《chap糖類藥物》ppt課件-文庫吧
2024-12-21 03:18 本頁面
【正文】 粘多糖 ? 提取液用 正丁醇與氯仿 混合液除去雜蛋白（或用 三氯乙酸 除雜蛋白），離心除去雜蛋白后的清液， 透析 后用 乙醇沉淀 得多糖。 ? 有些粘多糖可用 水 或 鹽溶液 直接提取，但因大部粘多糖與蛋白質結合于細胞中，因此需用 酶解法 或 堿解法 使糖 白質間的結合鍵斷裂，促使 多糖釋放 ? ? 一般組織中存在 多種 粘多糖。需要對粘多糖進行 分離純化 。 ? （ 1）堿解法 多糖與蛋白質結合的 糖肽鍵 對堿不穩(wěn)定，故可用堿解法使糖與蛋白質分開。 ? 但若 硫酸基 與 鄰羥基 處于 反式結構 或硫酸基在 C3或 C6，此時易發(fā)生 脫硫作用 。這類多糖不宜用 堿解法提取 。 ? （ 2）酶解法 理想的 工具酶 是 專一性低 的、具有廣泛水解作用的 蛋白酶 。鑒于 蛋白酶 不能斷裂 糖肽鍵 及其 附近的肽鍵 ，為除去長肽段，?？膳c 堿解法 合用。 ? 常用的酶制劑有 胰蛋白酶 、 木瓜蛋白酶 和 鏈霉菌蛋白酶 及 枯草桿菌蛋白酶 。 ? （二）多糖的純化 試劑和器材 一、試劑 平衡緩沖溶液： , PH=。 洗脫液： A: NaCl, mol TrisHCl PH=。 B: NaCl, mol TrisHCl PH=。 氯仿、正丁醇、乙醇 (95％ )等，均為分析純。 二、材料 灰樹花子實體。 三、 器材 DEAE Sepharose Fast Flow，旋轉真空蒸發(fā)儀，搖床，離心機，層析柱： 26 10 ? 操作方法 ? 一、粗多糖的提取 ? 將多糖子實體切碎烘干后稱量，采用熱水浸提法，每次原料和水之比均為 1：5，浸提溫度為 70℃ － 80℃ ，浸提時間 3－ 5h，共提取 4次，合并 4次浸提液。真空旋轉蒸發(fā)濃縮，濃縮一倍體積。對多
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