翻譯好的羅氏公司tunel試劑盒操作說明書-文庫吧
2025-07-19 06:32 本頁面
【正文】 ris/HCl，pH ）或細胞通透液（% Triton X100 % 檸檬酸鈉，臨用前配制）、蘇木素或甲基綠、DNase 1（3000 U/ml– 3 U/ml in 50 mM TrisHCl，pH ， 10 mM MgCl2，1 mg/ml BSA）等。三、 實驗步驟操作流程圖：制作石蠟切片→脫蠟、水合→細胞通透→加TUNEL反應液→加converterPOD→與底物DAB反應顯色→光學顯微鏡計數(shù)并拍照。具體操作步驟（石蠟包埋切片的檢測）：1. 用二甲苯浸洗2次，每次5min；2. 用梯度乙醇（100、990、80、70%）各浸洗1次，每次3min；注：上面兩步是針對石蠟切片樣本的處理4. 用Proteinase K工作液處理組織1530 min 在21–37176。C（溫度、時間、濃度均需摸索）如果凋亡細胞染色較弱時，可用高濃度的Proteinase K（400μg/mL）處理5 分鐘。其它替代方法： 石蠟切片的預處理也可根椐實際情況可采用下述三種替代方法之一，即蛋白酶K 處理的步聚改用下述方法，其余步聚均相同：替代方法 1: 將脫蠟及水合好的切片浸入通透液中810 min（通透液：%TritonX100 %檸檬酸鈉，需新鮮配制）替代方法 2： 將脫蠟及水合好的切片浸入胃蛋白酶或胰蛋白酶中810 min（胃蛋白酶：%%溶于HCl PH2，%% HCl ）替代方法 3: 將脫蠟及水合好的切片浸入含200ml 的檸檬酸緩沖液PH 6 的塑料盒中，置于微波爐中350W（低檔）處理5 min。5. PBS漂洗2次；6. 制備TUNEL反應混合液：處理組用50μl 1號液+450μl 2號液混勻；而陰性對照組僅加50μl 2號液，陽性對照組先加入100μl DNase 1，反應在15~25℃10min，后面
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