動物細胞培養(yǎng)實驗內(nèi)容(存儲版)
【正文】 1)一般情況下，每周換液用相差顯微鏡觀察，可見滿視野都是點狀的細菌顆粒。二、實驗器材與用品鵪鶉的心臟 平衡鹽（BSS）液（各組自己配的）100mL細胞培養(yǎng)瓶（每人一個） 完全培養(yǎng)液 滅菌培養(yǎng)皿1HanksDHanks將心室肌置于無菌培養(yǎng)皿中，剪成次，吸去多余的液體。無菌培養(yǎng)皿中的小組織塊用倍的用5105細胞懸液。（二）傳代培養(yǎng)實驗步驟取原代培養(yǎng)物，吸除原瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，輕輕搖晃培養(yǎng)瓶，將細胞振入培養(yǎng)液內(nèi)，將懸浮在培養(yǎng)液中的細胞移入離心管中。培養(yǎng)液，用吸管沖洗細胞，制成細胞懸液。倍放大用計數(shù)器計數(shù)結(jié)果分析：(1)正常細胞不被染色。CO2細胞濃度細胞懸液量。用雙蒸水和在顯微鏡DHanks1~2min后，加入約（2）收集消化下來的細胞，歸入前離心管中，500~800r/min5min，去除上清液。1培養(yǎng)液，再接種15mL500~800r/min7min，吸除上清液。用吸管去除上清液，加入沉淀量20~30min。清洗次。Hanks(2)合成，抑制細胞生長等。細菌污染大多數(shù)可以改變培養(yǎng)液PH（三）組織培養(yǎng)細胞的常規(guī)檢查營養(yǎng)液在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變園，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈工作臺中將消化液倒掉，加入為宜，加少量培養(yǎng)液（維持濕潤即可）。1~2mLDHanksPBS%，濾過除菌，備用。組配)方法：稱取調(diào)整組配)1：250%NaHCO4菌箱至乙使用：100mL8mL1mL液配制。的物質(zhì)要單獨溶解。(8)3NaHCO4將甲液徐徐加入乙液中。CaCl2，(2)組配高壓蒸氣滅菌器的工作原理玻璃管道口加棉花。小的器材如：注射器、剪刀、鑷子放入飯盒。(2)12h→刷洗→流水震蕩沖洗2個掌握細胞培養(yǎng)常用實驗器材的清洗要領(lǐng)、清洗步驟和注意事項。3眼科剪刀、眼科鑷子各步驟：洗衣粉浸泡使用后的器材要立即投入水中。小包裝(4)Hanks（1000mL），V蒸餾水溶解(3)用數(shù)滴液移入4℃冰箱過夜。Ca、MgPBS培養(yǎng)基加萬鏈霉素，再用萬單位的母液。、水冰除（五）（六）%胰蛋白酶溶液（400mL）(VI％NaHCO4（七）%EDTA（乙二胺四乙酸二鈉）溶液（200mL）(VI→液或或吸管吸取分鐘。左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶若刷洗不潔，殘留堿性物質(zhì)，致營養(yǎng)液微生物的污染與排除（1）細菌污染對培養(yǎng)細胞的影響及污染物的檢測污染的細菌量比較大，增殖的細菌就可以導(dǎo)致培養(yǎng)液外觀渾濁，肉眼就可以判斷。DNA75%酒精浸泡消毒。用3DHanks左右大小，約需(2)將上述懸液去上清液后加2~3天換液1mL）。37℃下消化或?qū)⑸w玻片放在計數(shù)板上，用吸管吸取少量細胞懸液，充滿間隙。個細胞，并計數(shù)其中的著色細胞。細胞總數(shù)（個）=總細胞數(shù)100%
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