動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)-文庫(kù)吧
2025-07-20 15:15 本頁(yè)面
【正文】 子或塑料離心管等物品應(yīng)擰松蓋子，包裝消毒后再擰緊。 為防止已消毒品和未消毒品發(fā)生混淆，應(yīng)在包裝盒或包裝紙的表面注以符號(hào)或?qū)懮献帧埃?“＋”。（二）器皿的消毒濕熱消毒即高壓蒸汽消毒：布類、膠塞、金屬器械、玻璃器皿以及某些培養(yǎng)用液等都可用此方法消毒滅菌。消毒時(shí)間是從壓力達(dá)到15磅，溫度達(dá)到121℃時(shí)算起。一般蒸氣消毒30分鐘。橡皮手套和儲(chǔ)在小瓶?jī)?nèi)的溶液都不應(yīng)超過(guò)15分鐘。消毒后，調(diào)節(jié)活塞使壓力在7分鐘左右均勻地下降到零。這樣能使任何可能存在的液體得以與周圍蒸氣以相同的速度散熱，而不至于激烈的沸騰。三．溶液配制：（一）DMEM培養(yǎng)液取一包DMEM試劑（）溶于800ml雙蒸水中，,雙蒸水定容至1L，攪拌均勻，等待過(guò)濾除菌。（二）胰蛋白酶液 胰蛋白酶是一種黃白色粉末，水解蛋白質(zhì)時(shí)作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽健，除去細(xì)胞間粘蛋白及糖蛋白，影響細(xì)胞骨架．從而使細(xì)胞分離。胰蛋白酶的活力是用解離酪蛋白的能力表示的，常用的有1：125和1:250兩種,即1份胰蛋白酶能解離125份或250份酪蛋白。不同的細(xì)胞對(duì)胰蛋白酶液的濃度、作用溫度和作用時(shí)間等要求也不一樣。一般來(lái)說(shuō)，濃度越大、溫度越高、作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞的分離能力也越大，但超過(guò)一定限度就會(huì)損傷細(xì)胞。％，作用溫度37℃或室溫。Ca2+ Mg2+和血清的存在都會(huì)降低其活力。％胰蛋白酶液的配制方法如下，攪拌均勻，等待過(guò)濾除菌（三）Hanks液（已提前配制好），等待過(guò)濾除菌四．過(guò)濾除菌及分裝注射器安裝濾器，吸取各類試劑后分裝至相應(yīng)瓶中五
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