動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容-文庫(kù)吧
2025-04-01 22:27 本頁(yè)面
【正文】 自動(dòng)雙重純水蒸餾器結(jié)構(gòu)、使用注意事項(xiàng)。高壓蒸氣滅菌器的工作原理正壓過(guò)濾器的使用方法二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法四、作業(yè)敘述超凈工作臺(tái)的工作原理正壓過(guò)濾器為何會(huì)除菌3NaClKClCaCl2MgSO47H2ONa2HPO42H2OKH2PO4NaHCO3葡萄糖苯酚紅HanksDHanks實(shí)驗(yàn)三 常用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用液的配制一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆粘Ｓ脛?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用液的組成及配制方法。二、實(shí)驗(yàn)用品與儀器量筒、燒杯、廣口瓶、天平、各種無(wú)機(jī)鹽、三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）平衡鹽溶液的配制平衡鹽溶液的配方如下：I組配Hanks（1000mL），V組配DHanks（1000mL），其他各組不配平衡鹽溶液。配制方法：（以Hanks液為例）(1)甲液：用約100mL蒸餾水溶解CaCl2，(2)乙液：用約750mL蒸餾水溶解Na2HPO42H2O、KH2POMgSO47H2O、葡萄糖、NaCl、KCl。(3)將甲液徐徐加入乙液中。(4)將溶解在100mL蒸餾水中(5)用數(shù)滴NaHCO4液溶解克酚紅。(6)將5液移入3液中。(7)用雙蒸水定容至1000mL，充分混勻，調(diào)節(jié)PH為4℃冰箱過(guò)夜。(8)濾過(guò)消毒，小瓶分裝（500mL、250mL2），冷藏。配制要求(1)配制后液體呈桃紅色，左右，沒(méi)有混濁和沉淀。(2)含Ca、Mg的物質(zhì)要單獨(dú)溶解。(3)用于分離細(xì)胞的消化液宜用無(wú)Ca、Mg離子的DHanks液或PBS液配制。（二）200mmol/l，L谷氨酰胺（10mL）(II組配)方法：稱(chēng)取（）+雙蒸水10mL→濾過(guò)除菌→20℃保存。使用：每100mL培養(yǎng)基加1mLL谷氨酰胺。（三）抗菌素液（青霉素、鏈霉素）(III組配)方法：10mLHangks液或雙蒸水溶解100萬(wàn)鏈霉素，再用8mL鏈霉素溶解80萬(wàn)u的青霉素，成每毫升青霉素、鏈霉素各10萬(wàn)單位的母液。使用：100mL培養(yǎng)液加青、鏈霉素母液（四）RPMI1640基礎(chǔ)培養(yǎng)液的配制(IV組配)甲液：RPMI1640 Hepes 雙蒸水 700mL攪拌至顆粒完全溶解（橙紅色）乙液：NaHCO3 雙蒸水 30mL30min顆粒完全溶解4將甲、乙兩液混合，加水至終1000mL定容，4℃冰16
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