【正文】 系統(tǒng)的選擇和性能確認(rèn)、室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制、實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)等內(nèi)容，是決定檢驗(yàn)結(jié)果正確、可靠的關(guān)鍵，也是臨床免疫檢測(cè)質(zhì)量保證的核心。 13 一、工作人員培訓(xùn) ? 臨床免疫檢驗(yàn)的項(xiàng)目廣泛，檢測(cè)技術(shù)眾多，既包括手工操作，又包括自動(dòng)化儀器操作，要求工作人員具有一定的技術(shù)知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)。特別是采用手工操作的檢測(cè)項(xiàng)目，不同的工作人員的操作及結(jié)果判斷的主觀性往往導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的差異。因此，為了使工作人員具備進(jìn)行臨床免疫檢驗(yàn)的相關(guān)技能，根據(jù)實(shí)際工作的需要，建立定期培訓(xùn)計(jì)劃，保證工作人員的技能滿足臨床免疫檢驗(yàn)的需要。 14 二、檢測(cè)系統(tǒng)性能的確認(rèn) ? 檢測(cè)系統(tǒng)定義 是指完成一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的測(cè)定所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、耗材 等 的組合。 15 ? 臨床免疫檢驗(yàn)中使用的檢測(cè)系統(tǒng)的好壞，將直接影響檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。在將確定的檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用到臨床前，需要通過(guò)評(píng)估來(lái)判斷該檢測(cè)系統(tǒng)的性能是否符合廠家申明，是否符合臨床要求。臨床免疫檢測(cè)系統(tǒng)性能的評(píng)估內(nèi)容至少包括 精密度（ 批內(nèi)、批間）、 準(zhǔn)確度 、分析測(cè)量范圍、臨床可報(bào)告范圍、參考區(qū)間驗(yàn)證等內(nèi)容。必要時(shí)，針對(duì)某些特殊項(xiàng)目，如促甲狀腺激素 (TSH)、肌鈣蛋白 I(Tnl)等，還需要確定檢測(cè)系統(tǒng)的 分析靈敏度。 16 三、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 (standard operation procedure， SOP)的建立 ? 在免疫測(cè)定中，試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色（或測(cè)定信號(hào)激發(fā)）和測(cè)定等每一步驟均可能對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生較大影響。確保檢測(cè)結(jié)果可靠性首先考慮的是改善測(cè)定精密度，因此必須著重在最不精密的步驟上。為此，需要將每個(gè)操作步驟標(biāo)準(zhǔn)化并形成 SOP。所有的實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員在進(jìn)行相關(guān)測(cè)定時(shí)，必須嚴(yán)格按相應(yīng)的 SOP進(jìn)行操作。根據(jù)衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)， SOP內(nèi)容應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)原理或檢驗(yàn)?zāi)康摹?biāo)本種類(lèi)及收集要求、操作步驟（試劑準(zhǔn)備、加樣、孵育時(shí)間、孵育方式、顯色時(shí)間等）、計(jì)算方法、參考范圍、臨床意義、操作注意事項(xiàng)、參考資料等內(nèi)容。對(duì)于儀器的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序也有相應(yīng)的要求。 17 四、標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源 ? （一）標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn) ? 所謂標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)，是指將標(biāo)定了分析物濃度的定標(biāo)品在檢測(cè)系統(tǒng)上檢測(cè)并獲得分析物濃度高低與檢測(cè)設(shè)備信號(hào)強(qiáng)弱之間關(guān)系的步驟。進(jìn)行校準(zhǔn)的目的是為了實(shí)現(xiàn)待檢物質(zhì)的定量檢測(cè)，因此，校準(zhǔn)是針對(duì)定量檢測(cè)設(shè)備而言的，定性和半定量檢測(cè)不存在校準(zhǔn)的概念。 ? 在下列情況時(shí)，需要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校正：①標(biāo)準(zhǔn)曲線過(guò)期；②在新批號(hào)試劑使用前；③儀器相關(guān)部位經(jīng)過(guò)較大維修、配件更換或緩沖液等試劑的升級(jí)。值得一提的是，室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果超出范圍時(shí)，并不需要在第一時(shí)間進(jìn)行校準(zhǔn)，只有在排除其他可能，并確認(rèn)可能是由于標(biāo)準(zhǔn)曲線漂移而導(dǎo)致的失控的情況下才需要重新校準(zhǔn)。 18 （二）標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源 ? 標(biāo)準(zhǔn)品的特性應(yīng)該清楚明確，理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)該是純品，但如特定分析物質(zhì)具有同種型不均一性，則相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品也應(yīng)具備這種特點(diǎn)。這種要求通常難以滿足，因?yàn)樵诩兓^(guò)程中，使用生化方法去除雜質(zhì)會(huì)引起特定物質(zhì)同種型的少量丟失。而使用免疫親和層析純化，則由于洗滌過(guò)程常需在低 pH變性條件下進(jìn)行，有可能會(huì)引起某些蛋白的不可逆修飾?；蛑亟M蛋白，一是表達(dá)產(chǎn)物仍需純化和糖基化，二是糖基化可能與天然蛋白有所不同。目前，真正具有國(guó)際參考物質(zhì)的免疫測(cè)定項(xiàng)目并不多，國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì) (National Committee of Clinical Laboratory Standardisation， NCCLS)以及美國(guó)和加拿大臨床化學(xué)協(xié)會(huì)(American Societies for Clinical Chemistry and Canadian Societies for ClinicalChemistry and Canadian， AACC和CSCC)等正致力于免疫測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化工作，這些組織也制備一些標(biāo)準(zhǔn)品。 19 理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)具備的特征 1．標(biāo)準(zhǔn)品的基質(zhì)通常為含蛋白的緩沖溶液，對(duì)測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯影響。 ? 2．對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度一般無(wú)特殊要求，在方法的測(cè)定范圍內(nèi)即可。 ? 3．保持穩(wěn)定性，在一定時(shí)間內(nèi)，在規(guī)定的保存條件下應(yīng)有良好的穩(wěn)定性。 ? 4．無(wú)己知的傳染危險(xiǎn)性，對(duì)已知的經(jīng)血液傳播的病原體如 HIV、 HCV和 HBV等必須作滅活處理。 ? 5．靶值或預(yù)期結(jié)果已定。 20 21 22 應(yīng)選用制造商提供了溯源性 的產(chǎn)品 ? 為保證臨床免疫檢測(cè)結(jié)果的可比性，針對(duì)已建立國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)項(xiàng)目，應(yīng)要求所選用檢測(cè)系統(tǒng)的制造商提供溯源性文件，即證明通過(guò)該檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)校準(zhǔn)品可逐級(jí)溯源到國(guó)際參考物質(zhì) (international reference material)。通常國(guó)際參考物質(zhì)為一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品則為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，可溯源至一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)可用來(lái)維持校準(zhǔn)。三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品則通過(guò)與二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的比對(duì)而來(lái)，為通常使用的商品校準(zhǔn)品。 ? 從一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的值傳遞到最終試驗(yàn)所使用的校準(zhǔn)物的過(guò)程通常由幾個(gè)校準(zhǔn)步驟組成，包括標(biāo)準(zhǔn)品和測(cè)定方法、緩沖液及其基質(zhì)、稀釋的控制、最終結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)價(jià)和質(zhì)量控制等。不同的分析物如血清蛋白、多肽激素或與載體蛋白結(jié)合的低分子量激素等其校準(zhǔn)過(guò)程有所不同。 ? 標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源模式圖見(jiàn)圖 191。 23 校準(zhǔn)品值溯源模式圖 24 室內(nèi)質(zhì)量控制（ Internal Quality Control,IQC) 由實(shí)驗(yàn)室人員采取一定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性程度，旨在監(jiān)測(cè)和控制本室常規(guī)工作的精密度，提高本室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗(yàn)的一致性。并確定當(dāng)批的