【正文】 特點。（第二章 P53~54） 答：成熟的真核生物 mRNA的結構特點是： ① 大多數真核 mRNA在 5′端以 m7GpppN為分子的起始結構。這種結構稱為帽子結構。 帽子結構對于 mRNA 從細胞核向細胞質轉運、與核糖體結合、與翻譯起始因子結合以及mRNA的穩(wěn)定性的維持均起到重要作用； ② 在真核 mRNA的 3′末端，有一段由 80~250個腺苷酸連接而成的多聚腺苷酸結構，通常稱為多聚 A尾。因為在基因內沒有找到它相應的序列，因此認為它是在 RNA生成后才加上去的。隨著 mRNA 存在的時間延續(xù)，這段多聚 A 尾巴慢慢變短。目前認為這種 3′多聚 A尾可能與 5’ 帽結構共同負責 mRNA從細胞核向細胞質的轉位、維系 mRNA的穩(wěn)定性以及翻譯的起始調控。 1一種 DNA 分子含 40%的腺嘌呤核苷酸，另一種 DNA 分子含 30%的胞嘧啶核苷酸，請問那一種 DNA的 Tm值高？為什么？（第二章 P61~62） 答：第一種 DNA的 Tm值高于第二種。 因為第一種 DNA含有較高的 60%鳥嘌呤和胞嘧啶配對，因而堿基互補所形成的氫鍵多于第二種 DNA。 在解鏈過程中，紫外線吸收光度的變化 △ A260 達到最大變化值的一半所對應的溫度稱為DNA 的解鏈溫度，或稱為溶解溫度。在此溫度， 50%的 DNA 雙鏈被打開。 DNA 的 Tm 值與其長度的長短以及堿基的 GC 含量有關。 Tm 值可以根據 DNA 的長度及其 GC 含量來計算，簡單的計算公式為： Tm＝ ＋ （ G＋ C）／（ G＋ C＋ A＋ T） 100% 1何謂限制性核酸內切酶？寫出大多數限制性核酸內切酶識別 DNA 序列的結構特點。（第二章 P62） 答：限制性核酸內切酶就是識別 DNA的特異序列，并在識別部位或其周圍切割雙鏈 DNA的一類內切酶。一般來說，酶切位點的 核酸序列具有回文結構，識別長度為 4~8bp。 1酶的必需基團有哪幾種，各有什么作用？（第三章 P66） 答：酶分子的氨基酸殘基的側鏈是由不同的化學基團構成，其中一些基團與酶的活性密切相關的化學基團稱為酶的必需基團。這些必需基團在一級結構上可能相距很遠，但在空間結構上彼此靠近，組成具有特定空間結構的區(qū)域，能和底物特異性結合并轉化為產物。這一區(qū)域稱為酶的活性中心或活性部位。輔酶或輔基參與酶活性中心的組成。 酶活性中心的必需基團有兩類：結合基團結合底物和輔酶，使之與酶形成復合物；催化基團則影響底物中某些化 學鍵的穩(wěn)定性，催化底物發(fā)生化學反應并將其轉變?yōu)楫a物。 1舉例說明臨床上測定同工酶對疾病的診斷意義。（第三章 P67~68） 答：同工酶是長期進化過程中基因分化的產物。同工酶是指催化的化學反應相同，但酶蛋白的分子結構、理化性質乃至免疫學性質不同的一組酶。同工酶是由不同基因或等位基因編碼的多肽鏈，或同一基因轉錄生成的不同 mRNA 翻譯的不同多肽鏈組成的蛋白質。不同的同工酶在不同組織器官中的含量與分布比例不同。這主要是不同組織器官合成同工酶各亞基的速度不同和各亞基之間雜交的情況不同所致。不同的同工酶對底物的 親和力不同。這使不同的組織與細胞具有不同的代謝特點。當某組織發(fā)生疾病時，可能有某種特殊的同工酶釋放出來，同工酶譜的改變有助于對疾病的診斷。例如心肌梗死后 6~18小時， CK2釋放入血，而 LDH的釋放比 CK遲 1~2天。正常血漿 LDH2的活性高于 LDH1，心肌梗死時可見 LDH1大于 LDH2。這些改變可見于所有的心肌梗死病例。 酶與一般催化劑相比有何異同？（第三章 P68~70） 答：相同點： ① 反應前后無質和量的改變； ② 只催化熱力學允許的反應； ③ 不改變反應的平衡點，不改變反應的平衡常數； ④ 作用的機理都是降低反應的活化能。 不同點： ① 酶的催化效率高； ② 對底物有高度特異性（絕對特異性，相對特異性，立體異構特異性）； ③ 酶在體內處于不斷的更新之中； ④ 酶的催化作用受多種因素的調節(jié)，具有可調節(jié)性； ⑤ 酶是蛋白質，對熱不穩(wěn)定，對反應的條件要求嚴格。 2簡述酶的 “誘導契合假說 ”。（第三章 P70） 答：酶在發(fā)揮其催化作用之前，必須先和底物密切結合。這種結合不是鎖與鑰匙式的機械關系，而是在酶與底物相互接近時，其結構相互誘導、相互變形和相互適應，進而相互結合。這一過程稱為酶 底物結合的誘導契合。酶的構象改變有利于與底物結合；底物在酶的誘導下也發(fā)生變形，處于不穩(wěn)定的過渡態(tài)，易受酶的催化攻擊。過渡態(tài)分子與酶活性中心的結構互相吻合，從而降低反應的活化能。 2說明溫度對酶促反應速度的影響及其實用價值。（第三章 P74~75） 答：酶是生物催化劑，溫度對酶促反應速度具有雙重影響。升高溫度一方面可加快酶促反應速度，但同時也增加酶變性的機會，使酶促反應速度降低。溫度升高到 60℃ 以上時，大多數酶開始變性； 80℃ 時，多數酶的變性已不可逆。綜合這兩種因素，酶促反應速度最大時的環(huán)境溫度 稱為酶促反應的最適溫度。在環(huán)境溫度低于最適溫度時，溫度加快反應速度這一效應起主導作用，溫度每升高 10℃ ，反應速度可加大 1~2 倍。溫度高于最適溫度時，反應速度則因酶變性而降低。 酶的活性雖然隨溫度下降而降低，但低溫一般不使酶破壞。臨床上低溫麻醉就是利用酶的這一性質以減慢組織細胞代謝速度，提高機體對氧和營養(yǎng)物質缺乏的耐受性，利于手術治療。低溫保存生物制品和菌種也是基于這一原理。生化實驗中測定酶的活性時，應嚴格控制反應體系的溫度。酶制劑應保存在冰箱中，從冰箱中取出后應立即應用，以免因酶的變性而影響測定結果。 2比較三種可逆性抑制作用的特點。（第三章 P76~78） 答： ① 競爭性抑制：抑制劑的結構與底物結構相似，可與底物共同競爭酶的活性中心從而阻礙酶和底物結合成中間產物。抑制作用大小與抑制劑和底物的濃度比以及酶對它們的親和力有關。此類抑制作用最大速度 Vmax不變，表觀 Km值升高。 ② 非競爭性抑制：抑制劑與底物結構不相似或完全不同，只與酶的活性中心以外的必需基團結合。不影響酶在結合抑制劑后與底物的結合。底物和抑制劑之間無競爭關系。但酶 底物 抑制劑復合物（ ESI）不能進一步釋放出產物。該抑制作用的強弱 只與抑制劑的濃度有關。此類抑制作用最大速度 Vmax下降，表觀 Km值不變。 ③ 反競爭性抑制：抑制劑只與酶 底物復合物（ ES）結合，使中間產物 ES的量下降。這種抑制既減少從中間產物轉化為產物的量，也同時減少從中間產物解離出游離酶和底物的量，生成的三元復合物不能解離出產物。此類抑制作用最大速度 Vmax和表觀 Km值均下降。 2舉例說明競爭性抑制作用在臨床上的應用。（第三章 P77） 答：以磺胺類藥物為例。 ① 對磺胺類藥物敏感的細菌在生長繁殖時，不能直接利用環(huán)境 中的葉酸，而是在菌體內二氫葉酸合成 酶的催化下，以對氨基苯甲酸、二氫蝶呤和谷氨酸為底物合成二氫葉酸。二氫葉酸是核苷酸合成過程中的輔酶之一四氫葉酸的前體。 ② 磺胺類藥物的化學結構與對氨基苯甲酸相似，是二氫葉酸合成酶的競爭性抑制劑，抑制二氫葉酸的合成。細菌則因核苷酸乃至核酸的合成受阻而影響其生長繁殖。人類能直接利用食物中的葉酸，體內的核酸合成不受磺胺類藥物的干擾。 ③ 根據競爭性抑制的特點，服用磺胺類藥物時必須保持血液中藥物的高濃度，以發(fā)揮其有效的競爭性抑菌作用。 許多屬于抗代謝物的抗癌藥物，如氨甲蝶呤（ MTX）、 5氟尿嘧啶（ 5FU）、 6巰基嘌呤 （ 6MP）等，幾乎都是酶的競爭性抑制劑，它們分別抑制四氫葉酸、脫氧胸苷酸及嘌呤核苷酸的合成，以達到抑制腫瘤的生長的目的。 2說明酶原與酶原激活的意義。（第三章 P80） 答：有些酶在細胞內合成或初分泌，或在其發(fā)生催化功能之前只是酶的無活性前體，必須在一定的條件下，這些酶的前體水解開一個或幾個特定的肽鍵，致使構象發(fā)生改變，表現出酶的活性。這種無活性的酶的前體稱為酶原。酶原向酶的轉化過程稱為酶原的激活。酶原的激活實質上是酶的活性中心形成或暴露的過程。 酶原的激活具有重要的生理意義。 ① 消化管內蛋 白酶以酶原形式分泌出來，不僅保護消化器官