現(xiàn)代五分類血細胞分析儀的原理及使用-文庫吧
2025-07-31 22:53 本頁面
【正文】 Bayer公司的的 DVIA120型和 2120型血細胞分析儀、 Sysmex公司的 SF3000型、邁瑞的 BC5500血細胞分析儀均采用了該原理進行工作。 ? 利用激光散射和過氧化物酶染色技術(shù)進行細胞分類。利用光散射的原理計數(shù)血細胞 ,因細胞表面結(jié)構(gòu)不同 ,在不同角度上散射光有差別 ,有助于對白細胞的區(qū)分。 ? 白細胞化學(xué)染色 ? 在稀釋液中加入過氧化酶 (MPO)的底物及顯色劑 ,根據(jù)白細胞對 MPO的反應(yīng)分類。中性細胞 MPO為強陽性 ,嗜酸性細胞陽性更強 ,單核細胞為弱陽性 ,淋巴細胞陰性 ,嗜堿性細胞亦為陰性 ,故綜合光散射和細胞化學(xué)染色的特點 , 可得到二維或三維圖像 不同顏色的散點圖。由于嗜堿性細胞不含此酶 ,不能被檢測 ,因此一些儀器專門設(shè)置了嗜堿性細胞檢測系統(tǒng) ,它的測量通道采用時間差的方法 ,與 RBC、PLT的測量系統(tǒng)共用一個通道。 （ 3）電阻抗和射頻電導(dǎo)聯(lián)合檢測法 ? 這種方法是分別采用四個檢測系統(tǒng)來檢測不同類型的細胞 ? ①淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統(tǒng) :在細胞懸浮液中加入溶血劑使紅細胞溶解 ,而使白細胞保持完整細胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài) ,當這些細胞通過檢測系統(tǒng)時 ,對白細胞進行電阻抗法 (測量細胞體積 )和射頻電導(dǎo)法 (檢測細胞核和顆粒密度 )的聯(lián)合檢測 ,結(jié)果將細胞分成淋巴細胞、單核細和中性粒細胞三個群體。 ? ② 嗜酸性細胞和嗜堿性細胞兩種檢測系統(tǒng) :在細胞懸浮液中加入特殊的溶血劑 ,除嗜酸性細胞和嗜堿性細胞外 ,其他細胞均被溶解或萎縮再對保持完整的嗜酸性細胞或嗜堿性細胞進行計數(shù)。 ? ③幼稚細胞檢測系統(tǒng) :在細胞懸浮液中加入硫化氨基酸 ,由于占位不同 ,結(jié)合在幼稚細胞的氨基酸比成熟細胞多 ,且對溶血劑有抵抗作用 ,當加入溶血劑時 ,成熟細胞被溶解 ,只保留著可能存在的幼稚細胞用來計數(shù)。Sysmex公司的 SE9000血細胞分析儀就是采用這種方法進行五分類的。 電阻抗與射頻法能透入細胞內(nèi) ， 測量核的大小及顆粒的多少 。 RF:射頻電流 細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息 DC:直流電 細胞大小的信息 （ 4） 多角度激光偏振光散射檢測法 ? 儀器使用鞘流液將標本血稀釋 ,稀釋后白細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài) ,只有嗜堿性細胞由于其吸濕的特性而使細胞結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細胞內(nèi)的血紅蛋白在高滲透壓的作用下 ,從細胞中分離出來。而鞘流的水分則進入紅細胞內(nèi) ,使細胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整 ,它與鞘流的折光系數(shù)相同 ,不影響白細胞的檢測。儀器同時從四個角度來檢測通過激光束的細胞所產(chǎn)生的散射光 ,因為細胞大小、折射指數(shù)、核形、核漿比率以及顆粒性質(zhì)等 ,均可影響在不同角度測得的散射光量。 0176。 ：前角光散射 （ 1176。 ～ 3176。 ） ， 可粗略測定細胞大小 。 10176。 ：狹角光散射 （ 7176。 ～ 11176。 ） ， 可測定細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)相對特征 。 90176。 ：垂直光散射 （ 70176。 ～ 110176。 ） ， 測定細胞核分葉情況 。 90176。 ：消偏振光散射 （ 70176。 ～ 110176。 ） ，區(qū)分嗜酸性粒細胞與其他細胞 。 ? 值得一提的是市面上偶見假五分類血球儀。假五分類血球儀則不用上述原理分析血細胞成分 ,更多的使用電腦軟件的分析而得出五分類結(jié)果。分辨是否真五分類技術(shù)的血球儀，如果是試劑法 ,試劑不應(yīng)該少于四種 ,如果是激光法 ,試劑不少于三種。 三、五分類血細胞分析儀的使用 ? 自動進樣 ? 手工進樣 ? 末梢血、靜脈血的可選性 ? 結(jié)果的判斷 ? 質(zhì)量控制 ? 儀器的校準 準品的來源、什么情況下需要校準？如何校準？ ? 儀器的維護 標本的重要性 ? 高檔的儀器并不意味著結(jié)果一定可靠。 ? 標本的采集直接關(guān)系到結(jié)果的準確性。 ? 壓脈帶的使用時間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標本放置的溫度和時間、標本的混勻等等。 檢驗報告的審核 ? 當日質(zhì)控是否在控。 ? 比較報告各參數(shù)之間是否有矛盾。 ? 注意觀察多個測定標本相關(guān)參數(shù)是否有一致的系統(tǒng)誤差。 ? 報告與臨床是否符合，不符合時可能存在的原因。如 PLT過低、過高。 ? 什么樣的結(jié)果必須手工復(fù)查？如何復(fù)查？復(fù)查完畢后的報告簽發(fā)模式。 ? 直方圖、散點圖的利用。 血細胞自動分析異常結(jié)果人工顯微鏡復(fù)檢 ? 鏡檢復(fù)核的現(xiàn)狀 ? 血細胞分析儀仍只能作為 CBC 分析的一種過篩手段 ，當遇到可疑情況 ，尤其是在病理條件下 ，其測定結(jié)果并不可靠 ，需要人工以顯微鏡復(fù)查 ，這已是不爭的事實 。但是 ，國內(nèi)目前各醫(yī)院檢驗科對 CBC異常結(jié)果基不或很少進行人工顯微鏡復(fù)查 ，這種現(xiàn)象在經(jīng)濟發(fā)達的沿海地區(qū)更是普遍 。有資料顯示 ，國內(nèi)各醫(yī)院 CBC實際鏡檢率在 0% ～ 15% ，大部分醫(yī)院鏡檢率 5%或者不鏡檢 。這種現(xiàn)象引發(fā)了不少的醫(yī)療投訴 、糾紛或事故 。分析這類題出現(xiàn)的原因可能有 : (1)認識不夠 ，認為血細胞分析儀尤其是五分群的血細胞分析儀的檢測結(jié)果可靠 ，不需要復(fù)查 ； ( 2)工作量大 ； ( 3 )怕麻煩 ，圖省事 ； ( 4 )目前沒有一個可參照的執(zhí)行標準 ，即對 CBC結(jié)果的人工復(fù)查的標準 、內(nèi)容 、方法及程序尚無明確的規(guī)定 。 ? 需要鏡檢的標準 ? 目前即使是最先進的血細胞分析儀也不能完全取代人工鏡下白細胞
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