【正文】 體內(nèi) 自發(fā)性腫瘤 誘發(fā)性腫瘤 鼠細(xì)胞移植瘤模型 裸鼠移植瘤模型 抗癌藥物篩選流程 選擇靶分子 純化靶分子、建立篩選方法 細(xì)胞毒篩選 藥物設(shè)計(jì) 組合化學(xué)庫(kù) 發(fā)現(xiàn)先導(dǎo)化合物 天然產(chǎn)物篩選 化合物庫(kù)篩選 藥效學(xué)、毒性研究 構(gòu)效關(guān)系分析，化學(xué)修飾 候選藥物（苗頭化合物） 抗癌藥物對(duì)細(xì)胞周期中各期作用 周期非特異性 療效與劑量成正比，呈劑量依賴(lài)性，以大劑量沖擊治療為宜。 周期特異性藥物 給藥具有時(shí)間依賴(lài)性，宜小劑量持續(xù)給藥。 抗癌藥物聯(lián)合應(yīng)用的藥理學(xué)基礎(chǔ) 目的： 減少藥物毒性（解救治療），以保證抗癌藥物能使用足夠劑量。 通過(guò)各種機(jī)制加強(qiáng)抗癌藥物的療效，而不增加毒性。 防止或延緩抗藥性的產(chǎn)生。 從作用機(jī)制上考慮聯(lián)合用藥 多靶點(diǎn)，協(xié)同；同靶點(diǎn)，常拮抗，但烷化劑例外。 對(duì)聯(lián)合化療的生化途徑可分為 3種： 序貫抑制： A B C 酶 1（ E1） 酶 2（ E2） 抑制劑 1（ I1） 抑制劑 2（ I2） 羥基脲 (核苷還原酶） AraC（ DNA多聚酶） MTX 5FU 同時(shí)抑制 即產(chǎn)生同一產(chǎn)物的 2條生化途徑同時(shí)被抑制。 A C B E1 E2 I1 I2 Herceptin + Lapatinib 共同 靶點(diǎn) :Her2/neu R R K K 胞外配體結(jié)合區(qū) 跨膜區(qū) 胞內(nèi)激酶區(qū) 互補(bǔ)性抑制 其特點(diǎn)是抑制劑（ I2）直接影響或改變一種終產(chǎn)物，而另一種抑制劑（ I1）則阻止生成這種終產(chǎn)物的生物合成途徑。 如： Dox +AraC Dox 嵌入 DNA，干擾其功能。 AraC 抑制 DNA多聚酶，抑制 DNA合成。 DDP＋ 5FU CTX＋ AraC A C I1 I2 從藥動(dòng)學(xué)關(guān)系上考慮聯(lián)合用藥 一、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)及胞內(nèi)濃度關(guān)系 進(jìn)入：大多被動(dòng)擴(kuò)散； 排出：主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn) VCR+MTX VCR抑制 MTX外排 兩性霉素 B促進(jìn) 5FU、 BLM被細(xì)胞攝取（改變膜通透性有關(guān)） 二、影響藥物的生物轉(zhuǎn)化 影響藥物的激活 CTX P450 磷酰氮芥 FT207 苯巴比妥 （ +） 5FU 影響藥物滅活作用 AraC 阿糖尿苷（滅活） 6MP 硫代黃嘌呤 硫尿酸 胞苷脫氨酶 四氫尿苷（ THU） （ —） 黃嘌呤氧化酶 別嘌呤醇 （ —） 從細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)上考慮聯(lián)合用藥 一、同步化作用（ synchronization) VCR同步化 CTX （淋巴瘤） 二、招募作用（ recruitment) 對(duì)負(fù)荷大的腫瘤先用周期非特異性藥物，使腫瘤縮小，并招募大比例的癌細(xì)胞（ G0）進(jìn)入周期，再用周期特異性藥物。如漿細(xì)胞瘤先用 CTX作為招募療程，再用 AraC。 要想將數(shù)目較大的腫瘤細(xì)胞群殺滅，則必須連用幾個(gè)反復(fù)療程。 各療程之間的間歇期要求足夠長(zhǎng)，讓正常組織（骨髓等）恢復(fù)。（ 34周） 1224h 三、 選擇單藥最適用藥方案 根據(jù)藥敏試驗(yàn)，組建方案，個(gè)體化化療。 大劑量沖擊治療較好者，如 CTX、 Dox、 CCNU 較大量脈沖治療較好，如 MTX、 MMC、 5FU等 間歇給藥，在給藥天要分次用較好，如 AraC、 VM26 間歇或連續(xù)用藥對(duì)療效影響不大，如放線菌素 D等 每日用藥較好，如巰嘌呤、甲基芐肼。 每日分次用藥較好， L門(mén)冬酰胺酶。 從藥物毒性方面考慮聯(lián)合用藥 （一）減少毒性的重疊 骨髓抑制不明顯藥物： BLM、 VCR、 LASP、 靶點(diǎn)藥 肺毒性： BLM（纖維化）、 MTX、白消安 肝毒性： LASP、 MTX、 6MP、 BCNU 腎毒： DDP、 MTX （二）降低藥物毒性 降低 MTX毒性： MTX+甲酰四氫葉酸（ CF） 降低 IFO毒性：巰乙磺酸鈉 +IFO，降低化學(xué)性 出血性膀胱炎。 使用非抗癌藥以加強(qiáng)抗癌藥效力 +CF 增加 5FU與胸苷合成酶的穩(wěn)定性 +乙炔尿嘧啶（抑制 5FU降解限速酶雙 氫嘧啶脫氫酶） 天然來(lái)源抗癌藥如 Dox+MDR逆轉(zhuǎn)劑 5FU 抗癌藥物治療原則 Right drug Right time Right dose Right administration Right patient 化療藥物個(gè)體化 通過(guò)抗腫瘤藥物體外藥敏試驗(yàn) 實(shí)現(xiàn)化療藥物個(gè)體化 目前，腫瘤化療方案的選擇原則： 依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道 醫(yī)生經(jīng)驗(yàn) 病人的身體狀況及經(jīng)濟(jì)能力等。 缺乏科學(xué)的、直接的指導(dǎo)臨床選用化療方案的指標(biāo)。 與抗菌藥敏比較，抗腫瘤藥物藥敏試驗(yàn)更有必要 抗菌藥物藥敏 抗腫瘤藥物藥敏 藥譜 廣 窄 藥效 好 欠佳 應(yīng)用 常單藥 常聯(lián)合 副作用 小 大 對(duì)病情影響 小 大 價(jià)格 小 大 耐藥 菌株耐藥 個(gè)體抗藥 抗腫瘤藥物藥敏試驗(yàn)研究的狀況 單細(xì)胞懸液的藥敏試驗(yàn)（ MTT、 MTX、 ATP） （簡(jiǎn)單，早出報(bào)告，但成功率低，可靠性差） 裸鼠移植瘤藥敏試驗(yàn) （計(jì)算抑瘤率） （可靠性強(qiáng)，但復(fù)雜，不易推廣，費(fèi)用貴，時(shí)間長(zhǎng)） 濾紙支持的組織塊培養(yǎng)， MTT法結(jié)合圖像分析系統(tǒng)的藥敏試驗(yàn)。 （ 方法較簡(jiǎn)單、容易推廣、成功率高、實(shí)驗(yàn)周期短 (5天 )、模擬體內(nèi)微環(huán)境、具有內(nèi)參照、結(jié)果直觀、可靠等特點(diǎn) ） 研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線 建立藥敏試驗(yàn)系統(tǒng) 腫瘤標(biāo)本 組織塊，培養(yǎng) 1天 圖像分析，讀取加藥前讀數(shù) 加藥培養(yǎng) 4天 圖像分析，讀取加藥后讀數(shù) 計(jì)算抑瘤率 IR(%)=(1C/A?D/B) ?100 A D C B 1 2 Ctr 優(yōu)點(diǎn) : 組織塊培養(yǎng)比單細(xì)胞培養(yǎng)更接近體內(nèi)環(huán)境。 濾紙支持培養(yǎng)更接近腫瘤血供系統(tǒng)。 具有內(nèi)對(duì)照校正系統(tǒng)。 快速（ 5天出結(jié)果）。 圖像分析，結(jié)果直觀。 經(jīng)臨床應(yīng)用驗(yàn)證外推臨床，指導(dǎo)臨床用藥，實(shí)現(xiàn)化療藥物個(gè)體化。 抗癌藥物抗藥性 一、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)或攝取過(guò)程障礙 MTX 二氨二氯苯甲嘧啶（ DDMP），三甲曲沙（ trimetrexate)，哌利特森（ PTX） Ａ ra C (細(xì)胞膜核苷結(jié)合點(diǎn)減少） 苯丁酸氮芥（？） 二、藥物活化障礙 脫氧胞苷激酶 AraC AraCMP AraCDP AraCTP 脫氨酶 脫氨酶 AraU Ａ raUMP 抑制核苷 抑制 DNA (無(wú)效） （無(wú)效） 酸還原酶 多聚酶 ６ MP ThioIMP ThioIDP ThioITP RNA HGPRT ThioXMP 6TG ThioGMP ThioGDP ThioGTP RNA HGPRT ThiodGDP ThiodGTP DNA CTX 磷酰胺氮芥 肝微粒體酶 5FU FdUMP TP UK? TK? (復(fù)雜） 三、藥物在細(xì)胞內(nèi)的存留及滅活 Ａ raC：脫氧胞苷脫氨酶（ CdRDA)。 苯丁酸氮芥： GSH 丁胱亞磺酰亞胺 (BSO) DDP: GSH 丁胱亞磺酰亞胺 (BSO) 四、靶酶量上增加及基因擴(kuò)增 MTX: 二氫葉酸還原酶（ DHFR）增加 L門(mén)冬酰胺酶：基因擴(kuò)增 5FU：脫氧胸苷合成酶增加 羥基尿（ HU）：核糖核苷酸還原酶 五、受體或靶酶的改變 MTX： DHFR變異，導(dǎo)致兩者親和力降低 5FU： FdUMP與 TMPS形成共價(jià)鍵親合力降低 AraC: AraCTP與 DNA多聚酶的親和力減低 羥基脲：與核糖核苷還原酶親和力降低 六、交替代謝途徑增加 MTX、 5FU：脫氧胸苷 dTMP L門(mén)冬酰胺酶：門(mén)冬酰胺合成酶增加 AraC: 胞內(nèi) CTP及 dCTP庫(kù)增加 TK 七、受損 DNA的切除修復(fù) 受損核堿基切除效能增加。 切除部分的聯(lián)結(jié)效能增加。 如 DDP、烷化劑等。 八、多藥抗藥性（ MDR）和 腫瘤細(xì)胞的凋亡抗性 Reversal of Tumor Multidrug Resistance Resistance to chemotherapeutic agents remains a major obstacle to efficient cancer therapy The causes are very plex. Multidrug resistance (MDR) MDR induced by several causes Cellular membrane Pgp (P170) MRP 1(P190) cMaot (P190) LRP (P110) BCRP (P70) Cellular plasma IAPs PKC Topo II GSH, GS