【正文】 微生物菌種保藏管理中心 中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院 (CICC) 中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心 中國藥品生物制品檢定所 (CMCC) 中國獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心 中國獸醫(yī)藥品檢定所 (CVCC) 中國林業(yè)微生物菌種保藏管理中心 中國林業(yè)科學(xué)研究院 (CFCC) 中國抗菌素菌種保藏管理中心 中國醫(yī)科院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所 (CACC) 中國普通微生物菌種保藏管理中心 中國科學(xué)院微生物研究所 (CCGMC) 國外菌種中心 American Type Culture Collection Japan Collection of Microanisms The United Kingdom National Culture collection Deutsche Sammlung von Mikroanismen und Zellkulturen ATCC 美國菌種中心，最大的菌種中心 ,有病毒、細(xì)菌、真菌、細(xì)胞等不同的微生物 JCM 日本微生物菌種中心 英國國家菌種中心， Over 70,000 microanisms and cell lines are available. 德國微生物與細(xì)胞收集中心 （ 1）樣品的采集（采樣）：主要是各種富含所需微生物的土壤、水、氣、枯枝爛葉、爛水果等 ； 產(chǎn)酶菌種篩選步驟： 篩選 由自然界采集樣品，如土壤、水、動(dòng)植物體等，從中進(jìn)行分離篩選 。 來源：淀粉及其水解物 — 淀粉水解糖、糖蜜、或含淀粉的原料如大米、薯類、玉米、麩皮、米糠等。 為此 ，在有些酶的發(fā)酵生產(chǎn)過程中， 要在不同的發(fā)酵階段控制不同的溫度 ，即在微生物生長階段控制在生長的最適溫度范圍，而在產(chǎn)酶階段控制在產(chǎn)酶最適溫度范圍。 泡沫 ?形成： 通氣攪拌、培養(yǎng)基中某些成分的變化、代謝產(chǎn)生的氣體。 其他產(chǎn)酶促進(jìn)劑 植酸鈣 ： 霉菌蛋白酶或橘青磷酸二酯酶 1~20倍 聚乙烯醇 衍生物 ： 可防止霉菌菌絲結(jié)球，提高糖化酶產(chǎn)量 聚乙烯醇 、醋酸鈉等 ： 纖維素酶 這些物質(zhì)的實(shí)際效果明顯，但作用機(jī)制還需深入探討。 溶解氧的調(diào)節(jié)控制 溶解氧 指溶解在培養(yǎng)基中的氧。 種子培養(yǎng)基： 是供菌種生長繁殖使用的 。 方法：分為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和車間培養(yǎng)兩個(gè)階段。 ? 應(yīng)用： 根霉能產(chǎn)生 糖化酶、蔗糖酶、堿性蛋白酶等。 ? 選用不同的霉菌作為發(fā)酵菌種，不僅可以釀制醬、醬油、醋、豆腐乳等食品，還可以應(yīng)用于生產(chǎn)有機(jī)酸、酶制劑、維生素、生物堿及激素等多種產(chǎn)品 。含糖、乙醇和酵母膏的培養(yǎng)基上生長良好。 若培養(yǎng)基中不存在阻遏物，該酶的合成可以轉(zhuǎn)為延續(xù)合成型。半乳糖苷酶的生物合成 果糖阻遏 a淀粉酶的生物合成 A1 B1 A2 B2 E A→→ →→ → B E 色氨酸過量時(shí)會(huì)阻遏催化色氨酸合成的相關(guān)酶 三、酶生物合成的模式 微生物細(xì)胞在一定條件下培養(yǎng)生長， 其生長過程一般經(jīng)歷調(diào)整期、生長期、平衡期和衰退期等 4個(gè)階段 調(diào)整期 對(duì)數(shù)生長期 平衡期 衰亡期 時(shí)間 細(xì)胞數(shù)量的對(duì)數(shù) （一）微生物生長曲線 （ Microbial growth curve） （二）酶生物合成的模式 （ 1）同步合成型 （ 2）延續(xù)合成型 （ 3）中期合成型 （ 4）滯后合成型 通過分析比較細(xì)胞生長與酶產(chǎn)生的關(guān)系 , 可以把酶的 生物合成的模式分為 4種類型： 同步合成型 ?酶的生物合成與細(xì)胞的生長 同步進(jìn)行 ，又稱生長偶聯(lián)型。 優(yōu)點(diǎn)：機(jī)械化強(qiáng)度高，酶產(chǎn)率高，產(chǎn)品回收率高 缺點(diǎn)：技術(shù)管理要求高 固定化細(xì)胞發(fā)酵（ 70年代后期發(fā)展） 將細(xì)胞固定在載體上后，進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。 酶的發(fā)酵生產(chǎn)是現(xiàn)在酶生產(chǎn)的主要方法。 結(jié)構(gòu)基因（ Structural gene） : 決定某一多肽的 DNA模板，與酶有各自的對(duì)應(yīng)關(guān)系，其中的遺傳信息可轉(zhuǎn)錄為 mRNA，再翻譯為蛋白質(zhì)。 （ 2）該酶對(duì)應(yīng)的 mRNA是相當(dāng)穩(wěn)定 的。 選擇與改造 第二節(jié) 產(chǎn)酶微生物的特點(diǎn) 用于酶發(fā)酵生產(chǎn)的微生物必需具備的條件： （ 1）酶的產(chǎn)量高 （ 2）容易培養(yǎng)和管理 （ 3）產(chǎn)酶穩(wěn)定性好 （ 4）利于酶的分離純化 （ 5）安全可靠 新開發(fā)的酶必須按規(guī)定進(jìn)行下表的各項(xiàng)檢查 項(xiàng)目 試驗(yàn)動(dòng)物 急性中毒 鼠 ,大白鼠 口服 4周 大白鼠 12月 狗 致癌試驗(yàn) :24月 兩重嚙齒動(dòng)物 畸胚組織發(fā)生試驗(yàn) (24月 ) 兩重嚙齒動(dòng)物 生產(chǎn)病原性試驗(yàn) 四種動(dòng)物 皮膚刺激性試驗(yàn) (膚 ,眼 ) 兔子 ,人 抗原性 人 （一）常用的產(chǎn)酶微生物 細(xì)菌 大腸桿菌 （ Escherichia coli） 形態(tài)：桿狀，革蘭氏陰性，運(yùn)動(dòng)或不運(yùn)動(dòng)，無芽孢，一般無莢膜。 放線菌產(chǎn)酶舉例 鏈霉菌： 葡萄糖異構(gòu)酶、青霉素酰化酶、纖維素酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等。在氣生菌絲上產(chǎn)生簡單的長而直立的分生孢子梗 , 分生孢