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正文內(nèi)容

微生物發(fā)酵產(chǎn)酶(專業(yè)版)

  

【正文】 誘導(dǎo)物的分類 ( 1)酶作用的底物; ( 2)酶作用底物的類似物; ( 3)酶的反應(yīng)產(chǎn)物; ( 4)底物和底物類似物的前體物。 ( 3)有些微生物可以同時(shí)產(chǎn)生若干種酶,在生產(chǎn)過(guò)程中,通過(guò)控制培養(yǎng)基的 pH,往往可以改變各種酶之間的產(chǎn)量比例。 無(wú)機(jī)鹽: 大量元素和微量元素 。 無(wú)論哪種發(fā)酵法,都要做三方面的工作: ( 1)從原料準(zhǔn)備培養(yǎng)基; ( 2)從原始菌種準(zhǔn)備生產(chǎn)菌種; ( 3)發(fā)酵過(guò)程管理。 木霉( Trichoderma) ? 木霉具有較強(qiáng)分解纖維素能力。 霉菌 ( molds) 霉菌 :是一類絲狀真菌。菌落呈白色至黃白色,擴(kuò)展,光滑,閃光。 時(shí)間 (h) 濃度 細(xì)胞濃度 酶濃度 滯后合成型 ?只有當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間或者進(jìn)入平衡期以后, 酶才開(kāi)始合成并大量積累。 酶合成的基因調(diào)控類型: 誘導(dǎo) 和 阻遏 酶合成的誘導(dǎo)作用 加進(jìn)某些物質(zhì),使酶的生物合成開(kāi)始或加速進(jìn)行的現(xiàn)象,稱為誘導(dǎo)作用。 酶發(fā)酵生產(chǎn)的前提之一:選育到性能優(yōu)良的產(chǎn)酶微生物! 對(duì) 產(chǎn)酶微生物 的要求: ( 1)產(chǎn)酶量高; ( 2)易培養(yǎng)和管理; ( 3)產(chǎn)酶性能穩(wěn)定; ( 4)利于酶產(chǎn)品的分離純化; ( 5)安全可靠、無(wú)毒性等。 適于微生物、動(dòng)植物細(xì)胞。 葡萄糖阻遏 223。只有隨著細(xì)胞的生長(zhǎng),阻遏物幾乎被細(xì)胞用完而使阻遏解除后,酶才開(kāi)始大量合成。 醋酸桿菌 ( Acetobacter) ? 菌體從橢圓至桿狀,單個(gè)、成對(duì)或成鏈,革蘭氏陰性,不生芽孢。霉菌繁殖迅速,常造成食品、用具大量霉腐變質(zhì),但許多有益種類已被廣泛應(yīng)用,是人類實(shí)踐活動(dòng)中最早利用和認(rèn)識(shí)的一類微生物。 ? 分布于土壤、空氣中,常見(jiàn)于淀粉食品上,可引起霉腐變質(zhì)和水果、蔬菜的腐爛。 培養(yǎng)基稱為種子培養(yǎng)基。 微生物發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基舉例 枯草桿菌 BF7658 a 淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基: 玉米粉 8% 豆餅粉 4% 磷酸氫二鈉 % 硫酸銨 % 氯化鈣 % 氯化銨 % 自然 pH 黑曲霉糖化酶發(fā)酵培養(yǎng)基 玉米粉 10% 豆餅 4% 麩皮 1% pH ~ (二)培養(yǎng)基的種類 斜面培養(yǎng)基: 是供菌種生長(zhǎng)繁殖使用的 。 ④ 通過(guò)調(diào)節(jié) 通氣量 來(lái)實(shí)現(xiàn); ⑤ 加 酸 、 堿 。 在培養(yǎng)基中添加 1%的吐溫( Tween),可使纖維素酶的產(chǎn)量提高 10~20倍。 ?危害: 阻礙 CO2的排除,影響氧的溶解;引起染菌。 ( 1)不同的微生物有不同的最適生長(zhǎng)溫度。 此外有些微生物可以采用脂肪、石油、乙醇等為碳源。 ( 2)初篩:分離產(chǎn)目的酶的菌株; 給予特殊的培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件,進(jìn)而讓目的菌株得以繁殖,盡可能地把只成為目的菌的菌株分離出來(lái)。生產(chǎn)葡萄糖氧化酶、苯氧甲基青霉素?;浮⒗w維素酶等。 放線菌是一類介于細(xì)菌和真菌之間的單細(xì)胞生物。 選擇 :在酶的工業(yè)生產(chǎn)中,為了提高酶產(chǎn)率和縮短發(fā)酵周期,最理想的合成模式是 延續(xù)合成型 。 特點(diǎn): ( 1)該類酶的合成 受分解代謝物阻遏 。 調(diào)節(jié)基因常位于調(diào)控區(qū)的上游。第二章 微生物發(fā)酵產(chǎn)酶 本章主要內(nèi)容: ?酶的生產(chǎn)方法; ?酶生物合成的基本理論; ?發(fā)酵產(chǎn)酶的工藝條件及控制; 難點(diǎn): ?酶生物合成的誘導(dǎo)和阻遏; ?發(fā)酵過(guò)程細(xì)胞生長(zhǎng)與酶合成之間的關(guān)系。 按酶生物合成的速度,把細(xì)胞中合成的酶分為兩類: 組成酶 — 恒定(速度、濃度) 誘導(dǎo)酶 — 在外界環(huán)境因素誘導(dǎo)下合成速度急增,酶濃度成百上千倍增加 (適應(yīng)型酶、調(diào)節(jié)型酶 ) 1960, Jacob和 Monod提出的操縱子學(xué)說(shuō)闡明; 與生物合成相關(guān)的四個(gè)基因: 調(diào)節(jié)基因 Regulator gene ; 啟動(dòng)基因 Promoter gene ; 操縱基因 Operator gene; 結(jié)構(gòu)基因 Structural gene ; 調(diào)節(jié)基因 (R): 可產(chǎn)生一種變構(gòu)蛋白,通過(guò)與效應(yīng)物(effector) (包括誘導(dǎo)物和輔阻遏物)的特異結(jié)合而發(fā)生變構(gòu)作用,從而改變它與操縱基因的結(jié)合力。 時(shí)間 (h) 濃度 細(xì)胞濃度 酶濃度 中期合成型 ?酶的合成在 細(xì)胞生長(zhǎng)一段時(shí)間以后才開(kāi)始 ,而在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后,酶的合成也停止。 ( 2) mRNA穩(wěn)定性高 的,可在細(xì)胞停止生長(zhǎng)后繼續(xù)合成其對(duì)應(yīng)的酶; 穩(wěn)定性差的 ,隨著細(xì)胞生長(zhǎng)停止而終止酶的合成。 放線菌 (Actinomycetes) 放線菌是一類具有分支狀菌絲的單細(xì)胞原核微生物 ,由于菌落呈放射狀而得。 青霉( Penicillium) 青霉是世界分布最廣的幾類真菌之一。 中國(guó)國(guó)家級(jí)菌種保藏管理中心( 7個(gè)) 名稱 依 托 單 位 中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所 (ACCC) 中國(guó)工業(yè)
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