) pK值（該基團在此 pH一半解離）計算： 等電點等于兩性離子兩側 pK值的算術平均數(shù)。 pI = ———— pK1+pK2 2 或（ pI = ———— ） pK2+pK3 2 2 4 6 8 10 12 14 OH加入的當量 pH pK1 pI pK2 （ 3） （ 2） （ 1） Gly的滴定曲線 OH OH +H3N— C— COOH H H （ 1） +H3N— C— COO H H （ 2） H2N— C— COO H H （ 3） Gly解離作用 （三） 化學性質 （ 1）與茚三酮的反應 ： Pro產(chǎn)生黃色物質，其它為藍紫色。在 570nm（藍紫色）或 440nm（黃色）定量測定（幾 μ g）。 （ 2）與甲醛的反應 ：氨基酸的甲醛滴定法 R— CH— COO NH3+ R— CH— COO NH2 + H+ OH 中和滴定 HCHO R— CH— COO NHCH2OH HCHO R— CH— COO N(CH2OH)2 （ 3）與 2,4二硝基氟苯 (DNFB)的反應 NO2 F O2N + HN— CH— COOH R NO2 O2N HN— CH— COOH R + HF 弱堿性 DNP氨基酸 H2N— CH— COOH + R N CH3 CH3 O=S=O Cl 5二甲氨基萘磺酰氯（ DNSCl） pH9.7 40℃ N CH3 CH3 O=S=O HN— CH— COOH R DNS氨基酸 取代 DNFB測定蛋白質 N端氨基酸，靈敏度高 （ 4）與異硫氰酸苯酯（ PITC）的反應 — N=C=S + N— CH— COOH H H R PITC — N— C— N— CH— COOH H H R S PTC氨基酸 — N— C H R S N C C O PTH氨基酸 無水 HF 重復測定多肽鏈 N端氨基酸排列順序，設計出“多肽順序自動分析儀 ” （ 5）成鹽反應 R— CH— COOH + HCl NH2 R— CH— COOH NH2HCl （ 6）?；蜔N基化反應 R— CH— COOH + R X ′ NH2 R =酰基或烴基 ′ R— CH— COOH + HX ′ NHR X =鹵素（ Cl、 F） （ 7）成酯反應 R— CH— COOH + C2H5OH NH2 R— CH— COOC2H5 NH2 HCl氣 當羧基變成乙酯后，羧基的化學性質就被掩蔽了，而氨基的化學性質就突出地顯示出來。 （ 8）酰氯化反應 Y— NH— CRH— COOH + PCl5 ?；被? Y— NH— CRH— COCl ?；被Ｂ? 使氨基酸的羧基活化，易于另一氨基酸的氨基結合，在合成肽的工作上常用。 （ 9）成酰胺反應 H2N— CHR— COOC2H5 + HNH2 體外 無水 H2N— CHR— CONH2 +C2H5OH 氨基酸酰胺 有機體內(nèi)： Asp（ Glu） +NH4+ Asn（ Gln） Asn（ Gln）合成酶 ATP （ 10）脫羧反應 H2N— CHR— COOH 脫羧酶 CO2 + RCH2NH2 胺 （ 11）迭氮反應 H2NCHRCOOH YHNCHRCOOH ?；被? YHNCHRCOOCH3 ?；被峒柞? NH2NH2 （ CH3OH） YHN— CHR— CO— NH— NH2 酰化氨基酸的肼衍生物 HNO2 YHN— CHR— CON3 + 2H2O ?；被岬? 第三節(jié) 肽 一、肽 一個氨基酸的 α羧基和另一個氨基酸的 α氨基 脫水縮合 而成的化合物。 氨基酸之間脫水后形成的鍵稱 肽鍵（酰胺鍵） 。 . 肽鍵 ?肽鍵的特點是氮原子上的孤對電子與羰基具有明顯的共軛作用。 ?組成肽鍵的原子處于同一平面。 肽鍵中的 CN鍵具有部分雙鍵性質，不能自由旋轉。 在大多數(shù)情況下，以反式結構存在。 當兩個氨基酸通過肽鍵相互連接形成二肽，在一端仍然有游離的氨基和另一端有游離的羧基，每一端連接更多的氨基酸。氨基酸能以肽鍵相互連接形成長的、不帶支鏈的寡肽（ 25個氨基酸殘基以下）和多肽（多于 25個氨基酸殘基）。多肽仍然有游離的 α氨基和 α羧基。 少于 10AA成為 寡肽 ，多于 10AA成為 多肽 或聚肽。 分子量大于 10000d稱為 蛋白質 ，小于 10000d稱為多肽。 ? 在生物體中，多肽最重要的存在形式是作為蛋白質的亞單位。 ? 但是，也有許多分子量比較小的多肽以游離狀態(tài)存在。這類多肽通常都具有特殊的生理功能，常稱為 活性肽 。 ? 如： 腦啡肽；激素類多肽；抗生素類多肽；谷胱甘肽；蛇毒多肽 等。 （一）谷光甘肽（ GSH） H2NCHCH2CH2CO— COOH γGlu NHCHCO— CH2 SH Cys NHCH2COOH Gly 2GSH GSSG （二）催產(chǎn)素和升壓素 均為 9肽，第 3位和第 9位氨基酸不同。催產(chǎn)素使子宮和乳腺平滑肌收縮，具有催產(chǎn)和促使乳腺排乳作用。 升壓素 促進血管平滑肌收縮，升高血壓，減少排尿。 （三）促腎上腺皮質激素（ ACTH） 39肽，活性部位為第 4~10位的 7肽片段： MetGluHisPheArgTrpGly。 （四）腦肽 腦啡肽具有強烈的鎮(zhèn)痛作用（強于嗎啡），不上癮 。 Met腦啡肽 TyrGlyGlyPheMet Leu腦啡肽 TyrGlyGlyPheLeu β內(nèi)啡肽（ 31肽）具有較強的嗎啡樣活性與鎮(zhèn)痛作用。 （五）胰高血糖素 由胰島 α細胞分泌（ β細胞分泌胰島素）， 29肽。胰高血糖素調(diào)節(jié) 維持血糖濃度。 第四節(jié) 蛋白質的結構與功能的關系 蛋白質是由一條或多條多肽 (polypeptide) 鏈以特殊方式結合而成的生物大分子。 蛋白質與多肽并無嚴格的界線，通常是將分子量在 6000道爾頓以上的多肽稱為蛋白質。 蛋白質分子量變化范圍很大 , 從大約 6000到1000000道爾頓甚至更大。 蛋白質是氨基酸以肽鍵相互連接的線性序列。在蛋白質中，多肽鏈折疊形成特殊的形狀 （構象）（ conformation） 。在結構中，這種構象是原子的三維排列，由氨基酸序列決定。蛋白質有 四種 結構層次： 一級結構primary）， 二級結構 （ secondary）， 三級結構 （ tertiary）和 四級結構 （ quaternary）（不總是有）。 一、穩(wěn)定蛋白質的作用力 共價鍵 次級鍵 化學鍵 肽鍵 一級結構 氫鍵 二硫鍵 二、三、四級結構 疏水鍵 鹽鍵 范德華力 三、四級結構 蛋白質分子中的共價鍵與次級鍵 二硫鍵 一、共價鍵 ? 蛋白質分子中的共價鍵有 肽鍵和二硫鍵 。是生物大分子分子之間最強的作用力，化學物質（藥物、毒物等）可以與生物大分子（受體蛋白或核酸）構成共價鍵，共價鍵除非被體內(nèi)的特異性酶催化斷裂以外，很難恢復原形，是不可逆過程，對酶來講就是不可逆抑制作用。 二、非共價鍵 ? 生物體系中分子識別的過程不僅涉及到化學鍵的形成 ， 而且具有選擇性的識別 。 共價鍵存在于一個分子或多個分子的原子之間 ， 決定分子的基本結構 ， 是分子識別的一種方式 。 ? 而非共價鍵 （ 又稱為 次級鍵或分子間力 ）決定生物大分子和分子復合物的 高級結構 ，在分子識別中起著關鍵的作用 。 ? 靜電作用是