化生專業(yè)微生物第7章微生物的生長上傳-文庫吧
2024-12-29 11:31 本頁面
【正文】 不要相差太大； ? 適當擴大接種量。 延滯期的長短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán)境條件等因素有關，短的只需要幾分鐘，長的需數(shù)小時。 對數(shù)期（ log phase） 又稱指數(shù)生長期（ exponential phase），指在生長曲線中，緊接著延滯期的一段細胞數(shù)以幾何級數(shù)增長的時期。 ? 生長速率常數(shù)最大，代時最短； ? 細胞進行平衡生長，菌內各成分十分均勻； ? 酶系活躍，代謝旺盛。 （ 1）對數(shù)期的特點 對數(shù)生長期的細菌個體形態(tài)、化學組成和生理特性等均較一致，代謝旺盛、生長迅速、代時穩(wěn)定，所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟效益。 繁殖代數(shù)（ n）： 一定時間內細胞分裂的次數(shù)。 生長速率常數(shù)（ growth rate constant， R）： 單位時間內細胞分裂的次數(shù)。 代時（ Generation time， G）： 在細菌個體生長里，每個細菌分裂繁殖一代所需的時間。 倍增時間（ Doubling time）： 在群體生長里細菌數(shù)量增加一倍所需的時間。 （ 2）對數(shù)期的重要參數(shù) （ 3）影響代時的因素 ? 菌種：不同的微生物及微生物的不同菌 株代時不同； ? 營養(yǎng)成分：在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中生長代時短； ? 營養(yǎng)物濃度：一定范圍內，營養(yǎng)物濃度既影響生長速率也影響總生長量； ? 溫度：一定范圍，生長速率與培養(yǎng)溫度呈正相關。 又稱恒定期或最高生長期，生長速率常數(shù)降為 0（即細菌分裂增加的數(shù)量等于細菌死亡數(shù)），菌體產(chǎn)量達到最高點。 穩(wěn)定期（ stationary phase） ? 生長速率常數(shù)為 0，菌體產(chǎn)量達到最高點； ? 儲存糖原等細胞質內含物； ? 積累代謝產(chǎn)物的重要階段，某些放線菌抗生素的大量形成也在此時期； ? 芽孢桿菌在此階段形成芽孢或建立自然感受態(tài)等。 （ 1）穩(wěn)定期的特點 生產(chǎn)上常通過補充營養(yǎng)物質或取走代謝產(chǎn)物、調節(jié) pH、 調節(jié)溫度、對好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長穩(wěn)定生長期，以獲得更多的菌體物質 （ 2）穩(wěn)定期出現(xiàn)的原因 ? 營養(yǎng)物特別是生長限制因子的耗盡； ? 營養(yǎng)物比例失調； ? 酸、醇、毒素等有害代謝物的積累； ? pH、 氧化還原電位等物理化學條件不適宜； 細菌個體死亡速率超過新生速率，整個群體呈現(xiàn)出負增長（ R為負值）。 衰亡期（ decline或 death phase） ? R為負值； ? 細胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，如產(chǎn)生畸形，大小懸殊，革蘭氏染色反應變化等； ? 細菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，如氨基酸、轉化酶、外肽酶或抗生素等。 （ 1）衰亡期出現(xiàn)的原因 營養(yǎng)物質耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累； （ 2）衰亡期的特點 二、連續(xù)培養(yǎng)、同步培養(yǎng)和高密度培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng)（ continuous culture ） ： 又稱開放培養(yǎng)（ open culture）， 是指在一個恒定容積的流動體系中培養(yǎng)微生物，一方面以一定流速不斷加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以同樣的流速流出培養(yǎng)物，使體系中的細胞數(shù)量和營養(yǎng)狀態(tài)保持恒定的培養(yǎng)方法。 培養(yǎng)過程中不斷的補充營養(yǎng)物質和以同樣的速率移出培養(yǎng)物是實現(xiàn)微生物連續(xù)培養(yǎng)的基本原則。 控制連續(xù)培養(yǎng)的方法 恒濁連續(xù)培養(yǎng) 菌體濃度 恒化連續(xù)培養(yǎng) 營養(yǎng)物質濃度 同步培養(yǎng)（ Synchronous culture） ： 使群體中的細胞處于比較一致的，生長發(fā)育均處于同一階段上，即大多數(shù)細胞能同時進行生長或分裂的培養(yǎng)方法。 高密度培養(yǎng)（ HCDC）： 也稱高密度發(fā)酵，一般是指微生物在液體培養(yǎng)中細胞群體密度超過常規(guī)培養(yǎng) 10倍以上時的生長狀態(tài)或培養(yǎng)技術。 Chapter73 微生物的培養(yǎng)法概論 （ Overview of Microbial Culturing） 不同微生物有不同培養(yǎng)條件的需求，良好的微生物培養(yǎng)裝置的基本條件是：按微生物的生長規(guī)律進行科學設計，能在提供豐富而均勻的營養(yǎng)物質的基礎上，保證微生物獲得適宜的理化條件，以及嚴防雜菌污染。 微生物培養(yǎng)技術的發(fā)展 ? 從小規(guī)模培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)； ? 從固體培養(yǎng)到液體培養(yǎng)； ? 從單批培養(yǎng)到連續(xù)培養(yǎng)； ? 從利用微生物細胞到利用動植物細胞培養(yǎng)； ? 從利用野生型菌株到變異菌株和遺傳工程菌株； ? 從單菌發(fā)酵到混菌發(fā)酵； ? 從低密度培養(yǎng)到高密度培養(yǎng)； ? 從人工控制的發(fā)酵罐到自動化發(fā)酵罐。 一、實驗室培養(yǎng) （ Culture methods in laboratory） 固體培養(yǎng)法 （ on solid medium） （ 1）好氧菌（ aerobes） 主要用試管斜面（ testtube slant）、培養(yǎng)皿瓊脂平板（ agar plate） 及較大型的克氏扁瓶（ kolle flask）、 茄子瓶等進行平板培養(yǎng)。 （ 2）厭氧菌（ anaerobes） 培養(yǎng)厭氧菌需要特殊的培養(yǎng)裝置和特殊的培養(yǎng)基。 用培養(yǎng)厭氧菌的方法主要有： 高層瓊脂柱、厭氧培養(yǎng)皿、 Hungate滾管技術 、 厭氧罐 （ anaerobic jar） 技術 、 厭氧手套箱（ anaerobic glove box） 。
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