【正文】 料中效果更理想，不影響增重，又能抑制體脂肪的形成，改善肉質(zhì)。且添加了中鏈脂肪酸的飼料還能有效的抑制原蟲引起的疾病，尤其雞球蟲病的發(fā)生。初生仔豬從出生到斷奶期間有15－20％死亡，弱小仔豬的死亡率高達50％，導(dǎo)致初生仔豬死亡率高的一個重要因素是仔豬的營養(yǎng)狀況不良，體內(nèi)的能量儲備有限，不能滿足機體需要。中鏈脂肪酸可以作為快速補充能量的物質(zhì)被直接利用供能，同時可減少體脂和蛋白質(zhì)的消耗。通過實驗發(fā)現(xiàn)中鏈脂肪酸對仔豬成活率可提高10％以上，對日增重可提高3％以上，對降低仔豬的死亡率提高仔豬日增重有較大的作用。MCFA用于初生弱仔豬，有提高血糖的功效，但對較強壯的豬則沒有作用。也用以長途運輸雛雞飲水，可起到供能的作用。純的MCT不含有必需脂肪酸，應(yīng)用后引起血栓性靜脈炎、面部潮紅、惡心、腦電圖改變、腦病、乳酸酸中毒，甚至動物死亡。一般減少劑量，減慢輸液速度或可避免副作用發(fā)生。 項目技術(shù)先進性，對相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)進步的推動作用本項目在研究過程中，以中短鏈脂肪酸為原料，分別用薄膜分散法、改良乙醇注入法、逆相蒸發(fā)法、凍融法制備脂質(zhì)體懸浮液，得出制備脂質(zhì)體的最佳工藝和配方；然后將制得的脂質(zhì)體進行冷凍干燥，確定凍干條件，分別添加并比較幾種凍干保護劑（山梨醇、葡萄糖、甘露糖、海藻糖），通過穩(wěn)定性、包封率等指標(biāo)確定制備中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝。解決了脂質(zhì)體在制備過程中顆粒較大且不均勻、包封率較低的問題；將脂質(zhì)體懸浮液經(jīng)過真空冷凍干燥技術(shù)制成凍干脂質(zhì)體解決了懸浮液不穩(wěn)定的缺點；抑制了凍干產(chǎn)品在冷凍干燥過程中的聚合。項目技術(shù)的先進性表現(xiàn)在有效解決以下幾個問題：第一、通過正交試驗，將幾種表面活性劑進行復(fù)配，而不是用單一的表面活性劑，從而改變了各種表面活性劑的乳化效果，使得脂質(zhì)體懸浮液粒度分布更均勻，并且使被包封的中短鏈脂肪酸增加，從而有效地提高了包封率。第二、制備的脂質(zhì)體溶液屬于熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，通常在短時間內(nèi)會出現(xiàn)粒徑增大、團聚、水解等現(xiàn)象，若將其干燥成固體可有效提高脂質(zhì)體的化學(xué)穩(wěn)定性，保持原有粒徑，避免水解。常用的干燥方法有冷凍干燥和噴霧干燥，由于在噴霧干燥過程中的高溫、高剪切力和脂質(zhì)的部分融化，易造成粒子團聚，所以盡管噴霧干燥較冷凍干燥法更經(jīng)濟，但較少用于脂質(zhì)體的干燥，所以采用真空冷凍干燥方法將脂質(zhì)體懸浮液進行干燥，從而提高了脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。第三、樣品經(jīng)冷凍干燥變成固態(tài)后，具有更好的化學(xué)和物理穩(wěn)定性，但由于其再增溶作用，粒子由于處于一個低含水量、高粒子濃度、高滲透壓的環(huán)境中，易發(fā)生聚合。因此在冷凍干燥時應(yīng)加入適量的冷凍防護劑，抑制粒子的聚合，使干燥后產(chǎn)品有更好的分散性。常用的冷凍防護劑有山梨醇、葡萄糖、甘露糖、海藻糖等。 項目目前進展情況。目前，脂質(zhì)體研究已經(jīng)在各個制藥領(lǐng)域廣泛開展，該類藥物新劑型已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于抗癌藥物、抗菌藥物、抗寄生蟲藥物、激素類藥物、酶、解毒劑、免疫激活劑以及抗結(jié)核藥物的研究中。另外，因為脂質(zhì)體具有生物膜的特性和功能，使它不僅作為一種新劑型應(yīng)用與疾病的治療和診斷中，而且在生物物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)研究、免疫診斷及化妝品等許多領(lǐng)域中都有應(yīng)用。隨著脂質(zhì)體技術(shù)的不斷發(fā)展，各種各樣新型的脂質(zhì)體已經(jīng)被研制出來，如 pH 敏脂質(zhì)體、免疫脂質(zhì)體、磁性脂質(zhì)體、光敏脂質(zhì)體、超聲波敏脂質(zhì)體等。目前，這種藥物新劑型在獸藥領(lǐng)域內(nèi)也得到了一定的發(fā)展。本項目“中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體的研究”目前已完成小試階段，準(zhǔn)備進行中試放大研究。二、技術(shù)方案論述項目技術(shù)關(guān)鍵點或創(chuàng)新點論述，項目完成時達到的技術(shù)水平項目創(chuàng)新點：① 首次以中短鏈脂肪酸為原料，制備納米脂質(zhì)體，科學(xué)有效的利用了脂質(zhì)體靶向性、長效性、保護性等特點。② 通過真空冷凍干燥法制備了固體中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體，改變了脂質(zhì)體懸浮液的不穩(wěn)定性，便于儲存運輸。③ 本項目對中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體的流變學(xué)特性進行了研究，并揭示中短鏈脂肪酸含量與其粘度的關(guān)系本項目達到的技術(shù)水平：開發(fā)出具有一定生理功能，商業(yè)價值高的中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體的凍干產(chǎn)品，開發(fā)出適合不同用途的中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體產(chǎn)品,可作為脂肪吸收障礙的患者及發(fā)育不好的嬰幼兒等的能源物質(zhì)，或作為體育運動者的能量補充源。若將其添加于飼料中，可降低初生仔豬死亡率，提高日增重，減少畜禽腸道疾病的產(chǎn)生，從而提高農(nóng)民的收入。 項目水平將達到國內(nèi)領(lǐng)先水平。 項目技術(shù)方案論述：生產(chǎn)技術(shù)、工藝流程、主要技術(shù)參數(shù)生產(chǎn)技術(shù)：（1）摸索氣相色譜法測定中短鏈脂肪酸的條件，并對原料中短鏈脂肪酸進行測定；（2）通過正交實驗得出制備脂質(zhì)體的最佳工藝，制備出穩(wěn)定性好的中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體；（3）研究中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體流變學(xué)特性，并揭示中短鏈脂肪酸含量與其粘度的關(guān)系；（4）通過中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體粒徑、Zate 電位、包封率等性質(zhì)的測定考察所制備脂質(zhì)體的穩(wěn)定性；（5）開發(fā)中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體凍干產(chǎn)品。工藝流程：采用氣相色譜對原料中短鏈脂肪酸的組成及含量進行分析。 目前鮮見關(guān)于氣相色譜法同時測定中、短鏈脂肪酸含量和組成的報道，為了對原料的組有一個全面的了解，我們摸索了氣相色譜法測定中短鏈脂肪酸的組成及含量的方法 ① 脂肪酸的甲酯化：采用硫酸甲醇法對原料中短鏈脂肪酸進行甲酯化。在裝有脂肪酸混合樣的梨形瓶中，加入硫酸甲醇溶劑，在沸水浴上冷凝回流酯化1h，移入分液漏斗中，加入蒸餾水，用石油醚萃取脂肪酸甲酯三次。合并石油醚于另一分液漏斗中，用蒸餾水洗滌至中性，低溫冷凍除去水分，將石油醚轉(zhuǎn)入另一梨形瓶中，去除溶劑，加入二氯甲烷溶液，供色譜分析檢測。 ② 氣相色譜檢測： 采用Agilent6890N氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測器。選用30(id) HPINNOWAX毛細管柱進行分析，初始溫度為120℃ 保持1min，然后以10℃/min的速度升溫至250℃ 并維持5min。檢測器溫度為280℃ ，進樣口溫度為250℃,進樣量為1μL。載氣為氦氣， ③ 根據(jù)出現(xiàn)色譜峰的保留時間，定性判斷脂肪酸種類及組成，用面積歸一法進行脂肪酸定量分析，所得結(jié)果為每千克總脂肪酸中所含的各種脂肪酸的量。 中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體包封率的檢測 ①懸浮液包封率的測定采用透析法分離游離藥物, 收集透析液，并將透析液經(jīng)行前處理，然后用氣相色譜法測定其中游離的中短鏈脂肪酸的含量。%=（總加入量－游離脂肪酸的量）/總加入量100%②凍干脂質(zhì)體包封率的測定 先將凍干脂質(zhì)體重新分散于磷酸緩沖液中，然后測定其包封率。脂質(zhì)體懸浮液的制備（1）中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體制備方法的確定在預(yù)實驗的基礎(chǔ)上，采用相同配方條件，分別用薄膜分散法、改良乙醇注入法、逆相蒸發(fā)法、凍融法制備脂質(zhì)體懸浮液。① 薄膜分散法 按一定比例稱取大豆磷脂、膽固醇、中短鏈脂肪酸適量，將其置于茄形燒瓶中。加入二氯甲烷使其溶解，在45℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使之均勻成膜；，直至形成牛奶狀液體，即得脂質(zhì)體。停止洗膜后，超聲處理，置冰箱內(nèi)保存。② 改良乙醇注入法 按一定比例稱取中短鏈脂肪酸、磷脂、膽固醇適量，溶于適量的乙醇中，加熱使其溶解。在攪拌條件下，將恒溫至一定溫度的磷酸鹽溶液快速注入到類脂溶液中。注射完畢后，繼續(xù)攪拌直至無乙醇味為止。即得到中短鏈脂肪酸脂質(zhì)體膠體溶液。③ 逆向蒸發(fā)法按一定比例稱取大豆磷脂、膽固醇、中短鏈脂肪酸適量，將其置于茄形燒瓶中。加入二氯甲烷使其溶解，在加入磷酸緩沖液并在超聲波清洗機中進行超聲使之成為牛奶狀液體；再在45℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有