【正文】 特點(diǎn)。（第二章 P53~54） 答：成熟的真核生物 mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是： ① 大多數(shù)真核 mRNA在 5′端以 m7GpppN為分子的起始結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)稱為帽子結(jié)構(gòu)。 帽子結(jié)構(gòu)對(duì)于 mRNA 從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、與核糖體結(jié)合、與翻譯起始因子結(jié)合以及mRNA的穩(wěn)定性的維持均起到重要作用； ② 在真核 mRNA的 3′末端，有一段由 80~250個(gè)腺苷酸連接而成的多聚腺苷酸結(jié)構(gòu)，通常稱為多聚 A尾。因?yàn)樵诨騼?nèi)沒(méi)有找到它相應(yīng)的序列，因此認(rèn)為它是在 RNA生成后才加上去的。隨著 mRNA 存在的時(shí)間延續(xù)，這段多聚 A 尾巴慢慢變短。目前認(rèn)為這種 3′多聚 A尾可能與 5’ 帽結(jié)構(gòu)共同負(fù)責(zé) mRNA從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位、維系 mRNA的穩(wěn)定性以及翻譯的起始調(diào)控。 1一種 DNA 分子含 40%的腺嘌呤核苷酸，另一種 DNA 分子含 30%的胞嘧啶核苷酸，請(qǐng)問(wèn)那一種 DNA的 Tm值高？為什么？（第二章 P61~62） 答：第一種 DNA的 Tm值高于第二種。 因?yàn)榈谝环N DNA含有較高的 60%鳥(niǎo)嘌呤和胞嘧啶配對(duì)，因而堿基互補(bǔ)所形成的氫鍵多于第二種 DNA。 在解鏈過(guò)程中，紫外線吸收光度的變化 △ A260 達(dá)到最大變化值的一半所對(duì)應(yīng)的溫度稱為DNA 的解鏈溫度，或稱為溶解溫度。在此溫度， 50%的 DNA 雙鏈被打開(kāi)。 DNA 的 Tm 值與其長(zhǎng)度的長(zhǎng)短以及堿基的 GC 含量有關(guān)。 Tm 值可以根據(jù) DNA 的長(zhǎng)度及其 GC 含量來(lái)計(jì)算，簡(jiǎn)單的計(jì)算公式為： Tm＝ ＋ （ G＋ C）／（ G＋ C＋ A＋ T） 100% 1何謂限制性核酸內(nèi)切酶？寫出大多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別 DNA 序列的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（第二章 P62） 答：限制性核酸內(nèi)切酶就是識(shí)別 DNA的特異序列，并在識(shí)別部位或其周圍切割雙鏈 DNA的一類內(nèi)切酶。一般來(lái)說(shuō)，酶切位點(diǎn)的 核酸序列具有回文結(jié)構(gòu)，識(shí)別長(zhǎng)度為 4~8bp。 1酶的必需基團(tuán)有哪幾種，各有什么作用？（第三章 P66） 答：酶分子的氨基酸殘基的側(cè)鏈?zhǔn)怯刹煌幕瘜W(xué)基團(tuán)構(gòu)成，其中一些基團(tuán)與酶的活性密切相關(guān)的化學(xué)基團(tuán)稱為酶的必需基團(tuán)。這些必需基團(tuán)在一級(jí)結(jié)構(gòu)上可能相距很遠(yuǎn)，但在空間結(jié)構(gòu)上彼此靠近，組成具有特定空間結(jié)構(gòu)的區(qū)域，能和底物特異性結(jié)合并轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。這一區(qū)域稱為酶的活性中心或活性部位。輔酶或輔基參與酶活性中心的組成。 酶活性中心的必需基團(tuán)有兩類：結(jié)合基團(tuán)結(jié)合底物和輔酶，使之與酶形成復(fù)合物；催化基團(tuán)則影響底物中某些化 學(xué)鍵的穩(wěn)定性，催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)并將其轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物。 1舉例說(shuō)明臨床上測(cè)定同工酶對(duì)疾病的診斷意義。（第三章 P67~68） 答：同工酶是長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中基因分化的產(chǎn)物。同工酶是指催化的化學(xué)反應(yīng)相同，但酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。同工酶是由不同基因或等位基因編碼的多肽鏈，或同一基因轉(zhuǎn)錄生成的不同 mRNA 翻譯的不同多肽鏈組成的蛋白質(zhì)。不同的同工酶在不同組織器官中的含量與分布比例不同。這主要是不同組織器官合成同工酶各亞基的速度不同和各亞基之間雜交的情況不同所致。不同的同工酶對(duì)底物的 親和力不同。這使不同的組織與細(xì)胞具有不同的代謝特點(diǎn)。當(dāng)某組織發(fā)生疾病時(shí)，可能有某種特殊的同工酶釋放出來(lái)，同工酶譜的改變有助于對(duì)疾病的診斷。例如心肌梗死后 6~18小時(shí)， CK2釋放入血，而 LDH的釋放比 CK遲 1~2天。正常血漿 LDH2的活性高于 LDH1，心肌梗死時(shí)可見(jiàn) LDH1大于 LDH2。這些改變可見(jiàn)于所有的心肌梗死病例。 酶與一般催化劑相比有何異同？（第三章 P68~70） 答：相同點(diǎn)： ① 反應(yīng)前后無(wú)質(zhì)和量的改變； ② 只催化熱力學(xué)允許的反應(yīng)； ③ 不改變反應(yīng)的平衡點(diǎn)，不改變反應(yīng)的平衡常數(shù)； ④ 作用的機(jī)理都是降低反應(yīng)的活化能。 不同點(diǎn)： ① 酶的催化效率高； ② 對(duì)底物有高度特異性（絕對(duì)特異性，相對(duì)特異性，立體異構(gòu)特異性）； ③ 酶在體內(nèi)處于不斷的更新之中； ④ 酶的催化作用受多種因素的調(diào)節(jié)，具有可調(diào)節(jié)性； ⑤ 酶是蛋白質(zhì)，對(duì)熱不穩(wěn)定，對(duì)反應(yīng)的條件要求嚴(yán)格。 2簡(jiǎn)述酶的 “誘導(dǎo)契合假說(shuō) ”。（第三章 P70） 答：酶在發(fā)揮其催化作用之前，必須先和底物密切結(jié)合。這種結(jié)合不是鎖與鑰匙式的機(jī)械關(guān)系，而是在酶與底物相互接近時(shí)，其結(jié)構(gòu)相互誘導(dǎo)、相互變形和相互適應(yīng)，進(jìn)而相互結(jié)合。這一過(guò)程稱為酶 底物結(jié)合的誘導(dǎo)契合。酶的構(gòu)象改變有利于與底物結(jié)合；底物在酶的誘導(dǎo)下也發(fā)生變形，處于不穩(wěn)定的過(guò)渡態(tài)，易受酶的催化攻擊。過(guò)渡態(tài)分子與酶活性中心的結(jié)構(gòu)互相吻合，從而降低反應(yīng)的活化能。 2說(shuō)明溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響及其實(shí)用價(jià)值。（第三章 P74~75） 答：酶是生物催化劑，溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度具有雙重影響。升高溫度一方面可加快酶促反應(yīng)速度，但同時(shí)也增加酶變性的機(jī)會(huì)，使酶促反應(yīng)速度降低。溫度升高到 60℃ 以上時(shí)，大多數(shù)酶開(kāi)始變性； 80℃ 時(shí)，多數(shù)酶的變性已不可逆。綜合這兩種因素，酶促反應(yīng)速度最大時(shí)的環(huán)境溫度 稱為酶促反應(yīng)的最適溫度。在環(huán)境溫度低于最適溫度時(shí)，溫度加快反應(yīng)速度這一效應(yīng)起主導(dǎo)作用，溫度每升高 10℃ ，反應(yīng)速度可加大 1~2 倍。溫度高于最適溫度時(shí)，反應(yīng)速度則因酶變性而降低。 酶的活性雖然隨溫度下降而降低，但低溫一般不使酶破壞。臨床上低溫麻醉就是利用酶的這一性質(zhì)以減慢組織細(xì)胞代謝速度，提高機(jī)體對(duì)氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏的耐受性，利于手術(shù)治療。低溫保存生物制品和菌種也是基于這一原理。生化實(shí)驗(yàn)中測(cè)定酶的活性時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)體系的溫度。酶制劑應(yīng)保存在冰箱中，從冰箱中取出后應(yīng)立即應(yīng)用，以免因酶的變性而影響測(cè)定結(jié)果。 2比較三種可逆性抑制作用的特點(diǎn)。（第三章 P76~78） 答： ① 競(jìng)爭(zhēng)性抑制：抑制劑的結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)相似，可與底物共同競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心從而阻礙酶和底物結(jié)合成中間產(chǎn)物。抑制作用大小與抑制劑和底物的濃度比以及酶對(duì)它們的親和力有關(guān)。此類抑制作用最大速度 Vmax不變，表觀 Km值升高。 ② 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制：抑制劑與底物結(jié)構(gòu)不相似或完全不同，只與酶的活性中心以外的必需基團(tuán)結(jié)合。不影響酶在結(jié)合抑制劑后與底物的結(jié)合。底物和抑制劑之間無(wú)競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。但酶 底物 抑制劑復(fù)合物（ ESI）不能進(jìn)一步釋放出產(chǎn)物。該抑制作用的強(qiáng)弱 只與抑制劑的濃度有關(guān)。此類抑制作用最大速度 Vmax下降，表觀 Km值不變。 ③ 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制：抑制劑只與酶 底物復(fù)合物（ ES）結(jié)合，使中間產(chǎn)物 ES的量下降。這種抑制既減少?gòu)闹虚g產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的量，也同時(shí)減少?gòu)闹虚g產(chǎn)物解離出游離酶和底物的量，生成的三元復(fù)合物不能解離出產(chǎn)物。此類抑制作用最大速度 Vmax和表觀 Km值均下降。 2舉例說(shuō)明競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用在臨床上的應(yīng)用。（第三章 P77） 答：以磺胺類藥物為例。 ① 對(duì)磺胺類藥物敏感的細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖時(shí)，不能直接利用環(huán)境 中的葉酸，而是在菌體內(nèi)二氫葉酸合成 酶的催化下，以對(duì)氨基苯甲酸、二氫蝶呤和谷氨酸為底物合成二氫葉酸。二氫葉酸是核苷酸合成過(guò)程中的輔酶之一四氫葉酸的前體。 ② 磺胺類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與對(duì)氨基苯甲酸相似，是二氫葉酸合成酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，抑制二氫葉酸的合成。細(xì)菌則因核苷酸乃至核酸的合成受阻而影響其生長(zhǎng)繁殖。人類能直接利用食物中的葉酸，體內(nèi)的核酸合成不受磺胺類藥物的干擾。 ③ 根據(jù)競(jìng)爭(zhēng)性抑制的特點(diǎn)，服用磺胺類藥物時(shí)必須保持血液中藥物的高濃度，以發(fā)揮其有效的競(jìng)爭(zhēng)性抑菌作用。 許多屬于抗代謝物的抗癌藥物，如氨甲蝶呤（ MTX）、 5氟尿嘧啶（ 5FU）、 6巰基嘌呤 （ 6MP）等，幾乎都是酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，它們分別抑制四氫葉酸、脫氧胸苷酸及嘌呤核苷酸的合成，以達(dá)到抑制腫瘤的生長(zhǎng)的目的。 2說(shuō)明酶原與酶原激活的意義。（第三章 P80） 答：有些酶在細(xì)胞內(nèi)合成或初分泌，或在其發(fā)生催化功能之前只是酶的無(wú)活性前體，必須在一定的條件下，這些酶的前體水解開(kāi)一個(gè)或幾個(gè)特定的肽鍵，致使構(gòu)象發(fā)生改變，表現(xiàn)出酶的活性。這種無(wú)活性的酶的前體稱為酶原。酶原向酶的轉(zhuǎn)化過(guò)程稱為酶原的激活。酶原的激活實(shí)質(zhì)上是酶的活性中心形成或暴露的過(guò)程。 酶原的激活具有重要的生理意義。 ① 消化管內(nèi)蛋 白酶以酶原形式分泌出來(lái)，不僅保護(hù)消化器官