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微生物發(fā)酵產(chǎn)酶-文庫吧

2025-07-07 04:26 本頁面


【正文】 型 ( 4)滯后合成型 通過分析比較細(xì)胞生長與酶產(chǎn)生的關(guān)系 , 可以把酶的 生物合成的模式分為 4種類型: 同步合成型 ?酶的生物合成與細(xì)胞的生長 同步進(jìn)行 ,又稱生長偶聯(lián)型。大部分組成酶和部分誘導(dǎo)酶的生物合成屬于同步合成型。 特點: ( 1)發(fā)酵開始,細(xì)胞生長,酶也開始合成,說明 不受分解代謝物和終產(chǎn)物阻遏 。 ( 2)生長至平衡期后,酶濃度不再增長,說明 mRNA很不穩(wěn)定 。 時間 (h) 濃度 細(xì)胞濃度 酶濃度 中期合成型 ?酶的合成在 細(xì)胞生長一段時間以后才開始 ,而在細(xì)胞生長進(jìn)入平衡期后,酶的合成也停止。 特點: ( 1)該類酶的合成 受分解代謝物阻遏 。 ( 2)該酶對應(yīng)的 mRNA不穩(wěn)定 。 濃度 酶濃度 細(xì)胞濃度 時間 (h) 延續(xù)合成型 ?酶的合成伴隨著細(xì)胞生長而開始,但在細(xì)胞進(jìn)入 平衡期后 ,酶還可以 延續(xù)合成 較長的一段時間。 特點: ( 1)該類酶 不受分解代謝產(chǎn)物阻遏 和 終產(chǎn)物阻遏 。 ( 2)該酶對應(yīng)的 mRNA是相當(dāng)穩(wěn)定 的。 時間 (h) 濃度 細(xì)胞濃度 酶濃度 滯后合成型 ?只有當(dāng)細(xì)胞生長一段時間或者進(jìn)入平衡期以后, 酶才開始合成并大量積累。 許多水解酶的生物合成都屬于這一類型。 特點: ( 1)該類酶 受分解代謝物阻遏 作用的影響,阻遏解除后,酶才大量合成。 ( 2)該酶對應(yīng)的 mRNA穩(wěn)定性高 。 時間 (h) 濃度 酶濃度 細(xì)胞濃度 屬于滯后合成型的酶,之所以要在細(xì)胞生長一段時間甚至進(jìn)入平衡期以后才開始合成,主要原因是 由于受到培養(yǎng)基中存在的阻遏物的阻遏作用。只有隨著細(xì)胞的生長,阻遏物幾乎被細(xì)胞用完而使阻遏解除后,酶才開始大量合成。 若培養(yǎng)基中不存在阻遏物,該酶的合成可以轉(zhuǎn)為延續(xù)合成型。該類型酶所對應(yīng)的 mRNA穩(wěn)定性很好,可以在細(xì)胞生長進(jìn)入平衡期后的相當(dāng)長的一段時間內(nèi),繼續(xù)進(jìn)行酶的生物合成。 同步合成型 中間合成型 延續(xù)合成型 滯后合成型 酶合成起始時間 酶合成停止時間 產(chǎn)酶與生長相關(guān)特點 生長與酶合成偶聯(lián)度 酶 mRNA穩(wěn)定性 酶生物合成與生長關(guān)聯(lián)式比較 生長開始 對數(shù)期 生長開始 平衡期 衰亡期 平衡期后 平衡期 平衡期 同起同停 晚起晚停 同起晚停 晚起同停 非偶聯(lián) 過渡 偶聯(lián) 緊密偶聯(lián) 很穩(wěn)定 較穩(wěn)定 不穩(wěn)定 不穩(wěn)定 小結(jié): ?影響酶生物合成模式的 主要因素 :培養(yǎng)基中 阻遏物的存在 和mRNA的穩(wěn)定性 。 ( 1) 不受 培養(yǎng)基中某種物質(zhì) 阻遏 時,可隨著細(xì)胞生長而開始合成; 受阻遏的酶 ,要在細(xì)胞生長一段時間或進(jìn)入平衡期后,解除阻遏,酶才開始合成。 ( 2) mRNA穩(wěn)定性高 的,可在細(xì)胞停止生長后繼續(xù)合成其對應(yīng)的酶; 穩(wěn)定性差的 ,隨著細(xì)胞生長停止而終止酶的合成。 選擇 :在酶的工業(yè)生產(chǎn)中,為了提高酶產(chǎn)率和縮短發(fā)酵周期,最理想的合成模式是 延續(xù)合成型 。 改造 非理想模式:在細(xì)胞選育上下功夫,并適當(dāng)調(diào)節(jié)工藝條件: ( 1)同步合成型: 適當(dāng)降低發(fā)酵溫度,盡量 提高 酶所對應(yīng)的 mRNA的穩(wěn)定性 。 ( 2)中期合成型: 要從 解除阻遏 和 提高 mRNA的穩(wěn)定性 兩方面進(jìn)行努力。 ( 3)滯后合成型 在發(fā)酵過程中要盡量 減少甚至解除分解代謝物阻遏 ,使酶的合成提早開始。 選擇與改造 第二節(jié) 產(chǎn)酶微生物的特點 用于酶發(fā)酵生產(chǎn)的微生物必需具備的條件: ( 1)酶的產(chǎn)量高 ( 2)容易培養(yǎng)和管理 ( 3)產(chǎn)酶穩(wěn)定性好 ( 4)利于酶的分離純化 ( 5)安全可靠 新開發(fā)的酶必須按規(guī)定進(jìn)行下表的各項檢查 項目 試驗動物 急性中毒 鼠 ,大白鼠 口服 4周 大白鼠 12月 狗 致癌試驗 :24月 兩重嚙齒動物 畸胚組織發(fā)生試驗 (24月 ) 兩重嚙齒動物 生產(chǎn)病原性試驗 四種動物 皮膚刺激性試驗 (膚 ,眼 ) 兔子 ,人 抗原性 人 (一)常用的產(chǎn)酶微生物 細(xì)菌 大腸桿菌 ( Escherichia coli) 形態(tài):桿狀,革蘭氏陰性,運動或不運動,無芽孢,一般無莢膜。菌落呈白色至黃白色,擴展,光滑,閃光。 大多數(shù)大腸桿菌是無害,但也有些大腸桿菌是致病的,會引起腹瀉和尿路感染。 易于在實驗室操作、生長迅速,而且營養(yǎng)要求低。 應(yīng)用最廣泛的產(chǎn)酶菌,一般分泌 胞內(nèi)酶 。常在工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用于生產(chǎn) 谷氨酸脫羧酶、天冬氨酸酶、限制性核酸內(nèi)切酶 等。 醋酸桿菌 ( Acetobacter) ? 菌體從橢圓至桿狀,單個、成對或成鏈,革蘭氏陰性,不生芽孢。含糖、乙醇和酵母膏的培養(yǎng)基上生長良好。 ? 應(yīng)用:有機酸 (食醋等)葡萄糖異構(gòu)酶 (高果糖漿 ) 枯草芽孢桿菌( Bacillus subtilis) ? 直狀、近直狀的桿菌,周生或側(cè)生鞭毛, 革蘭氏陽性,無莢膜。 ? 枯草芽孢桿菌是工業(yè)發(fā)酵的重要菌種之一。生產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、5’ 核苷酸酶。 放線菌 (Actinomycetes) 放線菌是一類具有分支狀菌絲的單細(xì)胞原核微生物 ,由于菌落呈放射狀而得。 放線菌是一類介于細(xì)菌和真菌之間的單細(xì)胞生物。一方面 ,放線菌的細(xì)胞構(gòu)造和細(xì)胞壁的化學(xué)組成與細(xì)菌相似 ,與細(xì)菌同屬原核生物 。另
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